Product Center
产品中心
一、基本信息
1. 产品编号：HY-A550
2. 产品名称：HEK293S GnTI-（人胚肾细胞）
3. 英文名称：HEK293S GnTI- Human Embryonic Kidney Cell Line
4. 细胞别称：293SGnTI(-)、HEK293SG、293SG
5. 种属来源：人
6. 年龄性别：女性；胎儿来源
7. 组织来源：胚胎肾
8. 细胞类型：转化细胞系（腺病毒 5 DNA 转化）
9. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长（可悬浮驯化）
10. 生长特性：贴壁生长
11. 分子特征：缺乏 N-乙酰氨基葡糖基转移酶 I（GnTI）活性——糖蛋白 N-糖链均一化为 Man5GlcNAc2 型，不产生复杂 N-聚糖
12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
13. 传代代数：10代以内
14. RRID：CVCL_A785
15. 保藏机构：ATCC; CRL-3022
16. 生物安全等级：BSL-2（ATCC 官方分级；细胞含腺病毒 DNA 序列）
17. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确
18. 建系文献：Reeves P, et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99(21):13419-13424, 2002
二、细胞特征
1. 背景介绍：HEK293S GnTI- 由 Reeves 等经甲磺酸乙酯（EMS）诱变 + 蓖麻毒素筛选建立（PNAS 2002），源自 HEK293S 细胞（人胚肾、腺病毒 5 转化背景），经 ATCC 保藏（CRL-3022）。该细胞是结构生物学（X 射线晶体学/冷冻电镜）中过表达哺乳动物膜蛋白的金标准宿主细胞，已被 500 余篇文献引用。
2. 均一糖基化特性：因 GnTI 活性缺失，表达的糖蛋白 N-糖链停留在 Man5GlcNAc2 均一状态——显著提高膜蛋白结晶成功率与冷冻电镜结构解析质量；配合 BacMam 杆状病毒转导系统或 PEI 转染，可高效表达 GPCR、离子通道、转运体等各类困难膜蛋白。
3. 培养特性：上皮样贴壁生长；经驯化后可高密度悬浮培养（至 3×10⁶cells/mL）用于大规模蛋白表达。
三、培养条件
1. 基础培养基：DMEM 高糖
2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃
4. 推荐传代比例：1:3–1:4
5. 推荐换液频率：2–3 次/周
6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA
7. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
8. 倍增时间：约24–36小时
四、产品应用
1. 膜蛋白表达：GPCR、离子通道、转运体等哺乳动物膜蛋白的过表达（结构生物学/冷冻电镜金标准宿主）
2. 均一糖基化蛋白生产：治疗性蛋白、抗体的均一糖型制备与糖基化研究
3. 结构药理学：蛋白-配体/抗体复合物结构解析（2026 年 SV2A、TRPM4、nAChR 等 Nature 子刊模型）
4. 3D 培养：ATCC 推荐用于 3D 细胞培养
5. 病毒糖蛋白研究：病毒包膜糖蛋白的表达与功能研究
五、产品优势
1. 金标准表达宿主：ATCC CRL-3022 同源，500+ 文献引用，膜蛋白结构生物学领域公认
2. 糖型均一：GnTI 缺陷使 N-糖链停留于 Man5GlcNAc2——结晶与冷冻电镜数据质量显著提升
3. 表达体系成熟：贴壁/悬浮双模式，兼容 BacMam、PEI 等多种转导/转染体系
4. 质量可靠：STR 鉴定正确，支原体检测阴性，来源可溯源
六、培养方法
1. 细胞复苏：37℃水浴快速晃动融化冻存管（冻存帽勿浸入水面），70% 乙醇消毒管壁后，将冻存液转入含完全培养基的离心管，1000 rpm离心5分钟去除冻存液，完全培养基重悬后接种至培养瓶，24小时后换液。注意：本细胞含腺病毒 5 DNA 序列，按 BSL-2 规范操作并做好个人防护。
2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，弃培养上清，PBS润洗1–2次，加入0.25%胰蛋白酶-EDTA于37℃消化1–2分钟，细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止，按1:3–1:4比例接种新瓶。
3. 细胞冻存：无血清冻存液重悬细胞，程序降温后液氮（气相）长期保存；建议在较低代次冻存备份。
4. 悬浮驯化（如需大规模表达）：逐步降低血清并更换为无血清表达培养基，摇床震荡驯化至稳定悬浮生长，密度可达 3×10⁶cells/mL。
注意事项：本细胞含腺病毒 5 DNA 序列，生物安全等级为 BSL-2（ATCC 官方分级），请在二级生物安全柜内操作并做好个人防护；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
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