1. 货号:HY-CSC-274
2. 产品名称: WI-38 VA13细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: MEM + 10% FBS + 1% 青霉素-链霉素双抗
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: WI-38 VA13细胞专用培养基已包含 WI-38 VA13细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于WI-38 VA13细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。
WI-38 VA13细胞系是一种SV40病毒转化的、永生化的人肺成纤维细胞系,其亲本细胞WI-38来源于正常女性胎儿肺组织。该细胞系因其来源明确、背景清晰且易于培养,在生命科学研究中具有广泛而重要的用途。WI-38 VA13细胞通过SV40大T抗原的表达获得永生化,既保留了成纤维细胞的基本特性,又克服了原代细胞有限的传代次数,成为细胞生物学、病毒学、毒理学及衰老研究领域经典的正常二倍体细胞模型。其核心应用包括:作为研究细胞衰老、细胞周期调控以及SV40病毒致瘤机制(特别是大T抗原与抑癌基因如p53、pRb相互作用)的经典模型;用于病毒学研究,作为支持多种病毒(如腺病毒、疱疹病毒、某些呼吸道病毒)复制的宿主细胞,用于病毒培养、扩增、滴定和抗病毒药物筛选;在毒理学和药理学研究中,作为评估化合物细胞毒性、遗传毒性及初步安全性的常用正常细胞对照,尤其在研究环境毒物、药物或辐射对正常体细胞的影响方面;用于研究细胞外基质合成、细胞骨架动力学以及成纤维细胞的基本生物学功能;作为细胞共培养系统中的饲养层细胞或支持层,为其他类型细胞(如胚胎干细胞、某些原代细胞)提供生长支持;用于细胞永生化机制、端粒酶活性调控的研究;作为制备细胞裂解物或提取细胞成分的来源,用于生物化学分析;在生物制品生产(如疫苗生产)历史上曾作为基质细胞使用。WI-38 VA13细胞因其稳定、可靠且标准化的特性,是实验室中不可或缺的基础研究工具。
WI-38 VA13细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为永生化人肺成纤维细胞的特定生长需求而进行科学优化。WI-38 VA13细胞是一种贴壁生长、呈典型长梭形或纺锤形的成纤维细胞,其体外培养需要提供支持其贴壁伸展和稳定增殖的适宜环境。本产品经过精心配比,以适用于多种贴壁细胞(尤其是成纤维细胞)的最低必需培养基(MEM)为基础,并添加了能有效支持WI-38 VA13细胞贴壁、增殖并维持其形态的关键优化成分:即提供必需生长因子和附着因子的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%);以及常规浓度的青霉素-链霉素双抗溶液(终浓度1%)以有效预防细菌污染。该“MEM + 10% FBS + 1% 双抗”的配方是针对WI-38 VA13及其亲本WI-38细胞培养的经典、标准且广泛验证的方案。MEM培养基提供了细胞生长所需的基本营养成分,10%的血清浓度为成纤维细胞的贴壁、铺展和增殖提供了充足支持,而抗生素的添加则大大降低了培养过程中的细菌污染风险。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持WI-38 VA13细胞以典型的成纤维细胞形态良好贴壁生长,增殖活力稳定,为后续的病毒培养、毒性测试、分子机制探索或作为对照细胞的使用提供状态可靠且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可比性,对于需要稳定背景的对照实验或长期研究至关重要。它为广泛的基础生命科学研究,提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。
本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下:
1. 基础培养基: 最低必需培养基(Minimum Essential Medium, MEM),占比约89%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),终浓度为1%。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为贴壁生长的WI-38 VA13永生化人肺成纤维细胞提供全面的营养支持和有效的污染防护,以满足其常规培养和各类实验研究的需求。用户可根据特殊实验需求(如无抗生素培养、添加特定生长因子),在无菌条件下进行补充或调整。
1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。但需注意,反复冻融可能影响血清中某些生长因子的活性和抗生素的稳定性,建议根据实验用量分装后冻存,并避免多次冻融。
3. 使用建议:
收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入2-8℃冰箱避光保存,避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。
储存管理:建议在2-8℃下避光保存,并在有效期内使用。若需长期保存,可进行小体积分装后于-20℃冻存。
使用前准备:使用前,请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。预热时间不宜过长。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意,由于含有血清,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。
无菌操作:虽然本产品已含有抗生素,但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,以最大程度降低污染风险。
特殊实验需求:对于病毒学实验,需确认本产品所含抗生素不影响所培养病毒的活性。某些敏感的病毒学研究可能需要在无抗生素条件下进行。对于作为毒性测试的对照细胞,使用本产品可提供稳定的生长背景。若需进行无血清实验,则需更换培养基。
培养条件:WI-38 VA13细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长,需定期在显微镜下观察其典型的成纤维细胞形态(长梭形)和融合度。
细胞传代:当细胞融合度达到80-90%时,即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后,用本专用培养基完全中和胰酶,离心收集细胞,用新鲜预热的本专用培养基重悬,并按适当比例(通常1:3至1:6)接种到新的培养容器中。
换液频率:根据细胞生长速度,通常每2-3天更换一次新鲜培养基。
病毒接种与培养:可用于接种病毒,根据病毒种类调整培养条件(如温度、CO2浓度),并进行病毒扩增或蚀斑实验。
细胞毒性/活力检测:通过MTT、CCK-8或台盼蓝染色等方法,评估药物、化合物或环境因素对细胞活力的影响。
细胞周期与衰老分析:可通过流式细胞术分析细胞周期分布,或通过β-半乳糖苷酶染色检测衰老相关表型。
作为饲养层:经丝裂霉素C或辐照处理后,可作为其他类型细胞(如干细胞)的饲养层。
分子生物学研究:可用于提取RNA、DNA或蛋白质,进行基因表达、信号通路等分析。
开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存。
为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持WI-38 VA13这一经典细胞模型的纯净性至关重要,尤其是在病毒学研究或作为长期对照实验中。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的WI-38 VA13细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中贴壁良好,增殖活力稳定,细胞形态典型(成纤维细胞样),确保了产品能够有效支持该永生化成纤维细胞的稳定生长,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定、可重复背景数据的各类基础研究至关重要,是保证实验结果可靠性的基石。
1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。
2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清,冻融后可能会有少量絮状物析出,轻柔混匀后不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。
3. 污染防控:虽然本产品已含有抗生素,但为保持产品的最佳使用效果,仍不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。
4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)和抗生素(1% 双抗),可以直接使用。如无特别需要,不需要额外添加血清或抗生素。
5. 细胞特性:WI-38 VA13细胞为贴壁生长的永生化人肺成纤维细胞,具有典型的成纤维细胞形态。尽管是永生化细胞,但仍建议在较低代次时冻存足量细胞,避免长期传代可能导致的遗传漂变。
6. 病毒实验注意事项:进行病毒培养时,需在相应级别的生物安全实验室操作,并遵守相关生物安全规定。需确认培养基中的抗生素对所培养病毒无抑制作用。
7. 对照实验:作为正常细胞对照时,其生长状态需保持稳定,以确保与实验组(如肿瘤细胞)的比较具有意义。
8. 生物安全:WI-38 VA13细胞经SV40病毒转化,虽然SV40在人类中的致病性存在争议,且该细胞系已广泛使用,但操作时仍应遵守实验室生物安全规范(通常为BSL-2级),在生物安全柜内进行,废弃物应妥善处理。
9. 交叉污染:需注意避免与其他细胞系发生交叉污染,保持细胞系的纯净性。
10. 用途限制:WI-38 VA13细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。