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产品中心
一、基本信息
1. 产品编号：HY-A568
2. 产品名称：KNS-60（人胶质瘤细胞）
3. 英文名称：KNS-60 Human Glioma Cell Line
4. 细胞别称：KNS60
5. 种属来源：人
6. 年龄性别：55岁；男性
7. 组织来源：脑（神经组织，胶质瘤）
8. 疾病背景：胶质瘤
9. 细胞类型：肿瘤细胞
10. 细胞形态：多角形-上皮细胞样，贴壁生长
11. 生长特性：贴壁生长
12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
13. 传代代数：10代以内
14. RRID：CVCL_2798
15. 保藏机构：JCRB; IFO50357（日本 NITE 生物资源中心细胞库）
16. 生物安全等级：BSL-1
17. 免疫表型：GFAP、S-100、NSE 阴性（胶质瘤标志物阴性，独特表型）
18. 质量检测：支原体、细菌、真菌检测阴性；同工酶分析证实人源（G6PD type B）；16 种病毒实时 PCR 检测阴性；STR 鉴定正确（D5S818: 11；D13S317: 8；D7S820: 9,12；D16S539: 10,11；vWA: 15,19；TH01: 7,8；AM: X；TPOX: 9；CSF1PO: 12）
二、细胞特征
1. 背景介绍：KNS-60 于 1991 年由 Takaki T. 从一位 55 岁男性脑胶质瘤患者的肿瘤组织中建立（注册者 Takeshita I.），经日本 NITE 生物资源中心细胞库（JCRB，IFO50357）保藏，被 Cellosaurus 数据库收录（CVCL_2798）。该细胞为日本 KNS 人脑胶质瘤细胞系系列的成员之一，具有无限增殖能力，在胶质瘤研究中被引用。
2. 独特免疫表型：GFAP（胶质纤维酸性蛋白）、S-100 蛋白与 NSE（神经元特异性烯醇化酶）均为阴性——区别于多数 GFAP 阳性的胶质瘤细胞系，这一独特表型使其成为研究胶质瘤异质性、去分化表型与分子分型的特色模型。
3. 质量与生长特性：贴壁生长，多角形-上皮样形态；倍增时间约 36–51 小时；低血清（5% FBS）即可良好增殖；JCRB 批次质控显示复苏活率 >99%、支原体/细菌/真菌阴性、同工酶证实人源身份。
三、培养条件
1. 基础培养基：DMEM 高糖
2. 培养基配方：94% DMEM 高糖 + 5% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗（KNS-60 低血清即可良好生长）
3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃
4. 推荐接种密度：3–6×10⁴cells/mL
5. 推荐传代比例：1:2–1:4
6. 推荐换液频率：2–3 次/周
7. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-0.02% EDTA
8. 冻存条件：10% DMSO + 20% FBS-DMEM 或无血清冻存液，液氮储存
9. 倍增时间：约36–51小时
四、产品应用
1. 胶质瘤机制研究：胶质瘤发生发展、侵袭迁移与信号通路研究
2. 肿瘤异质性研究：GFAP/S-100/NSE 阴性表型的分子机制与胶质瘤分型研究
3. 放化疗研究：放射治疗、化疗药物（替莫唑胺等）敏感性及耐药机制研究
4. 药物筛选：抗胶质瘤候选药物的体内外活性评价
5. 成瘤模型研究：裸鼠异种移植模型构建与在体药效评价
五、产品优势
1. 来源权威：JCRB/NITE 保藏（IFO50357），Cellosaurus 收录，建系信息完整
2. 表型独特：GFAP/S-100/NSE 三阴性——胶质瘤异质性研究的稀缺模型
3. 低血清培养：5% FBS 即可良好增殖，培养成本低
4. 质量可靠：STR 鉴定正确，16 种病毒检测阴性，同工酶证实人源，复苏活率 >99%
六、培养方法
1. 细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管，将细胞悬液转入含完全培养基的离心管，200–300×g 离心5分钟去除冻存液，新鲜完全培养基重悬后接种（接种密度 3–6×10⁴cells/mL），37℃、5% CO₂ 培养，24小时后观察换液。
2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，弃培养上清，PBS润洗1–2次，加入0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA于37℃消化1–2分钟，细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止，按1:2–1:4比例接种新瓶；每 2–3 天换液。
3. 细胞冻存：采用 10% DMSO + 20% FBS-DMEM 冻存液或无血清冻存液重悬细胞（冻存密度约 1–2×10⁶cells/mL），程序降温后液氮长期保存；建议在较低代次冻存备份。
注意事项：本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
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