一、基本信息

1. 产品编号：HY-A540

2. 产品名称：CAL-148（人乳腺癌细胞）

3. 英文名称：CAL-148 Human Breast Cancer Cell Line

4. 细胞别称：CAL 148、CAL148、Centre Antoine Lacassagne-148

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：58岁；女性

7. 组织来源：胸腔积液

8. 疾病背景：浸润性导管乳腺癌（中分化，晚期，化疗后）

9. 细胞类型：肿瘤细胞

10. 细胞形态：圆形和椭圆形细胞，单个或小块悬浮生长

11. 生长特性：聚团悬浮，疏松贴壁（半贴壁半悬浮）

12. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

13. 传代代数：10代以内

14. RRID：CVCL_1106

15. 保藏机构：—（Centre Antoine Lacassagne 建系，见引种证书）

16. 生物安全等级：BSL-1

17. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍：CAL-148 源自一位 58 岁女性晚期浸润性导管乳腺癌（中分化导管腺癌）患者——该患者经多轮化疗后，从其胸腔积液中分离建系，由法国尼斯 Centre Antoine Lacassagne 癌症中心建立并命名，是难治性/复发性乳腺癌研究的重要模型，在乳腺癌耐药机制与治疗策略研究中被引用。

2. 生长特性：聚团悬浮、疏松贴壁的半贴壁半悬浮生长模式——培养液中可见单个或小块悬浮细胞，同时部分细胞疏松贴壁；细胞倍增速度受培养基影响较大。

3. 特殊培养需求：培养需补充 EGF（表皮生长因子 10 ng/mL）与 L-谷氨酰胺，以维持最佳生长状态。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：87% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 2 mM L-谷氨酰胺 + 10 ng/mL EGF + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

4. 推荐传代比例：1:2–1:3（不宜过大，细胞倍增速度受培养基影响较大）

5. 推荐换液频率：2–3 次/周（换液时培养基沿壁缓缓吸出/加入，避免吹起贴壁细胞）

6. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-EDTA（悬浮细胞也需消化成小团后与贴壁细胞一起收集）

7. 冻存条件：90% FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液，液氮储存

8. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. 难治性乳腺癌研究：化疗后复发乳腺癌的耐药机制、肿瘤生物学研究

2. 肿瘤干细胞研究：胸腔积液来源、聚团生长的乳腺癌干性特征研究

3. 药物筛选：抗乳腺癌候选药物（尤其针对化疗耐药背景）的体内外活性评价

4. 肿瘤微环境研究：转移性乳腺癌细胞与胸膜微环境互作研究

5. 成瘤模型研究：免疫缺陷小鼠异种移植模型构建与在体药效评价

五、产品优势

1. 背景独特：晚期化疗后胸腔积液来源，难治性乳腺癌研究高度对口

2. 建系机构明确：法国 Lacassagne 癌症中心建系，RRID CVCL_1106 可溯源

3. 生长模式特色：半贴壁半悬浮聚团生长，兼具悬浮与贴壁实验灵活性

4. 质量可靠：STR 鉴定正确，支原体检测阴性，复苏活率高

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管，1000 rpm离心5分钟去除冻存液，完全培养基（含 EGF 与 L-谷氨酰胺）重悬后接种至培养瓶，24小时后换液。

2. 细胞传代：细胞汇合度达80%–90%时，将培养上清中的悬浮细胞（含小团块）收集后与贴壁细胞一并处理——悬浮部分短暂消化成小团，贴壁部分 PBS 润洗后用 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 浸泡消化；消化时间延长后仍会有小团块属正常现象，可适当增加吹打次数；合并收集后按 1:2–1:3 接种新瓶（传代比例不宜过大）。

3. 细胞冻存：采用 90% FBS + 10% DMSO 冻存液或无血清冻存液重悬细胞，程序降温后液氮长期保存；建议在较低代次冻存备份。

注意事项：细胞倍增速度受培养基影响较大，传代比例不宜过大；换液时培养基应沿壁缓缓吸出/加入，避免贴壁细胞被吹起而丢失；本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

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