一、基本信息

1. 产品编号：HY-C133

2. 产品名称：H22-Luc（小鼠肝癌荧光素酶标记细胞）

3. 英文名称：H22-Luc Mouse Hepatoma Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称：H22/LUC、H22-LUC、小鼠肝癌细胞荧光素酶标记株

5. 种属来源：小鼠

6. 组织来源：肝（腹水瘤）

7. 疾病背景：肝癌（小鼠腹水瘤模型）

8. 细胞类型：荧光素酶报告基因稳定细胞系

9. 宿主细胞：H22（Hepatoma-22）

10. 构建方式：慢病毒稳定转染萤火虫荧光素酶

11. 抗性标记：嘌呤霉素（Puromycin）抗性，药筛浓度 1.0 µg/mL，维持浓度 0.5 µg/mL

12. 细胞形态：淋巴母细胞样，悬浮生长

13. 生长特性：悬浮生长

14. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

15. 传代代数：10代以内

16. 保藏机构：—（国家实验细胞资源共享平台收录：1101MOU-PUMC000309）

17. 生物安全等级：BSL-1

18. 质量检测：STR 鼠源鉴定正确，支原体检测阴性；发光活性检测验证

二、细胞特征

1. 背景介绍：H22-Luc 由经典小鼠肝癌细胞系 H22 经慢病毒稳定转染构建——H22 于 1952 年由前苏联医学科学院肿瘤研究所建立，源自 C3HA 小鼠诱发的 H22 肝癌实体瘤瘤细胞悬液，经昆明种（KM）小鼠皮下移植后转为腹水瘤，后由大连医科大学建立并推广。该瘤株在 KM 小鼠、615 小鼠、C57BL/6 小鼠、BALB/c 小鼠体内均可形成实体瘤和腹水瘤，是国内抗肿瘤药物筛选与肝癌移植瘤研究中使用最广泛的小鼠肝癌模型之一。

2. 生长特性：淋巴母细胞样，悬浮生长；细胞增殖快、产酸多、营养需求高——营养不足时培养液变黄、细胞易死亡，建议每日换液或采用半换液/离心换液方式；体外连续传代 4–5 代后活力会下降，可通过腹水培养恢复。

3. 发光性能：组成型稳定表达萤火虫荧光素酶，带嘌呤霉素抗性；传代 8 代左右后如需维持荧光强度，可用嘌呤霉素（4 µg/mL）巩固筛选一次。

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI-1640

2. 培养基配方：89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 筛选维持：可添加 0.5 µg/mL 嘌呤霉素维持 Luc 表达稳定（常规培养亦可不加）

4. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

5. 推荐传代比例：1:2–1:4（悬浮细胞离心换液或半数换液）

6. 推荐换液频率：营养需求高，建议每日换液或半换液（最迟不超过 2–3 天）

7. 细胞收集方式：离心 1000–1200 rpm（约 250×g）3–5 分钟

8. 冻存条件：90% FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液，液氮储存

9. 倍增时间：约48–72小时

四、产品应用

1. 肝癌活体成像：皮下/原位肝癌模型的生长与转移实时无创监测（成瘤率 >95%，14 天达 300–500 mm³）

2. 腹水瘤模型：小鼠腹腔接种腹水瘤模型（KM/615/C57BL/6/BALB/c 多品系适用）

3. 抗肿瘤药物筛选：中药多糖/单体、化疗药物、免疫治疗的体内外药效评价（国内药筛经典模型）

4. 免疫治疗研究：免疫完整同系小鼠模型中的肿瘤疫苗与免疫检查点抑制剂评价

5. 报告基因检测：荧光素酶活性检测阳性对照

五、产品优势

1. 宿主经典：1952 年建系，国内使用最广泛的小鼠肝癌模型之一，国家细胞资源共享平台收录

2. 成瘤稳定：多品系小鼠体内成瘤，腹水瘤/实体瘤双模型成熟

3. 发光稳定：慢病毒稳定表达、嘌呤霉素抗性，传代后可用药物巩固筛选

4. 质量可靠：STR 鼠源鉴定正确，支原体检测阴性

六、培养方法

1. 细胞复苏：将完全培养液置 37℃ 水浴预热 30 分钟；从液氮取出冻存管暂放 -80℃ 让残余液氮挥发；复苏时稍稍甩动去除残留干冰和液氮，迅速用镊子夹住盖子放入 37℃ 水浴快速晃动（水不能没过盖子），约 1 分钟完全融化；超净台内酒精棉球擦拭消毒，将细胞悬液转入含 6–7 mL 预温完全培养基的 15 mL 离心管，1100 rpm 室温离心 4 分钟；弃上清，1 mL 新鲜完全培养基重悬至单细胞悬液，转入装有 4 mL 完全培养基的 T25 培养瓶（或 6 cm 皿），37℃、5% CO₂ 饱和湿度培养。注意：请勿直接复苏到 T75 培养瓶或 10 cm 培养皿。

2. 细胞传代：细胞密度达 80–90% 时传代——悬浮细胞离心收集细胞悬液（请勿直接倒掉培养液）：1000–1200 rpm（约 250×g）离心 3–5 分钟，弃上清后按 1:2–1:4 重悬接种新瓶；也可采用半数换液法（弃去半数培养基，剩余细胞悬起分瓶）。传代 8 代左右后如需维持荧光强度，可用嘌呤霉素（4 µg/mL）巩固筛选一次。

3. 细胞冻存：采用 90% FBS + 10% DMSO 冻存液或无血清冻存液重悬细胞，程序降温后液氮长期保存；建议在较低代次冻存备份。

注意事项：该细胞营养需求高，培养液变黄提示营养不足，需及时换液，避免细胞死亡；体外连续传代 4–5 代后活力会下降，可通过腹水培养恢复；悬浮细胞请离心收集，请勿直接倒掉细胞培养液；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

相关产品：H22（小鼠肝癌细胞）、Hepa 1-6-Luc（小鼠肝癌荧光素酶细胞）、H22-Luc-GFP（小鼠肝癌双标记细胞）（按实际库存关联——H22 系列与小鼠肝癌模型组合）