一、基本信息

1. 产品编号：HY-A556

2. 产品名称：MDA-MB-436-Luc2（人三阴性乳腺癌荧光素酶标记细胞）

3. 英文名称：MDA-MB-436-Luc2 Human Triple-Negative Breast Cancer Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称：MDA-MB-436(Luc2)、MDA-MB-436-Luc、CTCC-0370-Luc2

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：43岁；女性

7. 组织来源：乳腺

8. 疾病背景：乳腺腺癌（三阴性乳腺癌，TNBC）

9. 细胞类型：荧光素酶报告基因稳定细胞系

10. 宿主细胞：MDA-MB-436

11. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

12. 生长特性：贴壁生长

13. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

14. 传代代数：10代以内

15. RRID：CVCL_0623（宿主细胞 MDA-MB-436，建议按引种证书核对）

16. 保藏机构：ATCC; HTB-130（宿主细胞 MDA-MB-436）

17. 抗性标记：嘌呤霉素（Puromycin）抗性，维持浓度 0.5 µg/mL

18. 生物安全等级：BSL-1

19. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍：MDA-MB-436-Luc2 由经典人乳腺癌细胞系 MDA-MB-436（源自 43 岁女性乳腺癌患者，ATCC HTB-130）稳定转染 Luc2 荧光素酶报告基因构建，带嘌呤霉素抗性标记。宿主 MDA-MB-436 是三阴性乳腺癌（TNBC）＋BRCA1 突变的经典模型——BRCA1 基因突变导致同源重组修复缺陷（HRD），对 PARP 抑制剂敏感，是 PARP 抑制剂"合成致死"研究、DNA 修复缺陷机制研究及 TNBC 治疗策略开发的代表性细胞系。

2. 发光特性：Luc2 报告基因组成型表达，荧光素酶底物（D-荧光素）存在下发出生物发光信号，信号强度与活细胞数量呈正相关，适合活体成像实时追踪 TNBC 体内生长、转移及药物反应。

3. 形态与生长：上皮细胞样，贴壁生长，成片/岛状融合；传代比例 1:2（以培养瓶底面积计，传代比例不宜过大），每 2–3 天换液。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 筛选维持：可添加 0.5 µg/mL 嘌呤霉素维持 Luc 表达稳定（常规培养亦可不加）

4. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

5. 推荐传代比例：1:2（以培养瓶底面积计，传代比例不宜过大）

6. 推荐换液频率：每 2–3 天一次

7. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA（消化 3–5 分钟）

8. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（勿 -80℃ 长期保存，会降低存活率）

9. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. PARP 抑制剂研究：BRCA1 缺陷"合成致死"机制、PARP 抑制剂（奥拉帕利等）敏感性及获得性耐药研究

2. DNA 修复研究：同源重组修复缺陷（HRD）、BRCAness 表型机制研究

3. 三阴性乳腺癌研究：TNBC 发生发展、侵袭转移与靶向治疗策略

4. 活体生物发光成像：乳腺癌原位/皮下模型生长与转移的实时无创监测

5. 药物筛选：抗乳腺癌候选药物的体内外活性评价、联合用药方案研究

五、产品优势

1. 宿主权威：ATCC HTB-130 同源，TNBC＋BRCA1 突变经典模型，文献引用广泛

2. 分子明确：BRCA1 突变/HRD 背景——PARP 抑制剂研究高度对口

3. 发光稳定：Luc2 稳定整合表达，带嘌呤霉素抗性便于筛选维持

4. 质量可靠：生物安全 1 级，STR 鉴定正确，支原体检测阴性

六、培养方法

1. 细胞复苏：将冻存管置于 37℃ 水浴中来回晃动迅速解冻（约 2 分钟，管口置于水面之上防污染）；70% 酒精喷拭管壁后转入生物安全柜，将冻存液转入含 5 mL 完全培养基的离心管，200×g 离心 5–10 分钟去除冻存液；用预温的完全培养基重悬细胞并转入培养瓶，37℃、5% CO₂ 培养。注意：收到冻存细胞请立即解冻培养，来不及请存于液氮（-80℃ 储存会降低存活率）；运输过程中脱落的漂浮细胞仍为活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。

2. 细胞传代：吸弃培养基，PBS 清洗一次；加入 1.0 mL 0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA（12.5 cm² 培养瓶用量，可酌情增减）于 37℃ 孵育 3–5 分钟至细胞脱落分离；加入 2 mL 完全培养基终止消化并轻轻吹打分散；200×g 离心 5 分钟，去上清，适量培养基重悬后按 1:2 接种新瓶（总体积约 4 mL）；每 2–3 天换液一次。

3. 细胞冻存：胰酶消化收集细胞，无血清冻存液重悬至 1×10⁶cells/管，每管 1 mL；放入冻存盒 -80℃ 24 小时后转入液氮长期保存（勿 -80℃ 长期保存，会降低存活率）。

注意事项：本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用；体内成像实验需配套荧光素酶底物（D-荧光素）。

相关产品：MDA-MB-436（人三阴性乳腺癌细胞）、HCC-1937-Luc（人乳腺癌荧光素酶细胞）、MDA-MB-231-Luc（人三阴性乳腺癌荧光素酶细胞）