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MCF-7(人乳腺癌细胞)

货号:HY-A277

一、基本信息

1. 产品编号:HY-A277

2. 产品名称:MCF-7 人乳腺癌细胞

3. 英文名称:Human Breast Adenocarcinoma Cell Line

4. 细胞别称:MCF7;MCF-7

5. 种属来源:人(高加索女性,69岁)

6. 组织来源:胸腔积液(转移灶)

7. 疾病背景:转移性乳腺腺癌

8. 细胞类型:肿瘤细胞

9. 生长特性:贴壁生长,可形成松散附着三维细胞团,并伴有悬浮活细胞。

10. 细胞形态:上皮样,呈“鹅卵石”样。

11. 产品规格:1 支冻存管

12. 产品类别:肿瘤细胞系

13. 生物安全等级:1级

14. 储存条件:液氮

15. 运输条件:干冰

16. 生长条件:37℃,5% CO₂

17. 供应限制:仅供科研使用

二、细胞特征

1. 受体状态:雌激素受体阳性(ER⁺)、孕激素受体阳性(PR⁺)、HER2阴性,代表Luminal A型乳腺癌。

2. 核型特征:近二倍体核型(46-50条染色体)。

3. 分子标记:阳性表达:上皮标记物E-钙粘蛋白、细胞角蛋白;核雌激素受体α(ERα);WNT7B(非致癌基因);胰岛素样生长因子结合蛋白IGFBP-2/4/5;细胞间粘附分子1(ICAM-1)。

                       功能:通过NF-κB调控促进集落形成和细胞粘附。

4. 功能特性:具有分化乳腺上皮特征,如能通过ERα响应雌二醇刺激,并可形成上皮圆顶。

5. 生长特性:生长缓慢,初始传代后可能出现延迟贴壁。肿瘤坏死因子α(TNF-α)可抑制其生长。

6. 致瘤性:在雌激素补充的裸鼠中可形成肿瘤。

三、培养条件

1. 基础培养基:DMEM或RPMI-1640

2. 推荐培养基:DMEM

3. 添加成分:含10%胎牛血清(FBS)的完全培养基

4. 培养环境:温度:37℃;气相:5% CO₂

四、产品应用

1. 激素信号研究:研究雌激素、孕激素及其他类固醇激素信号通路。

2. 乳腺癌模型:作为ER阳性、Luminal A型乳腺癌的经典模型,用于研究乳腺癌进展和治疗反应。

3. 耐药机制:探索对ER靶向疗法(如他莫昔芬)的耐药机制。

4. 上皮生物学:研究上皮细胞行为、细胞粘附和分化状态。

5. WNT信号通路:研究WNT信号在乳腺癌中的作用。

6. 药物筛选:用于激素相关疗法及新型抗癌药物的筛选与评估。

五、产品优势

1. 金标准模型:全球使用最广泛的ER阳性乳腺癌细胞系,研究基础深厚,数据可比性强。

2. 分子特征明确:受体状态(ER⁺/PR⁺/HER2⁻)清晰,代表重要的临床亚型。

3. 多功能性:可用于激素信号、耐药、上皮生物学、药物筛选等多个研究领域。

4. 资源丰富:相关的抗体、检测方法、文献和实验方案极为丰富。

六、培养方法

1. 复苏操作:快速从液氮或干冰中取出冻存管。在37℃水浴中轻柔摇晃,快速解冻。将细胞悬液转移至含预温完全培养基的离心管中,轻柔混匀。离心(200×g,5分钟),弃去上清,用新鲜完全培养基重悬细胞。将细胞接种至培养器皿中,置于37℃、5% CO₂培养箱中。

2. 传代操作(要点):时机:当细胞融合度达70%-80%时传代,避免过度汇合。

                                   消化:用PBS清洗后,加入适量胰蛋白酶-EDTA消化液覆盖细胞层。

                                   观察:于37℃孵育3-5分钟,定期镜下观察,待细胞变圆、脱壁即可(避免过度消化)。

                                   终止:加入含血清的完全培养基中和胰酶。

                                   收集与接种:轻柔吹打制成单细胞悬液,离心后重悬,按适当比例(如1:3至1:5)接种至新培养瓶。

3. 维持分化状态的建议:血清质量:使用高质量、批次稳定的胎牛血清。

                                        轻柔操作:消化和重悬时动作轻柔,减少细胞应激。

                                        条件一致:保持培养条件(温度、CO₂、培养基成分)稳定。

                                        控制代次:保持较低的传代次数,以减少遗传漂变。

                                        避免过密:勿让细胞生长过度融合。

4. 冻存操作:选择对数生长期、状态良好的细胞。按传代方法消化收集细胞,计数。离心后,用细胞冻存液(如含10% DMSO的胎牛血清)重悬细胞至适宜密度(例如1-5×10^6 cells/mL)。分装至冻存管,进行程序性降温,最终存于液氮。

七、注意事项

1. 无菌操作:所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机:细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制:胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持:保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定:建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制:建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制:仅限于科研用途。


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