一、基本信息

1. 产品编号：HY-C085

2. 中文名称：小鼠胚胎成纤维细胞

3. 细胞简称：C3H/10T1/2, Clone 8

4. 细胞别称：C3H/10T1/2-clone8; C3H10T1/2CL8; 10T1/2; C3H10T1-2; C3H10T1/2; C3H-10T1/2

5. 细胞形态：成纤维细胞样

6. 生长特性：贴壁细胞

7. 组织来源：C3H系小鼠胚胎

8. 细胞类型：自发永生化细胞

9. 生物安全等级：BSL-1

二、细胞背景

C3H/10T1/2, Clone 8 是由 Reznikoff 等人于 1972 年从 C3H 系小鼠胚胎中分离建立的成纤维细胞系。该细胞具有以下特点：对细胞密度抑制敏感，接触抑制能力强；不产生内源性鼠白血病或肉瘤病毒；在同源小鼠中不形成肿瘤；无自然转化背景，适用于致癌、抗肿瘤及分化研究。

三、培养信息

1. 基础培养基：MEM（含NEAA）

2. 血清添加：10% FBS 

3. 抗生素：1% 青霉素-链霉素（P/S）

4. 培养条件：37℃，5% CO₂，95%空气

5. 传代比例：1:2‑1:4

6. 换液频率：每周2‑3次

7. 消化时间：1‑2分钟

四、关键特性

1. 致瘤性：在免疫抑制小鼠中不形成肿瘤；在半固体培养基中可形成克隆

五、冻存与复苏

1. 冻存液配方：55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO

2. 储存条件：液氮长期保存

3. 传代步骤：吸弃旧培养液；加入 2 mL PBS 轻柔润洗细胞，吸弃PBS；加入 1 mL 0.25% 胰蛋白酶-EDTA，均匀覆盖细胞层；37℃ 消化 1‑2 分钟，显微镜下见细胞变圆、间隙增大即终止；加入 3 mL 含血清培养基终止消化，轻柔吹打成单细胞悬液；离心（1200 rpm，3 分钟），弃上清；重悬于新鲜培养基，按比例接种至新瓶，补足培养基后培养。

六、质量保证

1. 细胞来源：ATCC CCL-226；ECACC 99072801

2. 无菌检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

3. 细胞活性：复苏后存活率 >90%

4. 鉴定报告：提供STR鉴定结果

七、主要应用

1. 致癌物与抗肿瘤药物筛选

2. 细胞分化机制研究

3. 细胞周期与接触抑制研究

4. 基因转染与表达研究

八、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。