1. 产品编号:HY-A115
2. 产品名称:LK-2 人肺癌细胞
3. 英文名称:Human Lung Squamous Cell Carcinoma Cell Line
4. 细胞别称:LK-2; LK 2; LK2
5. 种属来源:人(男性患者,74岁)
6. 组织来源:肺(原发性肿瘤)
7. 疾病背景:肺鳞状细胞癌
8. 细胞类型:上皮样细胞
9. 生长特性:贴壁生长
10. 细胞形态:多边形,上皮样
11. 产品规格:1 支冻存管
12. 产品类别:肿瘤细胞系
13. 生物安全等级:1级
14. 储存条件:液氮
15. 运输条件:干冰
16. 生长条件:37℃,5% CO₂
17. 产品代码:LK 2; LK2
18. 供应限制:仅供科研使用
1. 形态特征:典型的多边形上皮样细胞,贴壁生长,可在体外连续稳定传代。
2. 组织学标志物:表达细胞角蛋白,并表现出鳞状分化的标志物。
3. 遗传特征:携带肺鳞癌常见的遗传学改变,包括TP53突变,这与其致瘤性和侵袭性表型密切相关。
4. 功能特性:增殖与侵袭:具有强大的增殖能力和侵袭性,能模拟肿瘤在体内的进展行为。
致瘤性:具有肿瘤形成和侵袭的潜能。
5. 代表性:是研究肺鳞状细胞癌(一种主要的非小细胞肺癌亚型)的经典细胞模型。
1. 基础培养基:RPMI 1640
2. 完全培养基:RPMI 1640 + 10% 胎牛血清 (FBS)
3. 培养环境:温度:37℃;气相:5% CO₂
4. 生长模式:贴壁生长
1. 肺鳞癌生物学研究:研究肺鳞状细胞癌的发病机制、分子机制、信号通路及肿瘤微环境。
2. 药物筛选与评估:用于化疗药物、靶向治疗药物的体外筛选和药效评估,是评估新疗法反应的重要工具。
3. 耐药机制研究:探索肿瘤细胞对化疗或靶向药物产生耐药的分子机制。
4. 生物标志物发现:用于识别与诊断、预后或治疗反应相关的潜在生物标志物。
5. 肿瘤进展与侵袭研究:研究驱动肿瘤生长、局部侵袭和转移的关键因子。
6. 精准医学研究:将特定的遗传学改变(如TP53突变)与治疗反应相关联,服务于精准医疗策略的开发。
1. 典型的肺鳞癌模型:源自原发性肺鳞癌,细胞学和组织学特征典型,是研究该亚型肺癌的可靠工具。
2. 遗传背景明确:携带肺鳞癌中高发的TP53突变,临床相关性高,适合用于靶向突变相关通路的研究。
3. 功能性强:兼具强增殖和侵袭能力,能很好地模拟肿瘤的恶性生物学行为。
4. 应用广泛:适用于从基础癌症生物学到转化医学(药物开发、生物标志物鉴定)的多个研究领域。
1. 复苏操作:从液氮或干冰中快速取出冻存管。在37℃水浴中轻柔摇晃,快速解冻(约1-2分钟)。将细胞悬液转移至含预温完全培养基(RPMI 1640 + 10% FBS)的离心管中。离心(推荐200-300×g,5分钟),小心弃去上清。用新鲜预热的完全培养基轻柔重悬细胞。将细胞悬液接种至预先加入适量培养基的培养瓶或培养皿中,轻轻摇晃使细胞分布均匀。置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。
2. 传代操作:时机判断:当细胞融合度达到80%-90%时进行传代。
消化:弃去旧培养基,用无菌PBS轻柔洗涤细胞1-2次。加入适量胰蛋白酶-EDTA消化液(如0.25%胰酶),置于培养箱中消化1-3分钟。
终止消化:在显微镜下观察,当细胞变圆、间隙增大时,加入等体积的含血清完全培养基终止消化。
收集细胞:用移液器轻轻吹打瓶底,使细胞完全脱落,形成单细胞悬液,转移至离心管。
离心:200-300×g离心5分钟。
重悬与接种:弃上清,用新鲜完全培养基重悬细胞。按适当比例(如1:3至1:6)接种到新的培养器皿中。
3. 冻存操作:制备冻存液:使用细胞冻存液(如90% FBS + 10% DMSO,或商业无血清冻存液)。
收集细胞:按传代方法消化并离心收集处于对数生长期的健康细胞。
重悬:用预冷的冻存液重悬细胞,调整密度至约5×10⁶ to 1×10⁷ cells/mL。
分装:分装至冻存管,每管1-1.5 mL。
程序降温:使用程序降温盒或逐步降温法(4℃ 30分钟,-20℃ 2小时,-80℃过夜),最后转移至液氮中长期保存。
1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制:仅限于科研用途。