一、基本信息

1. 产品编号：HY-C030

2. 细胞名称：BALB/3T3 clone A31（小鼠胚胎成纤维细胞）

3. 英文名称：BALB/3T3 clone A31 Mouse Embryonic Fibroblasts

4. 细胞别称：BALB/c 3T3 clone A31；Balb/c3T3；3T3 clone A31

5. 种属来源：小鼠（Mus musculus）

6. 组织来源：14-17天BALB/c小鼠胚胎

7. 细胞类型：成纤维细胞样

8. 生长特性：贴壁生长

9. 产品规格：T25培养瓶

10. 生物安全等级：BSL-1

11. 保藏机构：ATCC CCL-163；ECACC 86110401

12. 储存条件：液氮保存

13. 运输方式：常温运输

二、细胞特征

1. 背景特征：由S·A·Aaronson和G·T·Todaro于1968年建立，来源于裂解的14-17天BALB/c小鼠胚胎，具有自发永生化特性。

2. 生物学特性：接触抑制：对接触抑制特别敏感；生长特性：需高倍数稀释，饱和浓度低；病毒敏感性：对SV40和小鼠肉瘤病毒高度易感。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM

2. 添加成分：10%胎牛血清（FBS）+ 1%青霉素-链霉素（P/S）

3. 培养环境：37℃，95%空气 + 5% CO₂

4. 传代比例：1:2-1:3

5. 换液频率：每周2-3次

6. 消化时间：1-2分钟

7. 冻存条件：无血清非程序冻存液或通用血清型程序冻存液

8. 储存条件：液氮

四、主要应用

1. 细胞生物学研究：接触抑制机制研究、细胞周期调控分析、细胞转化研究

2. 病毒学研究：DNA病毒SV40易感性研究、小鼠肉瘤病毒作用机制探索

3. 毒理学研究：化学物质毒性测试、环境污染物评价

五、质量保证

1. 细胞鉴定：提供STR鉴定报告

2. 支原体检测：阴性

3. 细胞活性：复苏后活性＞90%

4. 无菌检测：细菌、真菌检测阴性

5. 代次保证：15代以内

六、培养操作指南

1. 细胞传代：吸出原培养液，加入2 mL PBS轻轻润洗细胞，加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃培养箱消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆、出现间隙时终止消化，加入3 mL含血清培养基终止消化，收集细胞悬液离心（1200 rpm，3分钟），重悬后按比例接种。

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。