1. 产品编号:HY-A135
2. 产品名称:KMM-1 人骨髓瘤细胞
3. 英文名称:Human Multiple Myeloma Cell Line
4. 细胞别称:KMM-1; KMM1
5. 种属来源:人(东亚裔男性患者,62岁)
6. 组织来源:皮下浆细胞瘤
7. 疾病背景:多发性骨髓瘤
8. 细胞类型:淋巴细胞样
9. 生长特性:悬浮生长
10. 细胞形态:小圆形细胞,偶见多核细胞,具有淋巴母细胞形态
11. 产品规格:1 支冻存管
12. 产品类别:肿瘤细胞系
13. 生物安全等级:1级
14. 储存条件:液氮
15. 运输条件:干冰
16. 生长条件:37℃,5% CO₂
17. 生长模式:悬浮
18. 产品代码:KMM1
19. 供应限制:仅供科研使用
1. 形态特征:悬浮生长的小圆形细胞,具有典型的淋巴母细胞形态。电镜下可见明显的核仁和丰富的粗面内质网,符合浆细胞的超微结构特征。偶见多核细胞。
2. 分泌功能:分泌免疫球蛋白λ轻链 (Lambda chains)。
3. 病毒学特征:EB病毒阴性 (EBV-negative)。
4. 免疫表型:表达浆细胞相关标志物,如CD38和CD138,证实其浆细胞表型。
5. 遗传特征:具有复杂的核型,携带多发性骨髓瘤典型的染色体改变,包括6q缺失 [del(6q)] 和13号染色体单体 (-13)。
6. 分化阶段:代表晚期B细胞分化阶段。
7. 功能特性:致瘤性:在免疫缺陷小鼠体内具有强致瘤性,可形成可触及的肿瘤。
转移潜能:表现出转移行为,有扩散至其他组织的潜力。
1. 基础培养基:RPMI 1640
2. 完全培养基:RPMI 1640 + 10% 胎牛血清 (FBS)
3. 培养环境:温度:37℃;气相:5% CO₂
4. 生长模式:悬浮生长
1. 多发性骨髓瘤病理研究:研究浆细胞骨髓瘤的发病机制、疾病进展和转移行为。
2. 治疗反应与耐药性研究:评估化疗药物、靶向药物(包括新型小分子抑制剂)、免疫疗法(如CAR-T、单抗)及小分子RNA疗法对骨髓瘤细胞的疗效和耐药机制。
3. 诱导凋亡研究:用于研究潜在抑制剂或治疗剂诱导癌细胞凋亡的机制。
4. 免疫表型评估:用于临床前试验中的免疫表型和免疫分型评估。
5. 抗氧化与抗增殖研究:研究化合物的抗氧化、抗增殖及免疫刺激效应对骨髓瘤细胞的影响。
6. 肿瘤生物学研究:作为具有强致瘤和转移潜能的模型,用于研究肿瘤微环境、侵袭和转移机制。
1. 经典的骨髓瘤模型:源自患者皮下浆细胞瘤,具有典型的多发性骨髓瘤细胞遗传学特征(如del(6q), -13)和免疫表型(CD38+, CD138+),临床相关性高。
2. 功能全面:兼具强体外增殖能力、体内致瘤性及转移潜能,能全面模拟疾病的恶性进展。
3. 分泌特征明确:分泌Lambda轻链,便于进行骨髓瘤相关蛋白(M蛋白)的研究和检测。
4. EBV阴性:避免了EB病毒可能带来的实验干扰。
5. 应用广泛:是研究多发性骨髓瘤从基础生物学到新型疗法开发(包括靶向治疗和免疫治疗)的宝贵工具。
1. 复苏操作:从液氮或干冰中快速取出冻存管。在37℃水浴中轻柔摇晃,快速解冻(约1-2分钟)。将细胞悬液转移至含预温完全培养基(RPMI 1640 + 10% FBS)的离心管中。离心(推荐200-300×g,5分钟),小心弃去上清。用新鲜预热的完全培养基轻柔重悬细胞。将细胞悬液接种至培养瓶或培养皿中。置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。
2. 传代操作:时机判断:每2-3天传代一次,当细胞密度达到约0.5-1.0×10⁶ cells/mL,或培养基颜色明显变黄时进行。细胞收集:轻柔吹打重悬细胞,取适量细胞悬液。接种:将取出的细胞悬液转移至新的培养瓶,并加入新鲜的完全培养基,调整至适宜的起始密度(如~0.2-0.3×10⁶ cells/mL)。通常按1:3至1:5的比例进行分传。
3. 冻存操作:制备冻存液:使用细胞冻存液(如90% FBS + 10% DMSO,或商业无血清冻存液)。
收集细胞:离心收集处于对数生长期、活力高的细胞(300×g,5分钟)。
重悬:用预冷的冻存液重悬细胞,调整密度至约5×10⁶ to 1×10⁷ cells/mL。
分装:分装至冻存管,每管1-1.5 mL。
程序降温:使用程序降温盒或逐步降温法(4℃ 30分钟,-20℃ 2小时,-80℃过夜),最后转移至液氮中长期保存。
1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制:仅限于科研用途。