一、基本信息

1. 产品编号：HY-C138

2. 产品名称：GL261-Luc（小鼠胶质瘤荧光素酶标记细胞）

3. 英文名称：GL261-Luc Mouse Glioma Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称：GL261-luc、GL261(luc)、GL261荧光素酶标记细胞

5. 种属来源：小鼠（C57BL/6 背景）

6. 组织来源：脑（胶质瘤）

7. 疾病背景：胶质瘤（化学诱导）

8. 细胞类型：荧光素酶报告基因稳定细胞系

9. 宿主细胞：GL261

10. 细胞形态：成纤维细胞样（梭形、多角形或卵圆形）

11. 生长特性：贴壁生长

12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

13. 传代代数：5代以内（发货代次）

14. RRID：—（以引种证书为准）

15. 保藏机构：—（历史经典细胞系，广泛传代，见引种证书）

16. 抗性标记：嘌呤霉素（Puromycin）抗性，筛选梯度 1→5 µg/mL

17. 生物安全等级：BSL-2（源站标注）

18. 质量检测：STR 鼠源鉴定正确，支原体检测阴性；发光活性验证

二、细胞特征

1. 背景介绍：GL261-Luc 由经典小鼠胶质瘤细胞系 GL261 经慢病毒稳定转染 luc 基因构建，带嘌呤霉素抗性。宿主 GL261 源自 C57BL/6 小鼠化学诱导的胶质瘤，是颅内原位脑肿瘤研究的"金标准"模型——与 C57BL/6 同源，可在免疫完整的小鼠中建立原位胶质瘤模型，广泛用于胶质瘤免疫治疗、肿瘤疫苗、免疫检查点抑制剂及脑肿瘤微环境研究（该模型免疫治疗响应数据已被大量文献验证）。

2. 发光性能：组成型表达荧光素酶，发光信号与活细胞数量正相关——颅内原位成像可定量追踪肿瘤负荷，克服脑肿瘤体积无法直接测量的难题；细胞传代后荧光会衰减，可用嘌呤霉素梯度筛选维持强度。

3. 生长特性：成纤维细胞样（梭形/多角形/卵圆形），贴壁生长但贴壁较弱、消化时间偏短；细胞传代易成团聚集，需注意吹散；发货代次控制在 5 代以内，细胞状态好、活性高。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃；饱和湿度

4. 推荐传代比例：1:2–1:4（视细胞生长速度及密度决定）

5. 推荐换液频率：每 2–3 天一次

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA（消化时间偏短，严格控制——细胞贴壁较弱，见镜下细胞间隙变大未完全脱落即终止）

7. 冻存条件：92% FBS + 8% DMSO 或无血清冻存液，液氮储存

8. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. 脑肿瘤免疫治疗：胶质瘤疫苗、免疫检查点抑制剂、CAR-T 体内疗效评价（颅内原位模型）

2. 活体生物发光成像：颅内肿瘤负荷定量、疗效动态监测

3. 肿瘤微环境研究：脑肿瘤免疫微环境、血脑屏障与药物递送研究

4. 放化疗研究：放疗、替莫唑胺方案敏感性及耐药机制研究

5. 药物筛选：抗胶质瘤候选药物的体内外活性评价

五、产品优势

1. 宿主权威：C57BL/6 同源胶质瘤"金标准"模型，脑肿瘤免疫治疗引用极广

2. 定量成像：颅内原位发光定量——突破脑肿瘤体积测量瓶颈

3. 筛选方案成熟：嘌呤霉素 1→5 µg/mL 梯度筛选流程标准化，长期维持荧光

4. 代次保障：发货传代 5 代以内，细胞状态好、活性高，附培养技术指导

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管，将细胞悬液转入含完全培养基的离心管，900 rpm离心3–5分钟去除冻存液，新鲜完全培养基重悬后接种至 T25 培养瓶（加 10–12 mL 培养基），37℃、5% CO₂ 饱和湿度培养，24小时后换液。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，尽量吸净原培养基，加 3–4 mL 常温 PBS 轻轻润洗细胞 10–20 秒后吸弃；T25 瓶加 1 mL 左右 0.25% 胰蛋白酶，轻轻晃动培养瓶使胰酶铺匀瓶底细胞层，放入 37℃ 培养箱消化——细胞间隙变大、未完全脱落时即加 2–3 mL 完全培养基终止（消化时间偏短，严格控制）；混匀细胞，900 rpm离心3–5分钟，弃上清；加新鲜完全培养基轻轻重悬并尽量吹散细胞团，均匀分至新培养瓶（1:2–1:4），补足培养基静置培养；每 2–3 天换液。

3. 荧光维持筛选：细胞传代后 Luc 荧光会逐渐减弱——初次用 1 µg/mL 嘌呤霉素维持，无细胞漂浮或漂浮较少时换 2 µg/mL，以此类推至最高 5 µg/mL；筛选中漂浮细胞大于 60% 时停止筛选，换正常培养基培养至细胞密度约 80% 后再以同浓度继续；5 µg/mL 下细胞正常增殖即可停止筛选，换无药完全培养基正常培养。

4. 细胞冻存：消化离心获得细胞沉淀后，加 92% FBS + 8% DMSO 冻存液或无血清冻存液轻轻重悬至 200–300 万/mL，每管 1 mL，程序降温盒 -80℃ 过夜后转液氮；冻存后及时复苏一管检查冻存活性。

注意事项：细胞贴壁较弱、消化时间偏短，严格控制消化时间（不同品牌胰酶差异大）；控制细胞密度，避免长时间高密度培养影响状态；传代尽量吹散细胞团；培养中黑点较多多与细胞碎片/状态相关，注意换液与密度管理；本产品生物安全等级为 BSL-2（源站标注），请在二级生物安全柜内操作；本产品仅供科学研究使用。

相关产品：GL261（小鼠胶质瘤细胞）、CT-2A-Luc（小鼠胶质瘤荧光素酶细胞）、GL261-EGFP（小鼠胶质瘤EGFP标记细胞）