一、基本信息

1. 产品编号：HY-C141

2. 产品名称：MB49-Luc（小鼠膀胱癌荧光素酶标记细胞）

3. 英文名称：MB49-Luc Mouse Bladder Cancer Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称：MB49+luc、MB49-LUC、MB49荧光素酶标记细胞

5. 种属来源：小鼠（C57BL/6 背景）

6. 组织来源：膀胱

7. 疾病背景：膀胱癌

8. 细胞类型：荧光素酶报告基因稳定细胞系

9. 宿主细胞：MB49

10. 构建方式：慢病毒转染稳定携带 Luc 基因

11. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

12. 生长特性：贴壁生长

13. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含量 >1×10⁶cells）

14. 传代代数：10代以内

15. 抗性标记：嘌呤霉素（Puromycin）抗性，筛选梯度 1→5 µg/mL

16. 生物安全等级：BSL-1

17. 质量检测：支原体检测阴性；发光活性检测验证

二、细胞特征

1. 背景介绍：MB49-Luc 由经典小鼠膀胱癌细胞系 MB49 经慢病毒稳定转染 Luc 基因构建。宿主 MB49 源自 C57BL/6 小鼠，是国际公认的膀胱癌同源移植（syngeneic）研究经典模型——可在免疫完整的 C57BL/6 小鼠中建立原位膀胱癌模型，广泛用于膀胱癌免疫治疗、BCG 膀胱灌注疗法及肿瘤微环境研究。

2. 发光性能：组成型表达荧光素酶，发光信号与活细胞数量正相关——适合活体生物发光成像实时追踪膀胱癌原位模型的肿瘤负荷、生长与治疗反应；细胞传代后荧光会衰减，可用嘌呤霉素梯度筛选维持强度。

3. 与双标记株的关系：与站内 MB49-Luc-GFP（HY-C132）同宿主——本株为单 Luc 标记（适合纯发光成像定量实验），HY-C132 为 Luc+GFP 双标记（兼顾发光与荧光示踪），两株可按实验需求选择。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃；湿度 70%–80%

4. 推荐传代比例：首次 1:2，后续 1:2–1:5

5. 推荐换液频率：2–3 次/周

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA（消化 1–2 分钟，难消化细胞可适当延长）

7. 冻存条件：90% 血清 + 10% DMSO（现用现配）或无血清冻存液，冻存密度 1×10⁶–1×10⁷cells/mL，液氮储存

8. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. 膀胱癌免疫治疗研究：免疫完整 C57BL/6 小鼠同源模型中的免疫检查点抑制剂、肿瘤疫苗、CAR-T 疗效评价

2. BCG 膀胱灌注疗法研究：卡介苗灌注治疗的体内模型与机制研究

3. 活体生物发光成像：原位/皮下膀胱癌模型的生长与转移实时无创监测

4. 药物筛选：抗膀胱癌候选药物的体内外活性评价

5. 肿瘤微环境研究：膀胱癌免疫微环境与联合治疗策略

五、产品优势

1. 宿主经典：C57BL/6 同源膀胱癌模型，免疫治疗与 BCG 研究引用广泛

2. 筛选方案成熟：嘌呤霉素 1→5 µg/mL 梯度筛选流程标准化，可长期维持荧光强度

3. 姊妹产品对：与 MB49-Luc-GFP（HY-C132）构成"单标记/双标记"产品组合，客户按需选择

4. 质量可靠：支原体检测阴性，发货前复苏存活细胞状态确认

六、培养方法

1. 细胞复苏：将含 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃ 水浴中迅速摇晃解冻，加入到含 4–6 mL 完全培养基的离心管中混合均匀；1000 RPM离心3–5分钟，弃去上清，完全培养基重悬细胞；加入含 6–8 mL 完全培养基的培养瓶（或皿）中，37℃ 培养过夜；第二天显微镜下观察细胞生长情况和密度。注意：运输用培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用新配制的完全培养基；收到后第一次传代建议 T25 瓶 1:2 传代。

2. 细胞传代：细胞密度达 80%–90% 时传代——弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1–2 次；加入 0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA（T25 瓶 1–2 mL），37℃ 消化 1–2 分钟（难消化细胞适当延长），镜下见细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台轻敲培养瓶，加入 3–4 mL 含 10% FBS 的培养基终止；轻轻打匀后 1000 RPM离心3–5分钟，弃上清，补加 1–2 mL 培养液吹匀；按 1:2 比例分到新 T25 瓶，添加 6–8 mL 新配完全培养基，后续传代按 1:2–1:5 比例。

3. 荧光维持筛选：细胞随传代 Luc 荧光逐渐减弱，如需维持可用嘌呤霉素再次筛选——建议收到细胞后至少传 3 代、冻存留种后再筛选；初次用 1 µg/mL 嘌呤霉素维持，无细胞漂浮或漂浮较少时换 2 µg/mL，以此类推至最高 5 µg/mL；筛选中漂浮细胞大于 60% 时停止筛选，换正常培养基培养至密度约 80% 后再以同浓度继续；5 µg/mL 下正常增殖即可停止筛选，换无药完全培养基正常培养。

4. 细胞冻存：建议培养前 3 代冻存种子批；按传代方法收集细胞计数，推荐冻存密度 1×10⁶–1×10⁷cells/mL；1000 RPM离心3–5分钟弃上清，用现配的冻存液（90% 血清 + 10% DMSO）或无血清冻存液重悬，每管 1 mL；程序降温盒 -80℃ 过夜后转液氮长期保存，记录位置。

注意事项：收到细胞后请按售后要求拍照留存（4×/5× 确认状态，10×/20× 各 2–3 张＋培养瓶外观照），作为售后依据；运输脱落的细胞请离心回收后再接种（勿丢弃）；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

相关产品：MB49-Luc-GFP（小鼠膀胱癌 Luc/GFP 双标记细胞，HY-C132）、MB49（小鼠膀胱癌细胞）、T24-Luc（人膀胱癌荧光素酶细胞）