一、基本信息

1. 产品编号：HY-A590

2. 产品名称：NCI-H1975-Luc（人肺腺癌荧光素酶标记细胞）

3. 英文名称：NCI-H1975-Luc Human Lung Adenocarcinoma Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称：H1975-Luc、NCI-H1975-LUC、NCI-H1975荧光素酶标记细胞

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：65岁；女性（宿主背景，按 ATCC 公开资料补充，建议核对）

7. 组织来源：肺

8. 疾病背景：肺腺癌（非小细胞肺癌，NSCLC）

9. 细胞类型：荧光素酶报告基因稳定细胞系

10. 宿主细胞：NCI-H1975

11. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

12. 生长特性：贴壁生长

13. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

14. 传代代数：10代以内

15. RRID：—（以引种证书为准）

16. 保藏机构：ATCC; CRL-5908（宿主细胞 NCI-H1975，建议核对）

17. 抗性标记：嘌呤霉素（Puromycin）抗性（维持浓度按种子批报告确认）

18. 生物安全等级：BSL-1

19. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍：NCI-H1975-Luc 由经典人肺腺癌细胞系 NCI-H1975 经慢病毒稳定转染萤火虫荧光素酶构建，带嘌呤霉素抗性。宿主 NCI-H1975 源自一位 65 岁女性肺腺癌患者（未接受过治疗，ATCC CRL-5908），是 NCI 肺癌细胞系 panel 的经典成员。

2. 核心分子特征——EGFR L858R＋T790M 双突变：NCI-H1975 携带 EGFR 外显子 21 L858R 突变（TKI 敏感突变）与外显子 20 T790M 突变（第一代 TKI 获得性耐药突变）——正是第三代 EGFR-TKI（奥希替尼等）针对的耐药背景，是 EGFR 靶向药物临床前研究引用最多的模型细胞系之一。

3. 发光性能：组成型表达荧光素酶，发光信号与活细胞数量正相关——适合活体成像实时追踪皮下/原位肺癌模型的肿瘤负荷、TKI 治疗响应与耐药演进（T790M→C797S 三级耐药等）。

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI-1640

2. 培养基配方：89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 筛选维持：可添加嘌呤霉素维持 Luc 表达稳定（常规培养亦可不加）

4. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

5. 推荐传代比例：1:2–1:4

6. 推荐换液频率：2–3 次/周

7. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA

8. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

9. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. EGFR-TKI 研究：奥希替尼等第三代 TKI 敏感性、获得性耐药机制（C797S 三级突变）与联合用药策略

2. 活体生物发光成像：肺癌原位/皮下模型生长与转移实时无创监测、TKI 疗效动态评价

3. 靶向药物筛选：EGFR 通路抑制剂、ADC 及双特异性抗体体内外评价

4. 肿瘤免疫研究：肺腺癌免疫微环境、免疫检查点抑制剂联合 EGFR-TKI 研究

5. 分子机制研究：EGFR 信号转导、下游通路反馈激活与肿瘤适应机制

五、产品优势

1. 宿主权威：ATCC CRL-5908 保藏，EGFR-TKI 研究引用最广泛的模型之一

2. 分子明确：L858R＋T790M 双突变——三代 TKI 研究高度对口

3. 成像适用：发光定量与 TKI 疗效动态监测无缝衔接

4. 质量可靠：STR 鉴定正确，支原体检测阴性，可溯源

六、培养方法

1. 细胞复苏：将完全培养液置 37℃ 水浴预热 30 分钟；从液氮取出冻存管暂放 -80℃ 让残余液氮挥发；复苏时稍稍甩动去除残留干冰和液氮，迅速用镊子夹住盖子放入 37℃ 水浴快速晃动（水不能没过盖子），约 1 分钟完全融化；超净台内酒精棉球擦拭消毒，将细胞悬液转入含 6–7 mL 预温完全培养基的 15 mL 离心管，1100 rpm室温离心 4 分钟；弃上清，1 mL 新鲜完全培养基重悬至单细胞悬液，转入装有 4 mL 完全培养基的 T25 培养瓶（或 6 cm 皿），37℃、5% CO₂ 饱和湿度培养。注意：请勿直接复苏到 T75 培养瓶或 10 cm 培养皿。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，尽量吸净原培养基，加 2 mL 左右 PBS 轻轻晃动润洗后吸弃；加入 1 mL 左右 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 轻轻晃动浸润所有细胞，放入培养箱消化——镜下见细胞变圆脱落即终止（全程不要拍打培养瓶）；加入 3 mL 含血清培养基终止，反复吹打成单细胞悬液，1200 rpm离心3分钟，重悬后按比例接种新瓶，补足培养基，拧松瓶盖或用透气瓶盖培养。

3. 细胞冻存：无血清冻存液重悬细胞，程序降温后液氮长期保存；建议在较低代次冻存备份。

注意事项：本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途；体内成像实验需配套荧光素酶底物（D-荧光素）。

相关产品：PC-9-Luc（人肺腺癌荧光素酶细胞，EGFR 19del 模型）、HCC827-Luc（人肺腺癌荧光素酶细胞，EGFR 敏感突变模型）、NCI-H1975（人肺腺癌细胞）