一、基本信息

1. 产品编号：HY-A576

2. 产品名称：SKNO-1（人急性髓系白血病细胞）

3. 英文名称：SKNO-1 Human Acute Myeloid Leukemia Cell Line

4. 细胞别称：Skno-1、SKNO1、SK-NO-1

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：22岁；男性

7. 组织来源：骨髓

8. 疾病背景：急性髓系白血病（AML FAB M2，二次复发）

9. 细胞类型：肿瘤细胞

10. 细胞形态：圆形至多形性细胞，悬浮生长（单独或小簇）

11. 生长特性：悬浮生长（GM-CSF 依赖）

12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

13. 传代代数：10代以内

14. RRID：CVCL_2196

15. 保藏机构：DSMZ; ACC-690

16. 生物安全等级：BSL-1

17. 分子特征：t(8;21)(q22;q22) → AML1-RUNX1T1（AML1-ETO）融合基因表达；KIT 外显子 17 激活突变；p53 突变/过表达；CSF2（GM-CSF）依赖；外显子组与 RNA 测序数据公开；CCLE/DepMap、LL-100 血液癌细胞系 panel 收录

18. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染；STR 鉴定正确（Amelogenin: X；CSF1PO: 12,13；D2S1338: 19；D3S1358: 16；D5S818: 10,13；D7S820: 10,12；D8S1179: 14,15；D13S317: 8,11；D16S539: 10,11；D18S51: 13,14；D19S433: 13,15；D21S11: 29,30；FGA: 23；Penta D: 9；TH01: 7；Penta E: 11,12；TPOX: 8,9；vWA: 14,17）

二、细胞特征

1. 背景介绍：SKNO-1 于 1990 年从一位 22 岁男性急性髓系白血病（AML，FAB M2 型）二次复发患者的骨髓中建立，经德国 DSMZ 保藏（ACC-690），被癌症依赖图谱计划（DepMap/CCLE）与 LL-100 血液癌细胞系 panel 收录，外显子组与 RNA 测序数据已公开。

2. 分子特征（核心卖点）：携带 t(8;21)(q22;q22) 易位形成 AML1-RUNX1T1（AML1-ETO）融合基因——AML 中最常见的融合基因之一；KIT 外显子 17 激活突变——Leukemia（2008）报道其为"二次打击"假说的模型细胞系；p53 突变/过表达——三重分子事件背景清晰，研究维度丰富。

3. GM-CSF 依赖性（重要培养特点）：细胞增殖依赖粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）——常规培养需添加 10 ng/mL GM-CSF；亦可用 5637 细胞条件培养基（5–10%）替代；细胞因子不足或细胞密度不足会筛选出因子非依赖亚克隆，影响因子依赖性的长期稳定性（DSMZ 官方警告）。

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI-1640

2. 培养基配方：89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 10 ng/mL GM-CSF + 1% 青霉素-链霉素双抗（替代方案：5637 细胞条件培养基 5–10% 替代 GM-CSF）

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃；湿度 70%–80%

4. 推荐接种密度：起始 0.5×10⁶cells/mL；维持密度 0.2–2.0×10⁶cells/mL；最大密度约 2.5×10⁶cells/mL

5. 推荐传代比例：1:2–1:3，每 2–3 天传代

6. 推荐换液频率：2–3 次/周

7. 细胞收集方式：悬浮细胞离心收集（请勿直接倒掉培养液）

8. 冻存条件：90% FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液，液氮储存

9. 倍增时间：约35–50小时

四、产品应用

1. t(8;21) AML 研究：AML1-ETO 融合基因功能、靶向降解与表观遗传调控研究

2. KIT 靶向研究：KIT 外显子 17 突变（"二次打击"模型）与 KIT 抑制剂评价

3. 细胞免疫治疗：AML CAR-NK/CAR-T 靶点发现与疗效评价（Advanced Science 2025 模型）

4. 白血病机制：AML M2 亚型增殖分化、信号通路研究

5. 药物筛选：抗白血病候选药物的体外活性评价

五、产品优势

1. 背景经典：1990 年建系，DSMZ ACC-690 保藏，CCLE/DepMap/LL-100 收录，组学数据公开

2. 分子明确：AML1-ETO 融合＋KIT exon 17 突变＋p53 突变三重分子事件

3. 模型活跃：Advanced Science（IF 14.1）2025 年 AML CAR 细胞治疗研究模型

4. 质量可靠：20 位点 STR 鉴定正确，支原体检测阴性，来源可溯源

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管，将细胞悬液转入含完全培养基（含 10 ng/mL GM-CSF）的离心管，200–300×g 离心5分钟去除冻存液，新鲜完全培养基重悬后接种（起始密度 0.5×10⁶cells/mL），37℃、5% CO₂ 培养，24小时后观察换液。

2. 细胞传代：悬浮细胞离心收集细胞悬液（请勿直接倒掉培养液）：1000–1200 rpm（约 250×g）离心 3–5 分钟，弃上清后按 1:2–1:3 重悬接种新瓶；维持细胞密度 0.2–2.0×10⁶cells/mL，每 2–3 天传代一次；亦可采用半数换液法。

3. GM-CSF 维持与替代：常规添加 10 ng/mL GM-CSF；如使用 5637 细胞条件培养基替代（5–10%），需确认批次一致性。

4. 细胞冻存：采用 90% FBS + 10% DMSO 冻存液或无血清冻存液重悬细胞，程序降温后液氮长期保存；建议在较低代次冻存备份。

5. 死细胞去除（如需）：低速离心 800 rpm 3 分钟，死细胞与碎片较轻残留于上清，活细胞沉于管底，可去除大部分死细胞。

注意事项：本细胞为 GM-CSF 依赖性细胞系——细胞因子不足或细胞密度不足会筛选出因子非依赖亚克隆，请保证足量 GM-CSF 与适宜接种密度（DSMZ 官方提示）；悬浮细胞请离心收集，请勿直接倒掉细胞培养液；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

相关产品：Kasumi-1（人急性髓系白血病细胞，t(8;21) 姐妹株）、MOLM-13（人急性髓系白血病细胞）、MV-4-11（人急性单核细胞白血病细胞）