一、基本信息
1. 产品编号:HY-A501
2. 产品名称:hTERT-RPE1(人视网膜色素上皮细胞)
3. 英文名称:Human hTERT-Immortalized Retinal Pigment Epithelial Cell Line hTERT-RPE1
4. 细胞别称:hTERT RPE-1、hTERT-RPE1、RPE-1、RPE1
5. 种属来源:人
6. 年龄性别:女性
7. 组织来源:眼;视网膜;视网膜色素上皮
8. 细胞类型:永生化(hTERT)非转化上皮细胞
9. 细胞形态:上皮细胞样,鹅卵石样排列,贴壁生长
10. 生长特性:贴壁生长
11. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
12. 传代代数:10代以内
13. RRID:CVCL_4388
14. 保藏机构:ATCC; CRL-4000 / Cellosaurus; CVCL_4388
15. 生物安全等级:BSL-1
16. 质量检测:STR鉴定正确,无支原体污染
二、细胞特征
1. 背景介绍:hTERT-RPE1 细胞系由 Geron 公司建立,来源于正常人视网膜色素上皮细胞系 RPE-340,通过转染携带 hTERT 基因和潮霉素抗性标记的 pGRN145 质粒获得永生化。该细胞保留近二倍体核型(46条染色体),无转化表型,是目前研究人类正常细胞生理功能引用最广的细胞模型之一(SCI 文献引用 900 余篇)。
2. 分子特征:表达 RPE 特异性标志物 RPE65、BEST1、ZO-1,广谱细胞角蛋白(pan-cytokeratin)阳性;保留正常 RPE 细胞的典型生物学特性。
3. 功能特性:血清饥饿(无血清培养约48h)可高效诱导初级纤毛形成,是纤毛与中心体研究最常用的细胞模型;细胞体积较大、贴壁稳定、运动性低,非常适合长时程活细胞成像。
三、培养条件
1. 基础培养基:DMEM/F12(1:1)
2. 培养基配方:89% DMEM/F12 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗;ATCC 推荐添加 0.01 mg/mL 潮霉素B以维持 hTERT 筛选压力,常规培养亦可不加
3. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
4. 推荐传代比例:1:2–1:4
5. 推荐换液频率:2–3 次/周
6. 消化液类型:0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA
7. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
8. 倍增时间:约24–36小时
四、产品应用
1. 眼科疾病研究:年龄相关性黄斑变性(AMD)发病机制、RPE 变性损伤修复、视网膜疾病药物评价——hTERT 永生化 RPE 细胞是 AMD 研究的重要工具
2. 细胞周期与有丝分裂研究:活细胞成像、染色体分离、纺锤体组装检验点、细胞周期同步化
3. 纤毛与中心体研究:初级纤毛形成机制、纤毛病、中心体复制与定位
4. 基因功能研究:CRISPR/Cas9 基因编辑与内源基因标记(支持 AAVS1 安全港位点整合)、基因敲除/敲入
5. DNA 损伤与修复研究:复制应激、同源重组修复、基因组稳定性
五、产品优势
1. 模型经典:与 ATCC CRL-4000 同源,近二倍体核型、非转化表型
2. 质量可靠:STR 鉴定正确,无菌、无支原体污染,提供完整鉴定报告
3. 应用广泛:眼科、细胞周期、纤毛、基因编辑等多领域通用工具细胞
4. 专业支持:复苏活率高,批次稳定性好,提供专业技术支持
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管,1000 rpm 离心5分钟去除冻存液,完全培养基重悬后接种至培养瓶,24小时后换液。
2. 细胞传代:细胞汇合度达80%–90%时,弃培养上清,PBS润洗1–2次,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA于37℃消化1–2分钟,细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止,按1:2–1:4比例接种新瓶。
3. 细胞冻存:无血清冻存液重悬细胞,程序降温后液氮长期保存;建议在较低代次冻存备份。
4. 注意事项: 本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
七、相关产品
1. 相关产品: ARPE-19(人视网膜色素上皮细胞)、293T(人胚肾细胞)