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NK-92细胞专用培养基

货号:HY-CSC-114

NK-92细胞培养基是即用型IL-2依赖培养基,预添100-200 U/mL rhIL-2,pH7.3±0.2,内毒素≤10 EU/mL,2-8℃避光3月,开瓶即用,维持高颗粒酶B/穿孔素表达,是NK细胞毒性实验培养基首选,稳定支持悬浮扩增与K562杀伤,助力CAR-NK与抗体ADCC研究。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-114
2. 产品名称: NK-92细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.3±0.2
5. 澄清度: 澄清
6. 产品规格: 500mL (125mL x 4)
7. 培养基成分: NK-92专用完全培养基(已添加重组人白介素-2)
8. 白介素-2(IL-2): 100-200 U/mL
9. 细菌检测: 阴性
10. 真菌检测: 阴性
11. 支原体检测: 阴性
12. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
13. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
14. 产品简介: NK-92细胞专用培养基经过长期测试,本产品可保持NK-92细胞最佳的生长状态。本产品中已包含NK-92细胞生长和维持杀伤功能所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于NK-92细胞的培养。
15. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
16. 运输条件: 冰袋冷藏运输
17. 有效期: 3个月
18. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

NK-92细胞是天然杀伤细胞研究、肿瘤免疫治疗和细胞疗法开发领域中一个极其重要且独特的工具细胞系。该细胞系源自一名患有非霍奇金淋巴瘤患者的NK细胞肿瘤,是一种人源、白细胞介素-2(IL-2)依赖性的天然杀伤细胞系。与大多数原代NK细胞不同,NK-92细胞具有无限增殖能力,且其表面缺乏大多数杀伤细胞免疫球蛋白样受体,但高表达多种激活型受体(如NKG2D, DNAM-1)和颗粒酶、穿孔素等杀伤介质,使其对广泛的恶性肿瘤细胞表现出强大且非MHC限制性的细胞毒性。在肿瘤免疫学研究领域,NK-92细胞的核心价值在于其作为“标准化效应细胞”的角色。它被广泛用于:评估肿瘤细胞对NK细胞介导的细胞毒性的敏感性;研究NK细胞识别和杀伤肿瘤细胞的分子机制,包括激活性和抑制性受体信号的平衡;筛选能够增强NK细胞抗肿瘤活性的免疫调节剂(如细胞因子、抗体、小分子药物);以及作为基因工程改造的平台,用于构建表达嵌合抗原受体(CAR)或特定抗体的“装甲化”NK细胞,以开发新一代的“现货型”细胞免疫疗法。此外,NK-92细胞也常用于研究抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC),是评估治疗性单克隆抗体(如利妥昔单抗、曲妥珠单抗)功能的重要工具。由于其增殖能力强、功能稳定且易于进行基因操作,NK-92细胞为连接基础免疫学、临床前药物开发和细胞治疗产品转化研究提供了一个不可或缺的、高效且标准化的体外模型。

NK-92细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为IL-2依赖性杀伤细胞模型的特殊培养需求而进行科学优化。NK-92细胞的存活、增殖和维持其强大的细胞毒性功能高度依赖于外源性重组人白介素-2(rhIL-2)的持续供应。本产品经过精心配比,采用专为NK-92细胞设计的优化基础培养基作为骨架,特别添加了维持细胞活力和功能所必需的、高浓度的优质胎牛血清。最关键的是,我们严格按照标准操作规程,在严格无菌条件下预先添加了足量的、高活性的重组人白介素-2(终浓度100-200 U/mL),确保开瓶即用,无需用户自行添加这一不稳定且易降解的关键细胞因子。该“NK-92专用基础培养基 + 血清 + rhIL-2”的完整配方,是针对NK-92细胞长期培养和功能维持的黄金标准方案。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持NK-92细胞以典型的悬浮淋巴样细胞形态快速、健康地增殖,并维持其高水平的颗粒酶B、穿孔素表达以及对多种肿瘤靶细胞(如K562)的强大细胞毒性活性。这确保了该细胞作为效应细胞在杀伤实验、抗体功能评估和CAR-NK疗法开发等研究中的可靠性与实验可重复性。它为肿瘤免疫学、免疫治疗研究和细胞疗法开发提供了一个稳定、高效且功能导向的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过全面优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行配制。其主要成分如下:
1. 基础培养基: NK-92细胞专用优化基础培养基。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)。
3. 关键细胞因子: 重组人白介素-2(Recombinant Human Interleukin-2, rhIL-2),终浓度为100-200 U/mL。
注:以上所有组分,尤其是对稳定性要求极高的rhIL-2,均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该标准化配方旨在为NK-92细胞同时提供充足的营养支持与维持其增殖和杀伤功能所必需的细胞因子刺激。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,特别是保护rhIL-2的活性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。这是推荐的保存方式,可最大程度维持rhIL-2活性。
                                     冷冻保存: 不推荐将配制好的含IL-2的完全培养基进行冷冻保存,因反复冻融会导致IL-2活性急剧下降。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入2-8℃冰箱避光保存,避免在任何环节使其长时间处于室温或较高温度环境中。

储存管理:本产品含活性细胞因子,请务必在2-8℃条件下避光保存,并避免剧烈摇晃。请根据实验计划合理安排订购和使用,尽量在开封后短期内用完。

使用前准备:使用前,将所需用量的培养基从冰箱取出,在室温或37℃水浴中短暂平衡至适宜温度。请勿长时间水浴加热。平衡后轻轻颠倒混匀。

无菌操作:所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程。

培养条件:NK-92细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为完全悬浮生长,通常呈单个或小团簇状。培养时需保持细胞处于高密度以维持其活力(建议维持在2-10 x 10^5 cells/mL)。

细胞传代与维持:通常每2-3天需要进行传代或补充新鲜培养基。传代时,收集细胞悬液,离心后弃去上清,用新鲜预热的本专用培养基重悬细胞,并按适当密度(通常为2-4 x 10^5 cells/mL)接种到新的培养容器中。切勿让细胞过度饥饿或密度过低,否则会导致细胞活力下降和功能丧失。

功能实验准备:若计划进行细胞毒性实验(如LDH释放法、Calcein-AM释放法),建议在实验前用新鲜的本专用培养基更换一次,以确保效应细胞处于最佳活化状态。

开封后保存:产品开封后,应立即拧紧瓶盖,并用封口膜密封瓶口,放回2-8℃冰箱避光保存,并建议在1-2周内使用完毕,以最大程度保证IL-2活性。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系,尤其关注细胞因子的活性和功能性:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。
2. 理化与活性指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.3±0.2)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合标准。核心在于,我们对每批次产品中添加的rhIL-2进行生物学活性测定,确保其浓度与活性符合标称范围(100-200 U/mL),这是保证NK-92细胞功能的关键。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的NK-92细胞进行全面的生长与功能验证试验。验证不仅包括细胞增殖速率、形态和存活率的评估,更重要的是进行细胞毒性功能验证(例如,使用标准靶细胞K562进行杀伤实验),以确保在本培养基中培养的NK-92细胞能够维持强大的、可重复的杀伤活性。这保证了产品卓越的批次间稳定性,对于需要细胞保持稳定且强大效应功能的免疫治疗研究至关重要。

六、注意事项

1. 核心储存要求:本产品含有活性细胞因子rhIL-2,必须在2℃~8℃条件下避光保存,严禁冷冻。请务必在标注的有效期内使用。

2. IL-2活性保护:重组人IL-2稳定性较差,易降解。配好的完全培养基应避免反复从冰箱取出放回,尽量减少在室温下的暴露时间。开封后应尽快使用。

3. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。

4. 污染防控:为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温。所有操作必须严格无菌。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。

5. 即用型说明:本产品为包含IL-2的完全培养基,用户无需也请勿再额外添加IL-2。本产品已包含血清和抗生素,可直接使用。

6. 细胞培养关键:NK-92细胞是IL-2依赖型细胞,必须保持在高密度(通常不低于2 x 10^5 cells/mL)以维持其活力和杀伤功能。密度过低会导致细胞凋亡和功能丧失。需勤于传代或补液。

7. 实验干扰:培养基中的血清可能干扰某些基于血清成分的检测(如某些ELISA或流式细胞术的抗体结合)。进行此类精细检测前,可能需要用无血清培养基短暂孵育洗涤细胞。

8. 生物安全:NK-92细胞来源于人,具有潜在的生物危害性。操作时请遵守严格的实验室生物安全规范(建议在二级生物安全柜内操作),做好个人防护。所有废弃物应按照生物危害物标准处理。

9. 用途限制:NK-92细胞及其专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产或家庭使用。

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