一、基本信息
1. 产品编号:HY-A537
2. 产品名称:C4-2B(人前列腺癌细胞)
3. 英文名称:C4-2B Human Prostate Cancer Cell Line
4. 细胞别称:C42B、C4-2B bonemetastatic
5. 种属来源:人
6. 年龄性别:—(LNCaP 供体为 50 岁男性,见背景介绍)
7. 组织来源:前列腺(淋巴结转移背景,见背景介绍)
8. 疾病背景:前列腺癌(骨转移亚系)
9. 细胞类型:肿瘤细胞
10. 细胞形态:上皮样,多角形,尺寸规则,散在斑片状贴壁生长
11. 生长特性:贴壁生长
12. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
13. 传代代数:10代以内
14. RRID:—(以引种证书为准)
15. 保藏机构:—(C4-2 谱系,见引种证书)
16. 生物安全等级:BSL-1
17. 分子特征:表达雄激素受体(AR)并对雄激素有反应;表达前列腺特异性抗原(PSA)与前列腺酸性磷酸酶(PAP);PTEN 缺失伴高水平 p-Akt;高表达 EGFR、HER2/neu
18. 质量检测:HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母、真菌检测阴性;STR鉴定正确
二、细胞特征
1. 背景介绍:C4-2B 源自 LNCaP 细胞系谱系——LNCaP 最初分离自一位 50 岁前列腺癌患者的左锁骨上淋巴结转移灶;1993 年将 LNCaP 与骨肉瘤衍生的人成纤维细胞共同接种至去势裸鼠体内,分离培养出 C4-2 细胞;C4-2B 则是 C4-2 的骨转移亚系。该谱系是国际公认的研究前列腺癌进展与骨转移的经典模型。
2. 分子特征:细胞表达雄激素受体(AR)并对雄激素有反应,表达前列腺特异性抗原(PSA)与前列腺酸性磷酸酶(PAP);PTEN 基因缺失并伴随高水平 p-Akt 表达;高表达 EGFR 与 HER2/neu——是去势抵抗性前列腺癌(CRPC)信号通路研究的重要模型。
3. 生长特性:上皮样,多角形,贴壁生长但贴壁较弱,容易出现成片脱落;细胞偏嗜酸性,培养基消耗较快;裸鼠体内具有致瘤性。
三、培养条件
1. 基础培养基:RPMI-1640
2. 培养基配方:90% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
3. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
4. 推荐传代比例:1:2–1:4
5. 推荐换液频率:2–3 次/周(细胞偏嗜酸性、培养基消耗较快,可视培养基颜色变化缩短换液间隔)
6. 消化液类型:0.25% 胰蛋白酶-EDTA(消化 1–2 分钟)
7. 冻存条件:FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液,-80℃ 程序降温后液氮储存
8. 倍增时间:约24–48小时
四、产品应用
1. 前列腺癌骨转移研究:骨转移机制、骨-肿瘤微环境互作研究
2. 去势抵抗研究:AR 信号、PTEN/PI3K/Akt 通路及抗雄激素耐药机制研究
3. 靶向治疗研究:EGFR/HER2 通路靶向药物评价
4. 成瘤模型研究:裸鼠前列腺癌模型构建与在体药效评价
5. 分子标志物研究:PSA/PAP 表达调控研究
五、产品优势
1. 谱系经典:LNCaP→C4-2→C4-2B 骨转移谱系,前列腺癌研究金标准模型之一
2. 分子明确:AR+/PSA+/PTEN 缺失/p-Akt 高表达,CRPC 与骨转移研究高度对口
3. 成瘤性好:裸鼠致瘤性明确,体内外模型兼备
4. 质量可靠:多种病原体检测阴性,STR 鉴定正确
六、培养方法
1. 细胞复苏:从液氮中取出冻存管,立即置于 37℃ 水浴中轻轻摇动加速解冻;完全解冻后立即转移至 4 mL 预温完全培养基中轻柔混匀;1000 RPM离心4分钟去除上清(减少 DMSO 毒性);加入 1–2 mL 新鲜完全培养基重悬,转移至 T25 培养瓶(加 8 mL 完全培养基),37℃、5% CO₂ 培养箱过夜培养使细胞贴壁。
2. 细胞传代:贴壁细胞密度达 70%–90% 时及时传代(勿过度拥挤导致成片脱落);弃培养基,无钙镁 PBS 洗涤 1–2 次;加入 2 mL 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 于 37℃ 消化 1–2 分钟,至大部分细胞变圆脱落立即加完全培养基终止并轻轻吹打;1000 RPM离心4分钟,弃上清;加 6–8 mL 完全培养基重悬混匀,按 1:2–1:4 分装新瓶(通常加 8 mL 完全培养基)。
3. 细胞冻存:细胞状态良好、密度适中时,PBS 洗涤 1–2 次后加 1 mL 胰酶消化,变圆脱落后加 2 mL 完全培养基终止;1000 RPM离心5分钟去上清;用 FBS 重悬并加 DMSO 至终浓度 10%,迅速混匀;每管 1 mL 分装,程序降温盒 -80℃ 至少 2 小时后转液氮长期保存。
注意事项:细胞贴壁能力较弱,操作和运输过程中应避免剧烈震动;细胞在略微偏酸性环境下生长状态更好,注意培养基 pH 调节;细胞密度达 70%–80% 时及时传代,防止过度拥挤导致成片脱落死亡;本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
相关产品:LNCaP(人前列腺癌细胞)、C4-2(人前列腺癌细胞)、22Rv1(人前列腺癌细胞)