一、基本信息

1. 产品编号：HY-A587

2. 产品名称：MKN74（人胃癌细胞）

3. 英文名称：MKN74 Human Gastric Cancer Cell Line

4. 细胞别称：MKN-74、MKN 74

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：37岁；男性

7. 组织来源：胃（肝转移灶取材）

8. 疾病背景：胃管状腺癌（中分化，肝转移）

9. 细胞类型：肿瘤细胞

10. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

11. 生长特性：贴壁生长

12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

13. 传代代数：10代以内

14. 保藏机构：JCRB; JCRB0255（1989 年 Hojo H. 建系，注册者 Motoyama & Watanabe）

15. 生物安全等级：BSL-1

16. 分化特征：肠型分化，具细胞极性与含核心细丝微绒毛

17. 质量检测：支原体检测阴性（该细胞曾感染支原体，已用 MC-210 消除——JCRB 官方记录，持续监控）；细菌、真菌检测阴性；同工酶分析证实人源（G6PD type B）；13 种病毒实时 PCR 检测阴性；STR 鉴定正确（Amelogenin: X；CSF1PO: 12,13；D2S1338: 19；D3S1358: 16；D5S818: 10,13；D7S820: 10,12；D8S1179: 14,15；D13S317: 8,11；D16S539: 10,11；D18S51: 13,14；D19S433: 13,15；D21S11: 29,30；FGA: 23；Penta D: 9；TH01: 7；Penta E: 11,12；TPOX: 8,9；vWA: 14,17）

二、细胞特征

1. 背景介绍：MKN74 由 Hojo H. 于 1989 年从一位 37 岁日本男性患者的胃中分化管状腺癌肝转移灶中建立（注册者 Motoyama & Watanabe），经日本 JCRB 保藏（JCRB0255），细胞具有无限增殖能力。MKN74 是日本国立癌症中心 MKN 系列胃癌细胞系（MKN-1/7/28/45/74）的成员之一，肠型（intestinal type）胃癌的代表性模型——具细胞极性与含核心细丝微绒毛，软琼脂中可形成锚定非依赖性克隆，裸鼠体内可成瘤。

2. 支原体消除历史：JCRB 官方记录该细胞系曾感染支原体，已用 MC-210 处理消除——当前供应批次支原体检测阴性、细菌真菌阴性。这一历史记录已在保藏机构公开存档，购买方应知悉并定期自查支原体。

3. 研究热度：2025–2026 年持续产出 Advanced Science（IF 14.1）三篇——CRISPR 体内筛选发现 GRIA2 促胃癌腹膜转移（钙依赖 β-catenin 激活）、SOX9/TIMP1 轴 iRGD 纳米平台增强树突状细胞功能与光动力免疫治疗、METTL10 介导 PIAS3 甲基化连接嘌呤代谢；以及 Int J Biol Sci（IF 10）ANXA2P1-hnRNP F-HK2/c-Myc 糖酵解正反馈环等——胃癌腹膜转移、代谢重编程与免疫治疗研究的活跃模型。

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI-1640

2. 培养基配方：89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

4. 推荐接种密度：约 1×10⁵cells/mL（JCRB 方案）

5. 推荐传代比例：1:5–1:10（JCRB 方案）；国内常规 1:2–1:4

6. 推荐换液频率：每周 2–3 次

7. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-0.02% EDTA（JCRB 方案 37℃ 消化 10–15 分钟）

8. 冻存条件：10% DMSO + 20% FBS-RPMI-1640 或无血清冻存液，液氮储存

9. 倍增时间：约25–30小时

四、产品应用

1. 胃癌腹膜转移研究：GRIA2-钙-β-catenin 轴（Advanced Science 2026 体内 CRISPR 筛选模型）、转移级联机制

2. 代谢重编程研究：HK2/c-Myc 糖酵解正反馈（Int J Biol Sci 2026）、METTL10-PIAS3 嘌呤代谢连接（Advanced Science 2025）

3. 免疫治疗研究：外泌体 MATN3 免疫抑制微环境（Immunology 2026）、SOX9/TIMP1-iRGD 纳米光动力免疫治疗（Advanced Science 2025）

4. 放化疗研究：BRD4 靶向凋亡（Front Pharmacol 2026）、CYP1B1 介导放疗抵抗与脂肪酸代谢（Exp Cell Res 2026）

5. 药物筛选与成瘤模型：软琼脂克隆形成与裸鼠成瘤——体内外药效评价

五、产品优势

1. 背景经典：1989 年建系，JCRB0255 保藏，MKN 系列成员，胃癌研究引用广泛

2. 病理代表：中分化管状腺癌（肠型）—— Lauren 分型研究对口

3. 模型活跃：2025–2026 年三篇 Advanced Science（IF 14.1）——腹膜转移/代谢/免疫治疗方向全覆盖

4. 质量可靠：STR 鉴定正确，支原体已消除并持续阴性，13 种病毒检测阴性，JCRB 批次质控数据可查

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管，将细胞悬液转入含完全培养基的离心管，200–300×g 离心5分钟去除冻存液，新鲜完全培养基重悬后接种（约 1×10⁵cells/mL），37℃、5% CO₂ 培养，24小时后观察换液。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，弃培养上清，PBS润洗1–2次，加入0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA于37℃消化（该细胞消化偏慢，可延至 3–5 分钟，镜下见细胞变圆脱落即终止），加入含血清培养基终止，按1:2–1:4（或 JCRB 方案 1:5–1:10）比例接种新瓶；每 2–3 天换液。

3. 细胞冻存：建议细胞扩增 1–2 代后先冻存一管，一周后复苏检查活力，确认冻存条件合适后再大量冻存；采用 10% DMSO + 20% FBS-RPMI-1640 冻存液或无血清冻存液重悬，程序降温后液氮长期保存。

4. 死细胞去除（如需）：低速离心 800 rpm 3 分钟，死细胞与碎片较轻残留于上清，活细胞沉于管底，可去除大部分死细胞。

注意事项：该细胞历史曾感染支原体（JCRB 官方记录，已 MC-210 消除）——请定期自查支原体并保持培养环境洁净；如文献培养条件与本页面不同，建议优先使用厂家推荐培养条件（避免细胞更换培养条件后不适应）；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

相关产品：MKN-45（人胃癌细胞）、MKN-7（人胃癌细胞）、MKN-74/CMV-Luc（荧光素酶标记株，JCRB1473，如库存）