一、基本信息

1. 产品编号：HY-A519

2. 产品名称：Expi293F（人胚肾细胞）

3. 英文名称：Expi293F Human Embryonic Kidney Cell Line

4. 细胞别称：Expi-293F、293F Suspension、Expi293

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：女性；胎儿来源

7. 组织来源：胚肾

8. 细胞类型：悬浮驯化工程细胞系（293F 亚克隆）

9. 细胞形态：上皮样，悬浮生长

10. 生长特性：悬浮生长（摇床震荡培养）

11. 细胞规格：1×10⁶cells/1.8mL冻存管

12. 传代代数：10代以内

13. 生物安全等级：BSL-1

14. 质量检测：无菌、无支原体污染

15. 冻存条件：RPMI-1640 + 10% FBS + 8% DMSO 或无血清冻存液，液氮储存

二、细胞特征

1. 背景介绍：Expi293F 细胞源自人胚肾 293（HEK-293）细胞系，为 293F 细胞的悬浮驯化亚克隆，是 Expi293 表达系统的核心宿主组分。该细胞经专门驯化，适应化学成分确定的无血清悬浮培养体系，可在摇瓶与生物反应器中生长至高密度，相比普通 293 细胞表现出更快的生长速度与更高的存活率。

2. 表达性能：具有高度可转染性，配合转染试剂可实现高水平瞬时蛋白表达，外源蛋白得率高，广泛应用于重组抗体、重组蛋白的表达生产。

3. 培养特性：悬浮生长，倍增快速，传代周期 2–3 天，无需胰酶消化（直接稀释传代），适合高密度放大培养与工艺开发。

三、培养条件

1. 基础培养基：Expi293 表达培养基（化学成分确定的无血清培养基，无需另加血清及动物源成分）

2. 培养方式：125 mL 摇瓶（装液量约 20 mL）置于带水平摇床的 CO₂ 培养箱，转速 100–120 RPM

3. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃；湿度 70%–80%

4. 推荐传代比例：1:2–1:3（半换液法）

5. 传代时机：细胞密度 2–3×10⁶cells/mL 时传代，传代后起始密度约 1×10⁶cells/mL

6. 推荐传代周期：2–3 天

7. 细胞收集方式：200–300×g 离心 5–10 分钟

8. 冻存条件：RPMI-1640 + 10% FBS + 8% DMSO（现用现配）或无血清冻存液，冻存密度 1–2×10⁷cells/管，液氮储存

9. 倍增时间：约24–36小时

四、产品应用

1. 重组蛋白表达：高水平瞬时表达重组蛋白、分泌型蛋白

2. 重组抗体生产：单克隆/双特异性抗体的瞬时表达与工艺开发

3. 病毒载体生产：AAV、慢病毒等病毒载体的包装与生产

4. 诱导表达系统：四环素诱导表达体系的构建与验证

5. 工艺放大：摇瓶至生物反应器的高密度悬浮培养工艺开发

五、产品优势

1. 表达高效：高度可转染，瞬时蛋白表达产量高，行业金标准表达宿主之一

2. 悬浮驯化：适应无血清化学成分确定培养基，高密度培养，可直接放大至生物反应器

3. 生长快速：倍增快、传代周期短，生产批间周期紧凑

4. 质量可靠：支原体检测阴性，复苏活率高，批次稳定性好

六、培养方法

1. 细胞复苏：37℃水浴快速摇晃融化冻存管，将 1.8 mL 细胞悬液加入含 4–6 mL 预温完全培养基的离心管混匀，1000 rpm离心3–5分钟去除冻存液，完全培养基重悬后加入含 20 mL 培养基的 125 mL 摇瓶，置于带水平摇床的 CO₂ 培养箱，100–120 RPM 震荡培养过夜，第二天镜检并计数。

2. 细胞传代：悬浮生长无需胰酶消化，每 24 小时计数一次，细胞密度达 2–3×10⁶cells/mL 时按 1:2–1:3 传代（半换液法），传代后起始密度约 1×10⁶cells/mL，补充新鲜培养基至 20 mL 左右，继续摇床震荡培养，传代周期 2–3 天。

3. 细胞冻存：收获细胞悬液计数后 1000 rpm离心3–5分钟，按 1–2×10⁷cells/mL 密度用冻存液（RPMI-1640 + 10% FBS + 8% DMSO，现用现配）或无血清冻存液重悬，每管 1 mL，程序降温盒 -80℃ 过夜后转入液氮；建议在培养前 3 代内冻存种子批。

注意事项：本产品仅供科学研究使用，不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。

七、相关产品

1. 相关产品：HEK-293（人胚肾细胞）、293T（人胚肾细胞）