一、基本信息

1. 产品编号：HY-C039

2. 细胞名称：MEF（小鼠胚胎成纤维细胞）

3. 英文名称：Mouse Embryonic Fibroblasts

4. 细胞别称：小鼠胚胎成纤维细胞

5. 种属来源：小鼠（Mus musculus）

6. 组织来源：胚胎组织

7. 细胞类型：成纤维细胞

8. 生长特性：贴壁生长

9. 产品规格：T25培养瓶

10. 生物安全等级：BSL-1

11. 储存条件：液氮保存

12. 运输方式：常温运输

二、细胞特征

1. 背景特征：来源于小鼠胚胎组织的原代成纤维细胞，具有典型的成纤维细胞形态，适用于干细胞培养的饲养层制备。

2. 生物学特性：倍增时间：24-48小时；传代次数：有限传代（3-8代）。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM高糖

2. 添加成分：10%胎牛血清（FBS）+ 1%青霉素-链霉素（P/S）

3. 培养环境：37℃，95%空气 + 5% CO₂

4. 传代比例：1:2-1:3

5. 换液频率：每2-3天

6. 消化时间：2-3分钟

7. 冻存条件：无血清冻存液或含10% DMSO的完全培养基

8. 储存条件：液氮

四、主要应用

1. 干细胞研究：胚胎干细胞饲养层制备、诱导多能干细胞培养支持、干细胞维持和扩增

2. 细胞生物学研究：细胞衰老研究、基因功能研究、药物毒性测试

3. 发育生物学研究：胚胎发育机制研究、细胞分化研究

五、质量保证

1. 细胞鉴定：形态学鉴定

2. 支原体检测：阴性

3. 细胞活性：复苏后活性＞90%

4. 无菌检测：细菌、真菌检测阴性

5. 代次保证：5代以内

六、培养操作指南

1. 细胞传代：吸出原培养液，加入2 mL PBS轻轻润洗细胞，加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃培养箱消化2-3分钟，加入3 mL含血清培养基终止消化，收集细胞悬液离心（1000 rpm，5分钟），重悬后按比例接种。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。