一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-392
2. 产品名称： TMD8细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： 90% RPMI-1640 + 10% FBS
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： TMD8细胞专用培养基已包含 TMD8细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于TMD8细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

TMD8细胞是一种人弥漫大B细胞淋巴瘤（Diffuse Large B-cell Lymphoma, DLBCL）细胞系，属于活化B细胞样（Activated B-cell-like, ABC）亚型，是血液肿瘤学研究和淋巴瘤靶向治疗开发领域中极具价值的体外模型。该细胞系来源于一名患有复发性DLBCL患者的淋巴结活检标本，具有典型的ABC-DLBCL分子特征。TMD8细胞携带MYD88 L265P功能获得性突变和CD79B突变，这两种突变协同激活B细胞受体（BCR）信号通路和NF-κB信号通路，导致细胞异常增殖和存活，是ABC-DLBCL中最常见的遗传学改变之一。因此，TMD8细胞成为研究BCR信号通路、开发BTK抑制剂（如伊布替尼/ibrutinib、泽布替尼等）以及探索ABC-DLBCL耐药机制的重要工具。其核心应用包括：作为研究活化B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤细胞生物学、B细胞受体信号转导、NF-κB通路持续激活和细胞存活机制的经典模型；评估抗淋巴瘤药物（特别是BTK抑制剂、BCL2抑制剂、PI3K抑制剂、免疫调节药物、CD20单抗等）的敏感性及耐药机制研究；研究MYD88-CD79B共突变驱动的下游信号通路异常，如IRAK4、NF-κB、JAK-STAT通路的持续活化；探索ABC-DLBCL不同遗传背景下的治疗反应和联合用药策略；用于高通量药物筛选，发现针对NF-κB依赖型淋巴瘤的新型治疗化合物；研究肿瘤微环境对淋巴瘤细胞的影响，特别是与免疫细胞、细胞因子和趋化因子的相互作用；建立异种移植瘤模型（如皮下或系统性注射免疫缺陷小鼠），用于体内评估抗淋巴瘤药物的疗效和药代动力学特性。TMD8细胞因其明确的ABC亚型特征、典型的MYD88/CD79B突变背景和可靠的实验重现性，成为DLBCL基础研究和转化医学领域，特别是针对ABC-DLBCL亚型研究不可或缺的重要细胞模型。

TMD8细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人活化B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤细胞的特定生长需求而进行科学优化。TMD8细胞是一种悬浮生长的圆形淋巴样细胞，细胞形态呈典型的淋巴细胞特征，细胞大小均一，胞质少，核质比高，生长较为迅速且呈单细胞悬浮或松散聚集状态。其体外培养需要提供支持其悬浮生长、旺盛增殖并维持其淋巴瘤细胞表型的适宜环境。本产品经过精心配比，以RPMI-1640培养基为基础，并添加了能有效支持TMD8细胞旺盛增殖和维持其关键生物学特性的优化成分：即提供充足生长因子、激素和营养物质的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%），以满足其高代谢需求和促进细胞增殖；同时本产品含有青霉素-链霉素双抗以有效预防细菌污染。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持TMD8细胞以典型的淋巴瘤细胞形态良好悬浮生长，增殖活力旺盛，细胞形态均一且呈透亮圆形，为后续的药物敏感性测试（特别是BTK抑制剂和化疗药物筛选）、信号转导通路研究（如BCR、NF-κB、MAPK通路）、细胞凋亡分析、基因功能研究或体内淋巴瘤模型构建提供状态可靠、性能稳定且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性，对于需要细胞提供稳定且可重复生长特性及药物反应性的ABC-DLBCL研究至关重要。它为活化B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤的基础机制研究、靶向药物开发和临床前评估，提供了一个稳定、高效、即用且经过充分优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下：
1. 基础培养基： RPMI-1640培养基，占比为90%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin）。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该配方旨在为悬浮生长的人活化B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤TMD8细胞提供全面的营养支持和有效的污染防护。用户可根据具体的实验目的（如无血清饥饿处理、添加特定BTK抑制剂、BCL2抑制剂、化疗药物或细胞因子如IL-6、IL-10、BAFF等），在无菌条件下进行补充。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                     冷冻保存： -20℃避光储存，保质期可延长至12个月。但需注意，反复冻融可能影响血清中生长因子的活性和抗生素的稳定性，建议根据实验用量分装后冻存，并严格避免多次冻融。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入2-8℃冰箱避光保存，避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理：建议在2-8℃下避光保存，并在有效期内使用。若需长期保存，可进行小体积分装后于-20℃冻存。

使用前准备：使用前，请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。预热时间不宜过长，避免营养成分降解。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意，由于含有血清，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。

无菌操作：虽然本产品已含有抗生素，但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程，以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求：对于BTK抑制剂（如伊布替尼、acalabrutinib等）及化疗药物（如阿霉素、环磷酰胺、地塞米松等）处理实验，通常在此完全培养基中进行。对于研究细胞凋亡机制，常需进行无血清或低血清处理以诱导细胞应激。对于研究B细胞受体信号，可添加抗IgM抗体或H2O2进行刺激。

培养条件：TMD8细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为悬浮生长，需定期在显微镜下观察其形态（圆形、透亮、单细胞悬浮）和密度，确保细胞健康生长。培养时无需胰酶消化，可通过轻柔吹打或直接取样进行传代和计数。

细胞传代：当细胞密度达到2-5×10^5 cells/mL或培养基变黄时，即可进行传代。通常按1:2至1:4比例稀释传代，直接加入新鲜预热的本专用培养基即可，无需消化。传代时需注意轻柔操作，避免机械损伤。

换液频率：根据细胞生长速度和密度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基，或进行半量换液。若细胞密度较高，需及时传代以避免营养耗竭和细胞过度聚集。

药物敏感性测试：通过MTT、CCK-8、流式细胞术（Annexin V/PI染色检测凋亡）等方法评估BTK抑制剂、化疗药物对细胞增殖和凋亡的影响。由于该细胞携带MYD88突变，对BTK抑制剂通常敏感，是测试此类药物及研究耐药机制的理想模型。

信号通路研究：可通过Western Blot、qPCR、免疫荧光等方法检测药物处理前后BTK、PLCG2、NF-κB（p65、IκBα）、IRAK4、MYD88、BCL2家族蛋白等关键信号分子的表达和磷酸化水平变化。

体内成瘤模型：可用于准备细胞悬液，通过皮下注射或尾静脉注射免疫缺陷小鼠（如NOD-SCID或NSG小鼠）建立淋巴瘤异种移植模型，用于评估药物体内疗效和肿瘤生长动力学。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存，避免反复温度波动。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持TMD8这一重要ABC-DLBCL研究模型的纯净性，以及确保涉及长期培养和药物测试的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的TMD8细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中悬浮生长良好，增殖活力旺盛，细胞形态典型（圆形、透亮、大小均一）且状态健康，确保了产品能够有效支持该活化B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤细胞的稳定快速生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定且可重复生长特性及药物反应性的各类机制研究和药物筛选实验至关重要。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清，冻融后可能会有少量絮状物析出，轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀、颜色异常或产生异味，请勿使用。

3. 污染防控：虽然本产品已含有抗生素，但为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施，避免与空气长时间接触。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS）和抗生素（青霉素-链霉素双抗），可以直接使用。如无特别需要，不需要额外添加血清或抗生素。

5. 细胞特性：TMD8细胞为活化B细胞样弥漫大B细胞淋巴瘤细胞，建议在低代次时冻存足量细胞，并定期进行支原体检测和细胞身份鉴定（如STR分型）。该细胞携带MYD88 L265P和CD79B突变，可用于相关靶向研究。

6. 缓冲液说明：本产品含有碳酸氢钠缓冲体系，常规培养时需置于含5% CO2的培养箱中以维持适宜的pH环境（7.2-7.4）。

7. 生物安全：TMD8细胞来源于人淋巴瘤患者，属于潜在生物危害材料，操作时应在生物安全柜内进行，并遵守相应的生物安全规范（通常为BSL-2级）。所有接触过细胞的器皿、培养基和废弃物应进行妥善灭菌处理，防止环境污染和交叉感染。

8. 交叉污染：需特别注意避免与其他细胞系，特别是其他淋巴瘤细胞系（如HBL-1、OCI-LY3、SU-DHL-2等ABC亚型细胞系）发生交叉污染，建议定期进行细胞身份鉴定。

9. 用途限制：TMD8细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。