1. 产品编号:HY-A109
2. 产品名称:M-07e 人白血病细胞
3. 英文名称:Human Acute Megakaryoblastic Leukemia Cell Line
4. 细胞别称:M-07e; M-07E; M-O7e; M07-e; M07e; Mo7e; MO7e; M07E; MO7E
5. 种属来源:人(高加索女性婴儿,6月龄)
6. 组织来源:外周血
7. 疾病背景:急性巨核细胞白血病 (AML M7)
8. 细胞类型:白血病细胞
9. 生长特性:悬浮生长,细胞因子依赖
10. 细胞形态:淋巴母细胞样
11. 产品规格:1 支冻存管
12. 产品类别:肿瘤细胞系
13. 生物安全等级:1级
14. 储存条件:液氮
15. 运输条件:干冰
16. 生长条件:37℃,5% CO₂
17. 产品代码:M-07E; M-O7e; M07-e; M07e; Mo7e; MO7e; M07E; MO7E
18. 供应限制:仅供科研使用
1. 形态特征:淋巴母细胞样,悬浮生长。
2. 细胞因子依赖性:增殖严格依赖粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)或白细胞介素-3(IL-3)。
3. 细胞因子响应谱:对多种细胞因子有响应,包括GM-CSF、干扰素(IFNs)、白细胞介素(ILs)、神经生长因子(NGF)、干细胞因子(SCF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血小板生成素(TPO)。
4. 遗传特征:近二倍体核型,携带儿科AML中常见的三体性19和13q缺失。
5. 功能特性:分化潜能:是研究巨核细胞分化的可靠体外模型。
非致瘤性:在免疫缺陷小鼠体内不形成肿瘤。
6. 代表性:代表罕见的急性巨核细胞白血病(AML M7)亚型。
1. 基础培养基:RPMI 1640
2. 完全培养基:RPMI 1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 2mM L-谷氨酰胺 + 1% 青霉素-链霉素
3. 必需添加因子:培养基中必须补充10 ng/mL的GM-CSF或IL-3以支持细胞生长和增殖(也可使用EPO)。
4. 培养环境:温度:37℃;气相:5% CO₂,湿润环境
5. 生长模式:悬浮培养,细胞因子依赖
1. 细胞因子信号研究:研究细胞因子依赖性白血病细胞生长、JAK/STAT信号通路、白细胞介素受体生化特性及配体后信号传导。
2. 巨核细胞生成研究:研究巨核细胞分化和血小板生成过程,特别是血小板生成素(TPO)对血小板产生的影响。
3. 白血病干细胞生物学:用于探索白血病干细胞的相关生物学特性。
4. 药物与因子筛选:用于测试不同细胞因子、生长因子或药物对巨核系细胞增殖、分化和存活的影响。
5. 儿科白血病模型:作为携带特定细胞遗传学异常(三体19,13q缺失)的儿科急性白血病模型。
1. 经典依赖模型:细胞因子(GM-CSF/IL-3)依赖性生长的经典模型,非常适合研究细胞因子信号网络和生长调控。
2. 分化研究利器:是研究巨核细胞分化和血小板生成的首选体外细胞系之一,响应多种相关因子。
3. 信号通路明确:广泛用于JAK/STAT等关键信号通路的研究,机制清晰。
4. 安全性高:体外模型,且在免疫缺陷鼠体内无致瘤性,使用相对安全。
1. 复苏操作:快速解冻:从液氮中取出冻存管,立即置于37℃水浴中轻柔摇晃至完全解冻。
转移与稀释:将细胞悬液转移至含预温完全培养基的离心管中。
去除冻存液:300×g离心5分钟,小心弃去含有DMSO的上清。
重悬与接种:用新鲜预热的、已添加10 ng/mL GM-CSF或IL-3的完全培养基轻柔重悬细胞。
培养:将细胞接种至培养瓶中,置于37℃、5% CO₂培养箱中。
2. 传代操作:时机判断:每2-3天传代一次,当细胞密度达到约2-3×10⁶ cells/mL时进行。
细胞收集:轻柔吹打重悬细胞,取部分细胞悬液。
接种:将取出的细胞悬液转移至新的培养瓶,并加入新鲜的、已添加生长因子的完全培养基。通常按1:3至1:5的比例进行分传,以维持推荐的细胞密度。
3. 冻存操作:制备冻存液:使用冻存培养基(90% FBS + 10% DMSO)。
收集细胞:离心收集细胞(300×g,5分钟)。
重悬:用冻存液重悬细胞,密度调整为1-2×10⁶ cells/mL。
分装:分装至冻存管。
程序降温:使用程序降温盒或逐步降温法,将细胞缓慢冷却至-80℃,最后转移至液氮中长期保存。
1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。
2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。
3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。
4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。
5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。
6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。
7. 用途限制:仅限于科研用途。