一、基本信息
1. 产品编号:HY-C131
2. 产品名称:MFC-Luc(小鼠胃癌荧光素酶标记细胞)
3. 英文名称:MFC-Luc Mouse Gastric Cancer Luciferase Reporter Cell Line
4. 细胞别称:MFC/Luc、MFC-LUC、小鼠前胃癌细胞-Luc
5. 种属来源:小鼠(615 小鼠背景)
6. 年龄性别:—(供体信息不详)
7. 组织来源:前胃(鳞癌移植瘤 FC 瘤组织)
8. 疾病背景:胃癌(前胃鳞癌)
9. 细胞类型:荧光素酶报告基因稳定细胞系
10. 宿主细胞:MFC(Mouse Forestomach Carcinoma)
11. 构建方式:慢病毒法稳定整合 Firefly Luciferase
12. 细胞形态:上皮细胞样,贴壁生长
13. 生长特性:贴壁生长
14. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
15. 传代代数:10代以内
16. 抗性标记:嘌呤霉素(Puromycin)抗性,药筛浓度 1.0 µg/mL,维持浓度 0.5 µg/mL
17. RRID:—(以引种证书为准)
18. 保藏机构:中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心(宿主细胞 MFC)
19. 生物安全等级:BSL-1
20. 质量检测:STR 种属鉴定正确,支原体检测阴性;荧光素酶活性检测验证稳定高表达
二、细胞特征
1. 背景介绍:MFC-Luc 由经典中国小鼠胃癌细胞系 MFC 经慢病毒稳定转染构建——MFC 由钱书森、高进等于 1985 年建立,源自 615 小鼠前胃鳞癌移植瘤 FC 瘤组织(小块法培养,已传 132 代),是国内建立的最经典小鼠胃癌细胞系之一,615 小鼠皮下移植成瘤率 100% 并具有自发血行转移能力。
2. 同系模型价值:615 为国产近交系,MFC-Luc 可在免疫完整的 615 小鼠(或免疫缺陷宿主)中构建同源移植模型并活体成像追踪——是研究胃癌免疫微环境、肿瘤疫苗与免疫检查点抑制剂的特色模型。
3. 发光性能:组成型稳定表达萤火虫荧光素酶,经 Dual-Luciferase 活性检测验证发光强度高、可精确定量;传代 8–10 代后如需维持荧光强度,可用嘌呤霉素巩固筛选一次。
三、培养条件
1. 基础培养基:RPMI-1640
2. 培养基配方:89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
3. 筛选维持:可添加 0.5 µg/mL 嘌呤霉素维持 Luc 表达稳定(常规培养亦可不加)
4. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
5. 推荐传代比例:1:2–1:4
6. 推荐换液频率:2–3 次/周
7. 消化液类型:0.25% 胰蛋白酶-EDTA(消化 1–2 分钟)
8. 冻存条件:55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO 或无血清冻存液,液氮储存
9. 倍增时间:约24.7小时(宿主 MFC,PubMed=3678016)
四、产品应用
1. 胃癌活体成像:615 小鼠同源移植瘤生长与自发转移的实时无创监测
2. 肿瘤免疫研究:免疫完整同系模型中的肿瘤疫苗、免疫检查点抑制剂、CAR-T 疗效评价
3. 抗转移药物筛选:自发血行转移模型中的抗转移候选药物评价
4. 分子机制研究:胃癌发生发展、信号通路与转录调控研究
5. 报告基因检测:荧光素酶活性检测阳性对照、启动子活性分析
五、产品优势
1. 宿主经典:1985 年国内建系,615 小鼠前胃鳞癌模型,同系移植 100% 成瘤
2. 同系成像稀缺:免疫完整胃癌活体成像模型,契合国产 615 品系研究体系
3. 发光稳定:慢病毒稳定整合、双荧光素酶系统验证高表达,带嘌呤霉素抗性
4. 质量可靠:STR 种属鉴定 + 支原体检测 + 发光活性验证三重质控
六、培养方法
1. 细胞复苏:将完全培养液置 37℃ 水浴预热 30 分钟;从液氮取出冻存管暂放 -80℃ 让残余液氮挥发;复苏时迅速用镊子夹住盖子放入 37℃ 水浴快速晃动(水不能没过盖子,约 1 分钟完全融化);75% 酒精消毒管壁后,将细胞悬液转入含 6–7 mL 完全培养基的 15 mL 离心管,1100 rpm离心4分钟;弃上清,1 mL 新鲜完全培养基重悬至单细胞悬液,转入装有 4 mL 完全培养基的 T25 培养瓶(或 6 cm 皿),37℃、5% CO₂ 培养。注意:请勿直接复苏到 T75 培养瓶或 10 cm 培养皿。
2. 细胞传代:细胞汇合度达80%–90%时,弃培养上清,PBS润洗1–2次,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA于37℃消化1–2分钟,细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止,反复吹打成尽量单颗细胞悬液,1200 rpm离心3分钟,按1:2–1:4比例接种新瓶,补足培养基,拧松瓶盖或用透气瓶盖培养。
3. 细胞冻存:采用 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO 冻存液或无血清冻存液重悬细胞,程序降温后液氮长期保存;建议在较低代次冻存备份。
注意事项:本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
相关产品:MFC(小鼠胃癌细胞)、MFC-EGFP(小鼠胃癌EGFP标记细胞)、MFC-mCherry-Luc(小鼠胃癌双标记细胞)