一、基本信息

1. 产品编号：HY-A584

2. 产品名称：Hep 3B2.1-7（人肝癌细胞）

3. 英文名称：Hep 3B2.1-7 Human Hepatocellular Carcinoma Cell Line

4. 细胞别称：Hep 3B2_1-7、Hep 3B2、HEP-3B2、HEP3B2、Hep-3B、Hep 3B、Hep3B、HEP-3B、HEP3B（即经典 Hep 3B）

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：8岁；男性

7. 组织来源：肝（肝细胞癌）

8. 疾病背景：肝细胞癌

9. 细胞类型：肿瘤细胞

10. 细胞形态：上皮细胞样（多角形、紧密细胞连接），贴壁生长

11. 生长特性：贴壁生长

12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

13. 传代代数：10代以内

14. RRID：CVCL_0326

15. 保藏机构：ATCC; HB-8064 / BCRC; 60434 / BCRJ; 0357 / DSMZ; ACC-93 / ECACC; 86062703

16. 生物安全等级：BSL-2（细胞整合完整 HBV 基因组，需在二级生物安全防护下操作）

17. 基因组特征：染色体众数 60；整合完整乙型肝炎病毒（HBV）基因组；TP53 低表达

18. 基因表达：分泌甲胎蛋白（AFP）、乙肝表面抗原（HBsAg）、白蛋白、α2 巨球蛋白、α1 抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α1 抗糜蛋白酶、触珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原补体（C3、C4）、纤维蛋白原、α1 酸性糖蛋白、α2 HS 糖蛋白、β 脂蛋白、视黄醇结合蛋白等——近乎完整的肝分泌蛋白谱

19. 致瘤性：裸鼠体内可成瘤；细胞存活率 ≥90%

20. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍：Hep 3B2.1-7 源自一位 8 岁男性患者的肝细胞癌组织，即经典 Hep 3B 细胞系——是肝癌研究史上引用最多的细胞系之一。细胞染色体众数为 60，裸鼠体内可成瘤；高增殖能力与稳定遗传特性使其广泛应用于肝癌相关实验研究，亦是合适的转染宿主（适合基因功能研究与药物筛选）。

2. HBV 整合背景：细胞整合了完整的乙型肝炎病毒（HBV）基因组——可在培养上清中检出 HBsAg 等病毒抗原，是研究 HBV 感染与肝癌发生关系（病毒整合、HBx 功能）的经典模型；因含完整病毒基因组，本细胞需在 2 级生物安全防护下操作。

3. 肝分化功能保留：细胞分泌白蛋白、转铁蛋白、补体 C3/C4、纤维蛋白原、α1 抗胰蛋白酶等近乎完整的肝分泌蛋白谱——保留肝细胞分化特征，适合肝功能、急性期蛋白与分泌蛋白研究；同时分泌 AFP，是肝癌标志物研究的标准模型。

三、培养条件

1. 基础培养基：MEM（含NEAA）

2. 培养基配方：89% MEM（含NEAA）+ 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

4. 推荐传代比例：1:2–1:3

5. 推荐换液频率：2–3 次/周

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA（消化 2–3 分钟，镜下见细胞变圆脱壁即终止）

7. 冻存条件：55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO 或无血清冻存液，冻存密度 1×10⁶cells/mL，液氮储存

8. 倍增时间：约40–50小时

四、产品应用

1. HBV-肝癌研究：HBV 基因组整合机制、HBx 致癌功能、病毒-宿主互作研究

2. 肝癌机制研究：TP53 低表达背景下的肿瘤增殖、侵袭转移与信号通路研究

3. 肝功能与分泌蛋白研究：白蛋白/转铁蛋白/补体等分泌蛋白调控、急性期反应

4. 转染与基因功能研究：作为转染宿主开展基因过表达/敲除功能研究

5. 药物筛选：索拉非尼耐药与铁死亡、天然产物抗癌活性评价、GPC3 靶向分子影像探针开发

五、产品优势

1. 背景经典：Hep 3B 经典细胞系，五机构保藏（ATCC HB-8064 为首），文献引用极广

2. 病毒背景明确：整合完整 HBV 基因组——HBV-肝癌研究不可替代的模型

3. 功能丰富：全套肝分泌蛋白谱＋AFP 分泌＋TP53 低表达，多重研究价值

4. 质量可靠：STR 鉴定正确，支原体检测阴性，复苏存活率 ≥90%，成瘤性明确

六、培养方法

1. 细胞复苏：从液氮取出冻存管，立即放入 37℃ 水浴轻轻摇动均匀解冻（1–2 分钟内完成，避免细胞长时间暴露高温）；解冻后的细胞悬液迅速转移至含 10% FBS 的预温培养基中轻轻混匀（降低 DMSO 毒性）；1200 rpm离心3分钟去除上清（消除 DMSO）；用新鲜预温培养基重悬并调整细胞浓度；均匀接种至 T25 培养瓶，加入适量培养基确保初期营养充足；接种后 2–4 小时静置培养促进贴壁，随后轻轻晃动培养瓶检查贴壁情况；每 2–3 天换液，去除老化细胞与代谢废物。

2. 细胞传代：细胞汇合度达 80–90% 时，小心吸出旧培养基（避免扰动贴壁细胞）；加入约 2 mL PBS 轻轻摇晃后吸弃（去除残留血清）；加入 1 mL 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 轻轻摇动使其覆盖所有细胞，置培养箱观察——通常 2–3 分钟内细胞开始变圆并逐渐脱壁；加入 3 mL 含 10% FBS 的培养基中和胰酶，轻轻吹打形成单细胞悬液；1200 rpm离心3分钟去除上清；新鲜培养基重悬后按 1:2–1:3 比例接种新瓶，继续培养。

3. 细胞冻存：配制冻存液（55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，确保 DMSO 浓度不超过 5%）；细胞悬液离心去除培养基；冻存液重悬调整至 1×10⁶cells/mL；分装入冻存管，程序降温至 -80℃ 后转入液氮长期保存。

4. 死细胞去除（如需）：低速离心 800 rpm 3 分钟，死细胞与碎片较轻残留于上清，活细胞沉于管底，可去除大部分死细胞。

注意事项：本细胞整合完整 HBV 基因组，生物安全等级为 BSL-2，请在二级生物安全柜内操作并做好个人防护，所有废液及接触过细胞的器皿需灭菌后处理；如文献培养条件与本页面不同，建议优先使用厂家推荐培养条件（避免细胞更换培养条件后不适应）；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

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