一、基本信息

1. 产品编号：HY-C140

2. 产品名称：HT-22（小鼠海马神经元细胞）

3. 英文名称：HT-22 Mouse Hippocampal Neuron Cell Line

4. 细胞别称：HT22、HT-22 cells

5. 种属来源：小鼠

6. 组织来源：海马（神经元）

7. 疾病背景：正常细胞（永生化神经元系）

8. 细胞类型：永生化神经元细胞系

9. 宿主特性：缺乏功能性谷氨酸受体——谷氨酸毒性通过抑制半胱氨酸（cystine）摄取、耗竭谷胱甘肽（GSH）诱发氧化损伤（区别于受体介导的兴奋毒性）

10. 细胞形态：神经元样（双极/多极突起），贴壁生长

11. 生长特性：贴壁生长

12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

13. 传代代数：10代以内

14. RRID：—（以引种证书为准）

15. 保藏机构：—（Mori 实验室建立并广泛传代，见引种证书）

16. 生物安全等级：BSL-1

17. 质量检测：STR 鼠源鉴定正确，支原体检测阴性

二、细胞特征

1. 背景介绍：HT-22 是由 Mori N 等建立的经典小鼠海马神经元细胞系（源自原代海马培养中永生化的神经元，为 HT-4 细胞系的亚克隆），在神经科学研究中被引用数千次——是体外神经毒性与神经保护研究中使用最广泛的神经元模型之一。

2. 核心机制特色——非受体依赖性谷氨酸毒性：HT-22 缺乏功能性离子型谷氨酸受体——谷氨酸不通过 NMDA/AMPA 受体产生毒性，而是通过抑制 system Xc⁻ 胱氨酸转运体、阻断半胱氨酸摄取，导致谷胱甘肽（GSH）合成受阻与氧化损伤（细胞死亡可被抗氧化剂如 N-乙酰半胱氨酸、trolox 阻断）。这一独特机制使 HT-22 成为研究氧化应激在神经退行性疾病中作用的理想模型。

3. 应用价值：广泛用于阿尔茨海默病、帕金森病、缺血性脑损伤、癫痫及药物神经毒性评价的体外研究——神经保护候选化合物（抗氧化剂、天然产物、中药单体）的初筛金标准体系。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

4. 推荐传代比例：1:2–1:4

5. 推荐换液频率：2–3 次/周

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA（消化 1–2 分钟，镜下观察细胞回缩变圆即终止）

7. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

8. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. 谷氨酸毒性研究：氧化应激型兴奋毒性机制、胱氨酸摄取与 GSH 代谢研究

2. 神经保护药物筛选：抗氧化剂、天然产物、中药单体的神经保护活性评价

3. 神经退行性疾病模型：阿尔茨海默、帕金森、亨廷顿病的体外机制研究

4. 缺血缺氧研究：脑缺血再灌注损伤的氧化应激机制

5. 药物神经毒性评价：候选化合物的神经毒性早期筛查

五、产品优势

1. 模型金标准：神经保护研究引用最广的小鼠神经元细胞系之一，实验体系成熟

2. 机制独特：非受体依赖性谷氨酸毒性（胱氨酸-GSH-氧化应激轴）——机制研究窗口独特

3. 培养简便：DMEM+10% FBS 常规培养，贴壁稳定，传代性能好

4. 质量可靠：STR 鼠源鉴定正确，支原体检测阴性

六、培养方法

1. 细胞复苏：将完全培养液置 37℃ 水浴预热 30 分钟；从液氮取出冻存管暂放 -80℃ 让残余液氮挥发；复苏时稍稍甩动去除残留干冰和液氮，迅速用镊子夹住盖子放入 37℃ 水浴快速晃动（水不能没过盖子），约 1 分钟完全融化；超净台内酒精棉球擦拭消毒，将细胞悬液转入含 6–7 mL 预温完全培养基的 15 mL 离心管，1100 rpm室温离心 4 分钟；弃上清，1 mL 新鲜完全培养基重悬至单细胞悬液，转入装有 4 mL 完全培养基的 T25 培养瓶（或 6 cm 皿），37℃、5% CO₂ 饱和湿度培养。注意：请勿直接复苏到 T75 培养瓶或 10 cm 培养皿。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，尽量吸净原培养基，加 2 mL 左右 PBS 轻轻晃动润洗后吸弃；加入 1 mL 左右 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 轻轻晃动浸润所有细胞，放入培养箱消化——镜下观察到细胞回缩变圆、细胞间隙变大时立即加 3 mL 含血清培养基终止；反复吹打成单细胞悬液，收集细胞悬液 1100 rpm离心4分钟，弃上清，加新鲜完全培养基重悬，按比例接种新瓶，补足培养基，拧松瓶盖或用透气瓶盖培养。

3. 细胞冻存：无血清冻存液重悬细胞，程序降温后液氮长期保存；建议在较低代次冻存备份。

注意事项：实验用谷氨酸处理建模时，注意 HT-22 的毒性机制为胱氨酸摄取抑制型氧化损伤——如需同时研究受体介导兴奋毒性，请选用含功能性谷氨酸受体的模型；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

相关产品：HT-4（小鼠海马神经元细胞，亲本系）、Neuro-2a（小鼠神经母细胞瘤细胞）、BV2（小鼠小胶质细胞）