一、基本信息
1. 产品编号:HY-A523
2. 产品名称:Akata-EBV-EGFP(人伯基特淋巴瘤EGFP标记细胞)
3. 英文名称:Akata-EBV-EGFP Human Burkitt's Lymphoma EGFP Reporter Cell Line
4. 细胞别称:Akata-EGFP、Akata-EBV-GFP、Akata绿色荧光标记细胞
5. 种属来源:人
6. 年龄性别:5岁;男性(儿童患者,建议按引种证书核对)
7. 组织来源:血液(伯基特淋巴瘤)
8. 疾病背景:伯基特淋巴瘤(EBV 阳性)
9. 细胞类型:EGFP 报告基因稳定细胞系
10. 宿主细胞:Akata(EBV 阳性伯基特淋巴瘤细胞系)
11. 细胞形态:淋巴细胞样,悬浮生长
12. 生长特性:悬浮生长
13. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
14. 传代代数:10代以内
15. 荧光表达:EGFP 组成型表达,流式细胞术检测阳性率约 99.3%
16. RRID:CVCL_1668(宿主细胞 Akata,建议按引种证书核对)
17. 保藏机构:—(宿主细胞 Akata 为文献广泛传代的 EBV 研究标准模型)
18. 抗性标记:嘌呤霉素(Puromycin)抗性,维持浓度 0.5 µg/mL
19. 生物安全等级:BSL-1
20. 质量检测:支原体、细菌、酵母、真菌检测均为阴性;STR鉴定正确
二、细胞特征
1. 背景介绍:Akata-EBV-EGFP 由经典 EBV 阳性伯基特淋巴瘤细胞系 Akata 转染构建,稳定整合并组成型表达绿色荧光蛋白(EGFP)基因。宿主 Akata 源自伯基特淋巴瘤患者,是国际公认的 EBV(EB 病毒)研究标准模型——经抗人 IgG 抗体处理可高效诱导 EBV 裂解期再激活,广泛用于病毒复制、裂解基因表达调控及病毒-宿主相互作用研究。
2. 荧光性能:组成型表达 EGFP,无需底物、蓝光激发即可发出绿色荧光;质控显示流式检测 GFP 阳性率约 99.3%,荧光显微镜下荧光强度高且均匀,适合实时追踪病毒感染与病毒基因表达动态。
3. 质量与鉴定:多种微生物检测阴性,STR 鉴定正确,细胞身份明确。
三、培养条件
1. 基础培养基:RPMI-1640
2. 培养基配方:89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗(常规培养可不加双抗,实验室存在污染风险时可按需添加)
3. 筛选维持:添加 0.5 µg/mL 嘌呤霉素维持 EGFP 表达稳定(常规培养亦可不加)
4. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
5. 推荐传代比例:1:2–1:4
6. 推荐换液频率:2–3 次/周
7. 细胞收集方式:200–300×g 离心 5–10 分钟
8. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
9. 倍增时间:约24–36小时
四、产品应用
1. EBV 感染建模:EBV 感染、复制及潜伏—裂解转换机制研究
2. 病毒基因表达示踪:通过 EGFP 荧光信号实时追踪病毒基因表达与感染进程
3. 裂解再激活研究:抗 IgG 诱导 EBV 裂解复制模型、抗 EBV 药物筛选
4. 淋巴瘤研究:伯基特淋巴瘤发生机制、EBV 致癌机制研究
5. 细胞示踪研究:共培养体系及体内外细胞追踪
五、产品优势
1. 宿主权威:EBV 研究金标准细胞系,anti-IgG 裂解诱导体系成熟,文献引用广泛
2. 荧光优质:流式阳性率约 99.3%,组成型高表达 EGFP,信号稳定、成像直观
3. 抗性标记:带嘌呤霉素抗性,便于筛选维持与实验设计
4. 质量可靠:多种微生物检测阴性,STR 鉴定正确,可溯源
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管(管身勿浸入水面以防污染),70% 乙醇擦拭消毒后,将细胞悬液转入含完全培养基的离心管,200–300×g 离心5分钟去除冻存液,新鲜完全培养基重悬后接种,24小时后观察换液。
2. 细胞传代:悬浮细胞无需胰酶消化,当细胞密度较高时按 1:2–1:4 比例稀释加入新鲜完全培养基传代,维持适宜生长密度。
3. 细胞冻存:无血清冻存液重悬细胞,程序降温后液氮长期保存;建议在较低代次冻存备份。
注意事项:本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途;宿主细胞携带 EBV 基因组,请按常规生物安全规范操作。
相关产品:Akata(EBV 阳性伯基特淋巴瘤细胞)、Raji-Luc(人伯基特淋巴瘤荧光素酶细胞)、Daudi(人伯基特淋巴瘤细胞)