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人原代皮肤成纤维细胞

货号:HY-I081

基本信息

  • 产品名称:人皮肤成纤维细胞

  • 英文名称:Human Skin Fibroblasts

  • 细胞简称:HSF

  • 货号:SNP-H023

  • 种属来源:人

  • 组织来源:皮肤

  • 细胞类型:原代细胞

  • 生长特性:贴壁生长

  • 细胞形态:成纤维细胞样(梭形或星形)

  • 传代次数:2-3代(不同代次细胞形态可能有差异)

  • 生物安全等级:1级

  • 产品规格:5×10⁵ cells/份

  • 鉴定方法:经波形蛋白免疫荧光鉴定,细胞纯度大于90%

  • 包被条件:不包被

  • 消化液:0.25% 胰蛋白酶-EDTA

  • 专用培养基:尚恩生物 成纤维细胞体系(推荐货号:SNPM-H023)

  • 培养条件

    • 温度:37℃

    • 气相:5% 二氧化碳

    • 湿度:饱和湿度

  • 冻存条件:液氮储存

  • 细胞货期:现货或定制

  • 运输方式:冻存发货(需加干冰运输费用)

  • 供应限制:仅限于科学研究、科研或工业等非医疗目的,不得用于人类或动物临床试验、诊断或治疗等医疗目的

细胞特征

  • 形态特征:典型的成纤维细胞样形态,细胞呈梭形或星形,具有多个突起,贴壁生长,细胞核呈规则的卵圆形。

  • 组织学定位:是皮肤真皮层的主要细胞成分,在真皮层中紧密排列,形成纤维网状结构,为皮肤提供支撑和弹性。

  • 功能特性

    1. 结构支持:主要功能是合成和分泌胶原蛋白、弹性纤维等细胞外基质蛋白,为皮肤提供强度、弹性和韧性。

    2. 创伤修复:积极参与皮肤创伤修复。当皮肤受损时,成纤维细胞会活化、增殖并迁移至损伤部位,参与肉芽组织形成、基质重塑和疤痕形成。

    3. 细胞通讯:通过分泌生长因子、细胞因子等信号分子,与角质形成细胞、免疫细胞等相互作用,调节皮肤稳态和炎症反应。

  • 临床应用与研究价值:是研究皮肤生理、老化、纤维化疾病(如硬皮病)、创伤愈合、组织工程(如人工皮肤构建)及化妆品功效评估(如抗皱、紧致)的核心体外模型

培养条件

  • 专用培养基:尚恩生物 成纤维细胞体系(货号:SNPM-H023)

  • 培养环境

    • 温度:37℃

    • 气相:5% 二氧化碳

    • 湿度:饱和湿度

  • 生长表面:普通组织培养塑料表面,无需特殊包被。

产品应用

  • 皮肤生物学与老化研究:研究皮肤衰老机制(如细胞衰老、ECM降解)、光老化、以及评估抗衰老活性成分(如维生素C、视黄醇、多肽等)对成纤维细胞增殖、胶原合成及抗氧化能力的影响。

  • 皮肤创伤愈合与再生医学:模拟伤口愈合过程,研究成纤维细胞在炎症期、增殖期和重塑期的作用,以及生长因子(如TGF-β, FGF, PDGF)的调控机制。用于组织工程皮肤支架的细胞来源研究。

  • 皮肤纤维化疾病研究:作为研究病理性疤痕(增生性疤痕、瘢痕疙瘩)、硬皮病等纤维化疾病的细胞模型,探讨其过度增殖和异常ECM沉积的分子机制。

  • 药物与化妆品安全性及功效评价:用于评估外用药、化妆品原料及终产品对皮肤细胞的细胞毒性、刺激性以及促进胶原生成、修复屏障等功效性

  • 疾病建模与基因功能研究:可用于建立特定基因突变(如与早衰症、Ehlers-Danlos综合征相关)的疾病模型,研究相关基因在皮肤稳态中的功能。

产品优势

  • 高品质原代细胞:采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备,细胞活力高,状态好。

  • 严格质量鉴定:每批细胞均经过波形蛋白免疫荧光鉴定,确保细胞纯度大于90%,来源可靠。

  • 配套专用培养体系:推荐使用配套的成纤维细胞专用培养基,为细胞提供最适生长环境,简化操作,保证实验可重复性。

  • 应用领域明确:是皮肤科学、再生医学、药理学及化妆品研发等领域不可或缺的基础研究工具,直接反映人体皮肤细胞的生理和病理状态。

培养方法

收货与复苏处理(冻存发货):

  1. 收货检查:收到细胞后,立即检查干冰是否完全挥发,冻存管是否融化。若有异常及时联系客服。

  2. 快速复苏:为保证高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。

  3. 复苏步骤
    a. 将冻存管置于37℃水浴中,快速摇晃至完全解冻(约1-2分钟)。
    b. 将细胞悬液转移至无菌离心管,加入适量预热的专用培养基稀释。
    c. 1000 rpm离心5分钟,小心弃去上清。
    d. 加入1-2 mL新鲜专用培养基,轻柔重悬细胞。
    e. 将细胞悬液接种至含适量专用培养基的培养皿或培养瓶中(建议接种密度适中)。
    f. 置于37℃、5% CO₂培养箱中静置培养。

  4. 换液:复苏后24-48小时进行首次全量换液,以去除残留的冻存液和死细胞碎片。之后根据培养基颜色变化(如变黄)每2-3天换液一次。

传代操作:

  1. 时机判断:当细胞融合度达到80%-90%,细胞生长旺盛时进行传代。原代细胞不建议长满至100%,以免进入衰老。

  2. 洗涤:弃去旧培养上清,用无菌PBS轻轻润洗细胞1-2次。

  3. 消化:加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液,覆盖细胞层,室温或37℃消化1-3分钟

  4. 观察与终止:在显微镜下观察,待大部分细胞变圆、边缘开始脱离培养表面时,立即加入等体积或2倍体积的含血清的专用培养基终止消化。

  5. 收集细胞:用移液器轻轻吹打培养表面,使细胞完全脱落,形成单细胞悬液。将细胞悬液转移至离心管。

  6. 离心:1000 rpm离心5分钟,弃去上清。

  7. 重悬与接种:加入适量新鲜专用培养基重悬细胞,按1:2 或 1:3的传代比例接种到新的培养器皿中。

  8. 培养:补充足量新鲜培养基,放回培养箱继续培养。

冻存操作:

  1. 选择细胞:选择处于对数生长期、状态良好的细胞进行冻存。

  2. 消化收集:按传代方法消化并收集细胞。

  3. 计数与配制冻存液:对细胞进行计数。使用无血清细胞冻存液或按配方(如:90% FBS + 10% DMSO)配制冻存液。将细胞重悬于冻存液中,使最终细胞密度为1×10⁶ ~ 5×10⁶ cells/mL

  4. 分装:将细胞悬液分装至冻存管,每管1.0-1.5 mL。

  5. 程序冻存:使用程序降温盒或按“慢冻”原则(4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜),最后转移至液氮中长期保存。

注意事项

  • 原代细胞特性:人皮肤成纤维细胞为原代细胞,体外增殖能力有限,通常可传代2-3代。随着代次增加,细胞可能逐渐衰老,增殖减慢,形态拉长,功能下降。建议尽早使用低代次细胞进行实验。

  • 轻柔操作:原代细胞较为“娇嫩”,所有操作(如吹打、离心)应尽量轻柔,避免机械损伤。

  • 污染防控:严格遵守无菌操作规程。原代细胞易受污染,建议在培养液中添加常规抗生素(如青霉素-链霉素)。

  • 培养基专用性:务必使用推荐的成纤维细胞专用培养基或经验证的其他适合培养基,勿随意更换,否则可能严重影响细胞状态和功能。

  • 细胞鉴定:建议在实验前通过免疫荧光等方法对细胞进行鉴定(如Vimentin阳性,CK阴性),确认其成纤维细胞身份。

  • 功能实验:进行胶原合成、迁移等功能实验时,需根据细胞状态优化实验条件,并设立适当的阳性对照。


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产品描述

人皮肤成纤维细胞是源自皮肤真皮层的原代细胞,呈典型梭形,贴壁生长。作为皮肤结构和功能的核心细胞,它广泛应用于皮肤衰老机制、创伤愈合、纤维化疾病及化妆品功效评价研究。本产品为高品质HSF细胞,经Vimentin鉴定纯度>90%,配套专用培养基,是进行皮肤生物学与再生医学研究的可靠工具。


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