一、基本信息

1. 产品编号：HY-A565

2. 产品名称：HEK-293-hTACSTD2-OE（人胚肾细胞 TACSTD2 过表达稳转株）

3. 英文名称：HEK-293-hTACSTD2 Overexpression Stable Cell Line

4. 细胞别称：HEK-293-TROP2-OE、293-TROP2、HEK-293 TACSTD2 稳转株

5. 种属来源：人

6. 组织来源：胚肾

7. 疾病背景：正常细胞（转化细胞）

8. 细胞类型：基因过表达稳定细胞系（单克隆）

9. 宿主细胞：HEK-293

10. 过表达基因：TACSTD2（TROP2）[NM_002353.3，972 bp，基因 ID 4070]

11. 构建方式：慢病毒法转染，单克隆筛选

12. 抗性标记：嘌呤霉素（Puromycin）抗性

13. 验证方式：qPCR

14. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

15. 生长特性：贴壁生长

16. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

17. 传代代数：10代以内

18. 生物安全等级：BSL-1

19. 质量检测：细菌、真菌、支原体检测均为阴性

二、细胞特征

1. 背景介绍：TACSTD2（TROP2，Trophoblast cell-surface antigen 2，滋养层细胞表面抗原 2）是上皮钙黏蛋白家族成员，在乳腺癌、膀胱癌、肺癌、胰腺癌、宫颈癌等多种上皮恶性肿瘤中高表达，与肿瘤侵袭、转移和不良预后密切相关。近年来 TROP2 已成为最热门的抗体药物偶联物（ADC）靶点之一——靶向 TROP2 的 ADC（如戈沙妥珠单抗、德达博妥单抗）已在三阴性乳腺癌、尿路上皮癌、非小细胞肺癌等多个瘤种获批或进入临床。

2. 产品特性：本细胞株由慢病毒法将人 TACSTD2 基因（NM_002353.3）转染 HEK-293 细胞并经单克隆筛选获得，qPCR 验证稳定高表达 TACSTD2，带嘌呤霉素抗性标记——是 TROP2 靶向药物（ADC、双特异性抗体、CAR-T）体外结合活性与功能验证、流式细胞术检测的标准阳性对照工具细胞。

3. 宿主优势：HEK-293 为人胚肾来源经典表达宿主——高转染效率、易于培养、贴壁稳定，适合长期传代与大规模扩增。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 筛选维持：可添加嘌呤霉素维持过表达稳定（常规培养亦可不加，建议定期复筛）

4. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

5. 推荐传代比例：1:4–1:8

6. 推荐换液频率：每 2–3 天一次

7. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA

8. 冻存条件：60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液，液氮储存

9. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. TROP2 靶向药物评价：ADC（戈沙妥珠单抗等）、双特异性抗体的结合活性与杀伤功能验证

2. CAR-T 细胞研究：TROP2-CAR-T 的体外杀伤与体内药效评价靶细胞

3. 流式检测对照：TROP2 抗体流式细胞术检测的标准阳性对照

4. 基因功能研究：TACSTD2 过表达的功能获得性（gain-of-function）研究

5. 蛋白表达：TROP2 蛋白表达与纯化的细胞来源

五、产品优势

1. 靶点热门：TROP2 是当前 ADC 领域最热门靶点，药物开发需求旺盛

2. 单克隆株：单克隆筛选、遗传背景均一、表达稳定——实验重复性好

3. 验证齐全：qPCR 验证过表达＋嘌呤霉素抗性＋微生物三项检测阴性

4. 宿主可靠：HEK-293 经典表达宿主，贴壁稳定、易于培养与扩增

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管，将细胞悬液转入含完全培养基的离心管，200–300×g 离心5分钟去除冻存液，新鲜完全培养基重悬后接种至培养瓶，37℃、5% CO₂ 培养，24小时后换液。注意：运输过程中脱落的漂浮细胞仍为活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，弃培养上清，PBS润洗1–2次，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA于37℃消化1–2分钟，细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止，按1:4–1:8比例接种新瓶；每 2–3 天换液。

3. 细胞冻存：采用 60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO 冻存液或无血清冻存液重悬细胞，程序降温后液氮长期保存；建议在较低代次冻存备份。

注意事项：本产品仅用于科研实验，不可用于临床治疗；如需维持过表达稳定，可定期用嘌呤霉素进行筛选压力维持。

相关产品：HEK-293（人胚肾细胞）、HEK-293-hHER2-OE（如库存）、HEK-293-hCD19-OE（如库存）