一、基本信息
1. 产品编号:HY-D013
2. 产品名称:CHO-hTRPV2-OE(仓鼠卵巢细胞 TRPV2 过表达稳转株)
3. 英文名称:CHO-hTRPV2 Overexpression Stable Cell Line
4. 细胞别称:CHO-TRPV2-OE、CHO-hTRPV2 稳转株
5. 种属来源:仓鼠
6. 组织来源:卵巢
7. 疾病背景:正常细胞(表达宿主)
8. 细胞类型:基因过表达稳定细胞系(Pool cells)
9. 宿主细胞:CHO(仓鼠卵巢细胞)
10. 过表达基因:hTRPV2 [NM_016113.5,2295 bp,基因 ID 51393]
11. 构建方式:转座子系统稳定整合
12. 荧光标记:EGFP(同时携带,便于示踪)
13. 抗性标记:嘌呤霉素(Puromycin)抗性
14. 验证方式:qPCR
15. 细胞形态:成纤维细胞样,贴壁生长
16. 生长特性:贴壁生长
17. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
18. 传代代数:10代以内
19. 生物安全等级:BSL-1
20. 质量检测:细菌、真菌、支原体检测均为阴性
二、细胞特征
1. 背景介绍:TRPV2(Transient Receptor Potential Vanilloid 2,瞬时受体电位香草酸亚型 2)是热敏与化学敏非选择性阳离子通道,参与伤害性感受、温度感知、细胞迁移与凋亡调控,在前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌等多种肿瘤中高表达并参与肿瘤侵袭转移——是离子通道药理学与疼痛、肿瘤研究的重要靶点。CHO(仓鼠卵巢)细胞是离子通道异源表达的经典电生理宿主:背景电流低、易于转染、贴壁稳定。
2. 产品特性:本细胞株由转座子系统将人 TRPV2 基因(NM_016113.5)稳定整合入 CHO 细胞,Pool 细胞扩增、qPCR 验证稳定高表达——同时携带 EGFP 荧光标记(便于转染效率评估与示踪)与嘌呤霉素抗性,是 TRPV2 激动剂/拮抗剂筛选、膜片钳电生理研究的即用型工具细胞。
3. 宿主优势:CHO 细胞成纤维样贴壁生长,倍增 24–36 小时,传代 1:4–1:8,培养简便、成本低廉,适合大规模药筛。
三、培养条件
1. 基础培养基:DMEM 高糖
2. 培养基配方:89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
3. 筛选维持:可添加嘌呤霉素维持过表达稳定(常规培养亦可不加,建议定期复筛)
4. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
5. 推荐传代比例:1:4–1:8
6. 推荐换液频率:每 2–3 天一次
7. 消化液类型:0.25% 胰蛋白酶-EDTA
8. 冻存条件:60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液,液氮储存
9. 倍增时间:约24–36小时
四、产品应用
1. TRPV2 通道药理学:激动剂/拮抗剂筛选、钙成像与膜片钳电生理研究
2. 疼痛研究:伤害性感受与热敏通道机制研究
3. 肿瘤研究:TRPV2 介导的肿瘤迁移侵袭机制、TRPV2 靶向干预评价
4. 细胞功能研究:TRPV2 过表达的功能获得性(gain-of-function)研究
5. 药物筛选:TRPV2 相关候选药物的体外高通量筛选
五、产品优势
1. 靶点明确:TRPV2——疼痛与肿瘤迁移研究的重要离子通道靶点
2. 构建先进:转座子系统稳定整合(优于普通随机整合,表达更稳定)
3. 双标记:过表达+EGFP 荧光+嘌呤霉素抗性——验证、示踪、筛选三位一体
4. 宿主经典:CHO 离子通道表达黄金宿主,培养简便、成本低廉
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管,将细胞悬液转入含完全培养基的离心管,200–300×g 离心5分钟去除冻存液,新鲜完全培养基重悬后接种至培养瓶,37℃、5% CO₂ 培养,24小时后换液。注意:运输过程中脱落的漂浮细胞仍为活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。
2. 细胞传代:细胞汇合度达80%–90%时,弃培养上清,PBS润洗1–2次,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA于37℃消化1–2分钟,细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止,按1:4–1:8比例接种新瓶;每 2–3 天换液。
3. 细胞冻存:采用 60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO 冻存液或无血清冻存液重悬细胞,程序降温后液氮长期保存;建议在较低代次冻存备份。
注意事项:本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途;如需维持过表达稳定,可定期用嘌呤霉素进行筛选压力维持。
相关产品:CHO(仓鼠卵巢细胞)、CHO-hTRPV1-OE(如库存)、HEK-293-hTRPV2-OE