一、基本信息

1. 产品编号：HY-A577

2. 产品名称：OVCAR-8-GFP（人卵巢癌 GFP 标记细胞）

3. 英文名称：OVCAR-8-GFP Human Ovarian Cancer GFP-Labeled Cell Line

4. 细胞别称：OVCAR-8/GFP、OVCAR8-GFP、OVCAR-8 绿色荧光标记细胞

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：64岁；女性

7. 组织来源：卵巢

8. 疾病背景：卵巢上皮性癌

9. 细胞类型：GFP 报告基因稳定细胞系

10. 宿主细胞：OVCAR-8

11. 构建方式：慢病毒稳定转染 GFP 基因

12. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

13. 生长特性：贴壁生长

14. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

15. 传代代数：10代以内

16. RRID：—（以引种证书为准）

17. 保藏机构：NCI-DTP（NCI-60 卵巢癌 panel 成员，宿主细胞 OVCAR-8，建议核对）

18. 生物安全等级：BSL-1

19. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍：OVCAR-8-GFP 由经典人卵巢癌细胞系 OVCAR-8（源自 64 岁女性卵巢癌患者肿瘤组织，NCI-60 人肿瘤细胞系标准筛选 panel 的卵巢癌成员，经 NCI-DTP 保藏）经慢病毒稳定转染 GFP 基因构建。宿主 OVCAR-8 是卵巢癌研究中被广泛引用的经典细胞系，其药物筛选数据可与 NCI-60 历史数据库直接对照。

2. 荧光特性：组成型表达绿色荧光蛋白（GFP），无需底物、蓝光激发即可发出绿色荧光，信号稳定、背景低——适合细胞示踪、共培养体系识别、体内外迁移/侵袭实验及流式细胞术分选。

3. 形态与生长：上皮细胞样，贴壁生长，成片/岛状融合，增殖稳定，传代性能好。

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI-1640

2. 培养基配方：89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

4. 推荐传代比例：1:2（首次传代建议）；后续 1:2–1:4

5. 推荐换液频率：2–3 次/周

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA（消化 1–2 分钟，镜下见细胞皱缩变圆即终止）

7. 冻存条件：90% 完全培养基 + 10% DMSO 或无血清冻存液，冻存密度 1×10⁶cells/mL，液氮储存

8. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. 细胞示踪研究：卵巢癌细胞的迁移、侵袭、共培养体系识别与追踪

2. 肿瘤微环境研究：GFP 阳性肿瘤细胞与间质/免疫细胞互作可视化研究

3. 流式细胞术：GFP 通道直接分选与分析，无需额外染色

4. 药物筛选：抗卵巢癌候选药物的体内外活性评价

5. 体内成像：皮下/原位卵巢癌模型的荧光示踪（配合荧光成像系统）

五、产品优势

1. 宿主经典：NCI-60 panel 成员，卵巢癌研究引用广泛，筛选数据可比性强

2. 荧光稳定：慢病毒稳定整合 GFP，长期传代荧光不衰减

3. 免染示踪：无需底物/抗体，蓝光激发即用，示踪操作简便

4. 质量可靠：STR 鉴定正确，支原体检测阴性，复苏活率高

六、培养方法

1. 细胞复苏：配制完全培养基（基础培养基 + 胎牛血清 + 双抗）；取 5 mL 完全培养基于 15 mL 离心管中 37℃ 预热；从液氮（或 -80℃）快速取出冻存细胞，37℃ 水浴摇晃快速化冻（约 1 分钟）；化冻的细胞加入预热培养基中，1000 rpm离心5分钟；吸弃上清，用 2 mL 完全培养基轻轻重悬，加入 T25 培养瓶，37℃、5% CO₂ 饱和湿度培养；24小时后观察贴壁情况，吸弃旧培养基，加入新鲜预热的完全培养基继续培养。注意：运输用培养基不宜再次用来培养细胞，请按说明书新配制完全培养基。

2. 细胞传代：细胞汇合度达 80%–90% 时，吸弃旧培养基，加 1 mL 无菌 PBS 润洗一次（去除残余血清——血清含胰酶抑制因子）；加入 1 mL 0.25% 胰蛋白酶，37℃ 消化 1–2 分钟（不同细胞消化时间不同），镜下观察细胞至皱缩变圆；加入 1 mL 完全培养基终止消化，轻轻拍打使细胞脱落成单个细胞悬液，收集于 15 mL 离心管，1000 rpm离心5分钟；完全培养基重悬，一分为二（可按生长速度调整比例）接种新瓶。

3. 细胞冻存：按传代方法消化收集细胞沉淀，取少量计数；用预冷的 1 mL 冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）或无血清细胞冻存液重悬，加入 1.2 mL 冻存管（密度 1×10⁶cells/mL）；放入程序冻存盒 -80℃ 过夜后转入液氮长期保存。

注意事项：收到活细胞后先用 75% 酒精消毒培养瓶表面，转入培养箱静置 2–3 小时后再处理；运输用培养基不宜再次培养细胞；收到冻存细胞请立即转入液氮或短期（24h）-80℃ 保存后尽快复苏；收货后如发现培养瓶破损、培养基浑浊/漏液、干冰挥发完等情况，请拍照记录并于收货 24 小时内联系；本产品仅供科研使用。

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