一、基本信息

1. 产品编号：HY-A571

2. 产品名称：NCI-H520（人肺鳞癌细胞）

3. 英文名称：NCI-H520 Human Lung Squamous Cell Carcinoma Cell Line

4. 细胞别称：H520、H-520、NCI-HUT-520、NCIH520

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：—（男性，年龄不详）

7. 组织来源：肺

8. 疾病背景：肺鳞状细胞癌

9. 细胞类型：肿瘤细胞

10. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

11. 生长特性：贴壁生长

12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

13. 传代代数：10代以内

14. RRID：CVCL_1566

15. 保藏机构：ATCC; HTB-182

16. 生物安全等级：BSL-1

17. 分子特征：p53 mRNA 表达水平较正常肺组织低（无大的结构 DNA 异常）；角蛋白、波形蛋白阳性，神经丝三联蛋白阴性；软琼脂中可形成克隆

18. 致瘤性：裸鼠皮下接种 1×10⁷ 细胞，21 天内 100%（5/5）成瘤

19. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍：NCI-H520 由 Gazdar AF 等于 1982 年从男性肺鳞状细胞癌组织建立，经 ATCC（HTB-182）保藏，是 NCI 肺癌细胞系 panel 的经典成员，在肺鳞癌病因学、分子机制与药物筛选研究中被广泛引用。

2. 分子与成瘤特性：p53 mRNA 表达水平较正常肺组织低（无大的结构 DNA 异常）；角蛋白、波形蛋白阳性，神经丝三联蛋白阴性；软琼脂中可形成克隆；裸鼠皮下接种 1×10⁷ 细胞 21 天内 100%（5/5）成瘤——体内外模型兼备，成瘤数据明确。

3. 研究热度：2026 年持续产出高分文献——活细胞高通量配体发现（Acta Pharm Sin B, IF 14.6）、NIR-II 双靶向术中导航（Cancer Letters, IF 10.1）、GABBR1 调控 CD8+ T 细胞抗肿瘤免疫（Int J Biol Sci, IF 10）、铁死亡（肺鳞癌巨噬细胞/仙茅苷研究）等——肺鳞癌机制与转化研究的活跃模型。

三、培养条件

1. 基础培养基：RPMI-1640

2. 培养基配方：89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

4. 推荐传代比例：1:3–1:4

5. 推荐换液频率：2–3 次/周

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA（注意严格控制消化时间，不同品牌胰酶消化时间差别较大）

7. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

8. 倍增时间：约32–60小时

四、产品应用

1. 肺鳞癌机制研究：NSCLC 鳞癌亚型发生发展、侵袭转移及分子机制研究

2. 活体成像与术中导航：NIR-II 成像探针、双靶向肿瘤定位研究（Cancer Letters 2026 模型）

3. 免疫微环境研究：GABBR1-ATF4-NRF2-CXCL13 轴、CD8+ T 细胞抗肿瘤免疫机制

4. 铁死亡研究：肺鳞癌铁死亡机制、诱导剂筛选（Curculigoside/巨噬细胞铁死亡模型）

5. 药物筛选：化疗及靶向药物的体内外活性评价

五、产品优势

1. 背景经典：1982 年建系，ATCC HTB-182 保藏，NCI 肺癌 panel 成员，文献引用广泛

2. 成瘤性强：裸鼠 21 天 100% 成瘤，成瘤数据明确

3. 模型活跃：2026 年持续产出 Acta Pharm Sin B、Cancer Letters、Int J Biol Sci 等高分文献

4. 质量可靠：STR 鉴定正确，支原体检测阴性，可溯源

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管，将细胞悬液转入含完全培养基的离心管，900 rpm离心3–5分钟去除冻存液，新鲜完全培养基重悬后接种至培养瓶，24小时后换液。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，尽量吸净原培养基，加 3–4 mL 常温 PBS 轻轻晃动润洗细胞 10–20 秒并吸弃；加入 1 mL 左右 0.25% 胰蛋白酶轻轻晃动浸润所有细胞，放入培养箱消化——显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆、有间隙时即可终止（全程不要拍打培养瓶）；加入 2–3 mL 完全培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并反复吹打成尽量单颗细胞悬液；收集细胞悬液 900 rpm离心3–5分钟，弃上清，加新鲜完全培养基轻柔重悬（避免产生过多气泡影响细胞状态），均匀分至新培养瓶，补足完全培养基继续培养。

3. 细胞冻存：建议细胞扩增 1–2 代后先冻存一管，一周后复苏检查活率，确认冻存条件合适后再大量冻存；无血清冻存液重悬，程序降温后液氮长期保存。

4. 死细胞去除（如需）：低速离心 800 rpm 3 分钟，死细胞与碎片较轻残留于上清，活细胞沉于管底，可去除大部分死细胞。

注意事项：细胞传代时建议离心处理，可避免细胞堆积生长；不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间；吹打细胞时尽量轻柔，避免产生过多气泡影响细胞状态；本产品仅供科学研究使用。

相关产品：NCI-H520-Luc（人肺鳞癌荧光素酶标记细胞，HY-A553）、NCI-H226（人肺鳞癌细胞）、SK-MES-1（人肺鳞癌细胞）