一、基本信息
1. 产品编号:HY-A570
2. 产品名称:Onda 9(人胶质瘤细胞)
3. 英文名称:Onda 9 Human Glioma Cell Line
4. 细胞别称:Onda9
5. 种属来源:人
6. 年龄性别:58岁;男性
7. 组织来源:脑(间变性胶质瘤)
8. 疾病背景:间变性胶质瘤(anaplastic glioma)
9. 细胞类型:肿瘤细胞
10. 细胞形态:成纤维细胞样,贴壁生长
11. 生长特性:贴壁生长
12. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
13. 传代代数:10代以内
14. RRID:CVCL_1R14
15. 保藏机构:JCRB; JCRB1576(日本 NITE 生物资源中心细胞库)
16. 生物安全等级:BSL-1
17. 分子特征:P14/P15/P16 缺失、PTEN 突变(细胞周期调控缺陷+PI3K/AKT 通路异常)
18. 质量检测:支原体、细菌、真菌检测阴性;STR 鉴定正确(D5S818: 9,12;D13S317: 11;D7S820: 12;D16S539: 11,13;vWA: 14,18;TH01: 9;AM: X,Y;TPOX: 8,9;CSF1PO: 10,12)
二、细胞特征
1. 背景介绍:Onda 9 于 2013 年由 Onda K. 建立并注册(注册者 Kumanishi T.),源自一位 58 岁日本男性间变性胶质瘤患者的脑组织,经日本 NITE 生物资源中心细胞库(JCRB,JCRB1576)保藏,被 Cellosaurus 数据库收录(CVCL_1R14)。细胞具有无限增殖能力,在胶质瘤研究中被引用。
2. 分子特征(核心卖点):P14/P15/P16 基因座缺失、PTEN 突变——细胞周期检查点(p14ARF-p53 / p16INK4a-Rb 双通路)缺陷叠加 PTEN 缺失导致的 PI3K/AKT/mTOR 通路组成型激活,是研究胶质瘤信号通路异常、PI3K 通路靶向治疗及合成致死策略的特色模型。
3. 形态与生长:成纤维细胞样,长梭形,贴壁生长;倍增时间约 58 小时,JCRB 批次质控解冻后活率 88%。
三、培养条件
1. 基础培养基:DMEM 高糖
2. 培养基配方:89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
3. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
4. 推荐传代比例:1:3–1:5,每周传代
5. 推荐接种密度:0.9–1.2×10⁵cells/mL
6. 推荐换液频率:2–3 次/周
7. 消化液类型:0.02% 胰蛋白酶-0.01% EDTA(低浓度胰酶,消化时间适当延长)
8. 冻存条件:10% DMSO + 20% FBS-DMEM 或无血清冻存液,液氮储存
9. 倍增时间:约58小时
四、产品应用
1. PI3K/AKT 通路研究:PTEN 缺失背景下的通路激活机制、PI3K/mTOR 抑制剂评价
2. 细胞周期研究:P14/P15/P16 缺失与胶质瘤去分化、检查点缺陷机制研究
3. 胶质瘤分子分型:日本人群胶质瘤的分子特征与比较研究
4. 放化疗研究:替莫唑胺等药物敏感性及获得性耐药机制研究
5. 药物筛选:抗胶质瘤候选药物的体内外活性评价
五、产品优势
1. 来源权威:JCRB/NITE 保藏(JCRB1576),Cellosaurus 收录,建系注册信息完整
2. 分子明确:P14/P15/P16 缺失+PTEN 突变双特征——信号通路研究高度对口
3. 形态独特:成纤维样胶质瘤细胞——区别于上皮样胶质瘤模型(如 KNS-60),丰富实验选择
4. 质量可靠:STR 鉴定正确,支原体/细菌/真菌检测阴性,JCRB 批次活率数据可查
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管,将细胞悬液转入含完全培养基的离心管,200–300×g 离心5分钟去除冻存液,新鲜完全培养基重悬后接种(接种密度 0.9–1.2×10⁵cells/mL),37℃、5% CO₂ 培养,24小时后观察换液。
2. 细胞传代:细胞汇合度达80%–90%时,弃培养上清,PBS润洗1–2次,加入0.02%胰蛋白酶-0.01% EDTA(低浓度胰酶,消化时间适当延长)于37℃消化,细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止,按1:3–1:5比例接种新瓶;每 2–3 天换液。
3. 细胞冻存:采用 10% DMSO + 20% FBS-DMEM 冻存液或无血清冻存液重悬细胞,程序降温后液氮长期保存;建议在较低代次冻存备份。
注意事项:本细胞 JCRB 采用低浓度胰酶(0.02%)传代,消化时间较常规细胞略长,注意镜下观察避免过度消化;本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
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