一、基本信息

1. 产品编号：HY-A588

2. 产品名称：PA1-Luc2（人卵巢畸胎瘤荧光素酶标记细胞）

3. 英文名称：PA1-Luc2 Human Ovarian Teratoma Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称：PA1-Luc2-Cell-Line、PA1/LUC2

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：64岁；女性（宿主 PA-1 背景，按 ATCC 公开资料补充）

7. 组织来源：卵巢（畸胎瘤）

8. 疾病背景：卵巢畸胎瘤（生殖细胞来源未成熟畸胎瘤/恶性混合中胚层肿瘤）

9. 细胞类型：荧光素酶报告基因稳定细胞系（克隆号 2#，单克隆）

10. 宿主细胞：PA1（ATCC CRL-1572，建议核对）

11. 构建方式：慢病毒载体稳定表达荧光素酶（Luciferase）基因

12. 筛选标记：NA（无抗性标记）——Luc2 表达稳定，无需药物维持筛选

13. 表达稳定性：至少 10 代培养表达稳定（in culture over a minimum of 10 passages）

14. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

15. 生长特性：贴壁生长

16. 细胞规格：≥2×10⁶cells/冻存管

17. 传代代数：10代以内（10 代内发光表达稳定）

18. 保藏机构：ATCC; CRL-1572（宿主细胞 PA1，建议核对）

19. 生物安全等级：BSL-1

20. 质量检测：支原体检测阴性；发光活性验证——发光强度与细胞数量线性相关（Bright-Lite 检测系统表征：0–20,000 个细胞范围 RLU 线性递增，20,000 细胞 RLU ≈3.2×10⁶）

二、细胞特征

1. 背景介绍：PA1-Luc2 由经典人卵巢畸胎瘤细胞系 PA-1（PA1）经慢病毒载体稳定转染荧光素酶（Luciferase）基因构建——经单克隆筛选获得 2# 克隆株。宿主 PA-1 源自 64 岁白人女性卵巢原发性恶性混合中胚层肿瘤（生殖细胞来源畸胎瘤），经 ATCC（CRL-1572）保藏，保留多潜能干细胞特征（多能性标志物表达），是生殖细胞肿瘤与畸胎瘤研究的经典模型。

2. 发光性能（量化验证）：发光强度与细胞数量呈严格线性关系（表征曲线：0–20,000 个细胞范围 RLU 线性递增，20,000 细胞 RLU ≈3.2×10⁶）——定量精确、动态范围宽，适合活体成像定量与高通量药筛；荧光素酶为氧化酶，与荧光蛋白不同，无需外部光源，加荧光素底物后经化学发光即可检测。

3. 稳定性与便捷性：Luc2 表达至少 10 代培养稳定且无抗性标记——无需嘌呤霉素等药物维持，避免药物压力对细胞状态与实验的干扰，传代培养更简便。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

4. 推荐接种密度：1–3×10⁵cells/mL；饱和培养按 1:2–1:3 传代，每 1–2 天传代一次

5. 推荐换液频率：每 1–2 天（细胞倍增快，注意密度控制）

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA

7. 冻存条件：70% DMEM + 20% FBS + 10% DMSO（现用现配），冻存密度 ≥3×10⁶cells/mL，液氮储存

8. 倍增时间：约36小时

四、产品应用

1. 活体生物发光成像：卵巢畸胎瘤/生殖细胞肿瘤原位、皮下模型的生长与转移实时无创监测

2. 药物筛选：抗肿瘤候选药物的高通量活性评价（发光信号定量细胞活力）

3. 转录与信号研究：启动子活性分析、激酶/酶活性检测、细胞 ATP 水平测定

4. 生殖细胞肿瘤研究：畸胎瘤多能性、分化与靶向治疗研究

5. 成瘤模型研究：免疫缺陷小鼠异种移植模型构建与在体药效评价

五、产品优势

1. 宿主经典：PA-1 卵巢畸胎瘤经典模型，ATCC CRL-1572 保藏

2. 定量精准：发光强度与细胞数量严格线性（表征曲线可查）——活体成像定量可靠

3. 稳定免维护：10 代表达稳定＋无抗性标记——无需药物维持，实验干扰小

4. 质量可靠：支原体检测阴性，每管 ≥2×10⁶cells，复苏即用

六、培养方法

1. 细胞复苏：将完全培养基（DMEM + 10% FBS）37℃ 预热；冻存管在 37℃ 水浴中解冻 1–2 分钟；超净台内 70% 乙醇擦拭管壁，将细胞悬液转入含 9.0 mL 完全培养基的无菌离心管；125×g 室温离心 5–7 分钟，弃上清（勿扰动沉淀）；适量完全培养基重悬后转入 T25 培养瓶，37℃、5% CO₂ 培养；饱和培养按 1:2–1:3 每 1–2 天传代，接种 1–3×10⁵cells/mL。

2. 细胞传代：细胞汇合度达 80–90% 时，弃培养上清，PBS 润洗 1–2 次，加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 于 37℃ 消化 1–2 分钟，细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止，125×g 离心 5 分钟，按 1:2–1:3 重悬接种新瓶（接种密度 1–3×10⁵cells/mL）。

3. 细胞冻存：按传代方法收集细胞计数，250×g 离心 5 分钟弃上清；用现配的冻存液（70% DMEM + 20% FBS + 10% DMSO）重悬至 ≥3×10⁶cells/mL，每管 1 mL 分装；程序降温盒 -80℃ 过夜后转入液氮长期保存。

注意事项：收到冻存细胞后请立即转入液氮保存；本产品仅限研究用途（Research Use Only），不得用于诊断或治疗应用；细胞株及其衍生物的再分销需获得供应商书面许可（如贵司引种自凯因诺，请遵守其许可协议并在页面/说明书中注明）；体内成像实验需配套荧光素底物（D-荧光素）。

相关产品：PA-1（人卵巢畸胎瘤细胞）、PA-1-Cas9（如库存）、A2780-Luc（人卵巢癌荧光素酶细胞，HY-A562）