一、基本信息

1. 产品编号：HY-A589

2. 产品名称：293T（人胚肾细胞）

3. 英文名称：293T [HEK-293T] Human Embryonic Kidney Cell Line

4. 细胞别称：Hek293T、HEK-293T、HEK 293T、293-T、293 T、Human Embryonic Kidney 293T、293tsA1609neo（含 Neo/G418 抗性基因）

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：胎儿；女性

7. 组织来源：胚胎肾

8. 细胞类型：转化细胞系（293 衍生株）

9. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

10. 生长特性：贴壁生长（贴壁松散，操作时请轻柔）

11. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

12. 传代代数：10代以内

13. RRID：CVCL_0063

14. 保藏机构：ATCC; CRL-3216 / DSMZ; ACC-635

15. 生物安全等级：BSL-1

16. 遗传特征：SV40 大 T 抗原温度敏感基因整合（高转衍生株）；Neo（G418）抗性基因（建系时构建，早期名称 293tsA1609neo）

17. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍：293T 是 293 [HEK-293] 细胞株插入 SV40 T-antigen 温度敏感基因形成的高转衍生株——SV40 大 T 抗原使细胞具有更高的质粒复制能力与转染效率，是病毒包装、瞬时转染与重组蛋白表达领域使用最广泛的宿主细胞，2026 年引用文献达 114 篇（Cancer Cell IF 44.5、Cell ×2、Nature Immunology、Advanced Materials、Nature Biomedical Engineering、Immunity 等顶刊）。

2. 与 HEK293 的区别：293T 含 SV40 大 T 抗原——适合病毒包装和生产、瞬时转染实验、高产重组蛋白与快速表达筛选；HEK293 不含大 T 抗原——更适合稳定细胞系构建与长期表达研究。可根据实验目的选择。

3. 衍生株谱系：293T/17 为 293T 的高滴度逆转录病毒生产衍生株（经 pBND 和 pZAP 载体筛选获得），可用于逆转录病毒高产需求场景。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

4. 推荐传代比例：1:3–1:6

5. 推荐换液频率：2–3 次/周（换液时培养基需预热，避免温度冲击）

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA（293T 贴壁松散，消化时间宜短）

7. 冻存条件：无血清冻存液（建议无血清非程序冻存液），液氮储存

8. 倍增时间：约24–36小时

四、产品应用

1. 病毒包装与生产：慢病毒、逆转录病毒、腺相关病毒（AAV）载体包装金标准宿主

2. 瞬时转染表达：重组蛋白快速表达筛选、抗体/蛋白生产

3. 基因编辑：CRISPR 质粒/病毒载体的构建与验证

4. 信号通路研究：蛋白互作（Co-IP）、报告基因检测（荧光素酶/β-gal）

5. 药物与递送研究：AI 引导 LNP 体内 mRNA 递送（Nature Biomedical Engineering 2026）、仿生病毒模拟囊泡胞质递送（Advanced Materials 2026）

五、产品优势

1. 金标准宿主：转染/病毒包装领域引用最广泛的细胞系，顶刊年引百余篇

2. 双重优势：SV40 大 T 抗原＋Neo 抗性——质粒复制与抗性筛选双重便利

3. 操作友好：增殖快（倍增 24–36h）、传代比例宽（1:3–1:6）、培养成本低廉

4. 质量可靠：STR 鉴定正确，支原体检测阴性，ATCC/DSMZ 双保藏可溯源

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管，1000–1200 rpm离心3–5分钟去除冻存液，完全培养基重悬后接种至培养瓶（首次传代推荐 1:3），37℃、5% CO₂ 培养，24小时后换液（培养基需预热）。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，弃培养上清，预温 PBS 润洗1–2次（动作轻柔——细胞贴壁松散），加入0.25%胰蛋白酶-EDTA于37℃消化1–2分钟（时间宜短），细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止，按1:3–1:6比例接种新瓶；每 2–3 天换液。

3. 收货大块脱落细胞团处理（正常情况）：将培养瓶内培养基转入无菌离心管，1200 rpm离心3分钟收集细胞；PBS 重悬后再次离心去除 PBS；加 1 mL 0.25% 胰酶重悬（勿多次吹打），37℃ 消化 3 分钟；轻轻吹打分散细胞团，加 3–5 mL 含血清培养基终止，1200 rpm离心3分钟；完全培养基重悬后按 1:3 接入新瓶。

4. 细胞冻存：建议收到后扩增 1–2 代先冻存一管，一周后复苏检查活力，确认冻存条件合适后再大量冻存；建议使用无血清非程序冻存液，程序降温后液氮长期保存。

5. 死细胞去除（如需）：低速离心 800 rpm 3 分钟，死细胞与碎片较轻残留于上清，活细胞沉于管底，可去除大部分死细胞。

注意事项：细胞贴壁松散，所有操作请尽量轻柔，避免剧烈吹打与晃动；换液时培养基需预热至 37℃；收货如见大块脱落细胞团属正常现象，按收货 SOP 处理即可；培养瓶不建议重复利用（最多不超过 3 次，贴壁吸附性会下降）；如文献培养条件与本页面不同，建议优先使用厂家推荐培养条件；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

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