一、基本信息
1. 产品编号:HY-A510
2. 产品名称:MOLM-13-Luc(人急性髓白血病细胞)
3. 英文名称:MOLM-13-Luc Human Acute Myeloid Leukemia Luciferase Reporter Cell Line
4. 细胞别称:MOLM13-Luc、MOLM-13-LUC、MOLM-13荧光素酶标记细胞
5. 种属来源:人
6. 年龄性别:20岁;男性
7. 组织来源:外周血
8. 疾病背景:急性髓系白血病(AML FAB M5a,复发期;初诊为 MDS-RAEB)
9. 细胞类型:荧光素酶报告基因稳定细胞系
10. 宿主细胞:MOLM-13(DSMZ ACC-554)
11. 细胞形态:单个圆形细胞,淋巴母细胞样,悬浮生长
12. 生长特性:悬浮生长
13. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
14. 传代代数:10代以内
15. RRID:CVCL_2117(宿主细胞 MOLM-13)
16. 保藏机构:DSMZ; ACC-554(宿主细胞 MOLM-13)
17. 抗性标记:嘌呤霉素(Puromycin)抗性,可用嘌呤霉素维持筛选(常用维持浓度 0.5–1.0 µg/mL)
18. 生物安全等级:BSL-1
19. 质量检测:支原体检测阴性,STR鉴定正确
二、细胞特征
1. 背景介绍:MOLM-13-Luc 由经典人急性髓系白血病细胞系 MOLM-13 经慢病毒转染构建,稳定整合萤火虫荧光素酶(Luciferase)基因。宿主 MOLM-13 于 1995 年从一名 20 岁男性急性髓系白血病(AML,FAB M5a 型)复发患者的外周血建立,该患者初诊为骨髓增生异常综合征(MDS,RAEB 型),与 MOLM-14 细胞系为同一患者的姐妹细胞系。
2. 分子特征:携带 FLT3 内部串联重复突变(FLT3-ITD)——导致受体配体非依赖性组成型激活,与 AML 不良预后密切相关;同时携带 CBL 外显子 8 缺失突变;13q 三拷贝;外显子组与 RNA 测序数据已公开。
3. 功能特性:组成型表达荧光素酶,发光信号与活细胞数量正相关;宿主细胞在裸鼠皮下可稳定成瘤,且经 FLT3 抑制剂体外梯度诱导可获得 D835Y 继发性突变耐药株,是 FLT3 抑制剂耐药机制研究的经典模型。
三、培养条件
1. 基础培养基:RPMI-1640
2. 培养基配方:89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
3. 筛选维持:可添加 0.5–1.0 µg/mL 嘌呤霉素维持抗性标记(常规培养亦可不加)
4. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
5. 推荐传代比例:1:2–1:3,每 2–3 天传代
6. 推荐换液频率:2–3 次/周;维持细胞密度 0.4–2.0×10⁶cells/mL,最大密度约 2.0×10⁶cells/mL
7. 细胞收集方式:200–300×g 离心 5–10 分钟
8. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
9. 倍增时间:约50小时(文献报道 24 小时–3–4 天不等,视培养条件而定)
四、产品应用
1. 活体生物发光成像:AML 体内模型中白血病细胞的定植、增殖与播散实时无创追踪
2. FLT3 靶向治疗研究:FLT3 抑制剂(midostaurin、gilteritinib、quizartinib、sorafenib 等)体内外药效评价
3. 获得性耐药研究:体外诱导 D835Y 等继发性 FLT3-TKD 突变,模拟临床耐药演进模式
4. MLL 重排白血病研究:MLL 重排 AML 机制及分化诱导治疗研究
5. 新药筛选:抗 AML 候选药物的体内成瘤模型评价
五、产品优势
1. 宿主权威:DSMZ ACC-554 保藏,FLT3-ITD 突变背景明确,AML 研究引用广泛
2. 发光稳定:慢病毒稳定整合 Luc 基因,适合白血病细胞体内示踪
3. 模型经典:裸鼠成瘤性明确,是 FLT3 抑制剂原发/继发耐药研究的金标准细胞之一
4. 质量可靠:STR 鉴定正确,支原体检测阴性,可溯源
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管(水勿没过管帽),将细胞悬液转入含 6–7 mL 完全培养基的 15 mL 离心管,1100 rpm离心4分钟去除冻存液,新鲜完全培养基重悬后接种。注意:复苏初期细胞活率可能偏低,建议接种于 12 孔或 24 孔板开始培养,4–5 天活率恢复后再转入培养瓶扩增;请勿直接复苏到 T75 培养瓶或 10 cm 培养皿。
2. 细胞传代:悬浮细胞无需胰酶消化,维持细胞密度 0.4–2.0×10⁶cells/mL,每 2–3 天按 1:2–1:3 比例加入新鲜完全培养基传代。
3. 细胞冻存:无血清冻存液重悬细胞,程序降温后液氮长期保存;建议在较低代次冻存备份。
注意事项:本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
七、相关产品