一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-243
2. 产品名称： DiFi细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL (125mL x 4)
6. 培养基成分： 90% DMEM-H + 10% FBS
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： DiFi细胞专用培养基已包含 DiFi细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于DiFi细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

DiFi细胞系是一种人源结直肠腺癌细胞系，是研究结直肠癌生物学、分子机制、药物研发，尤其是表皮生长因子受体靶向治疗耐药机制的重要体外模型。结直肠癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，其发生发展涉及多步骤、多基因的累积性改变，包括APC、KRAS、TP53等关键基因的突变。DiFi细胞因其独特的分子特征而备受关注：它来源于一名患有家族性腺瘤性息肉病（FAP）的患者的结直肠腺癌，并且是已知的少数几个携带高水平EGFR（表皮生长因子受体）基因扩增和高表达的结直肠癌细胞系之一，这使其成为研究EGFR信号通路、抗EGFR单克隆抗体（如西妥昔单抗、帕尼单抗）作用机制及获得性耐药机制的理想模型。该细胞系通常呈上皮样形态，贴壁生长，对EGFR抑制剂高度敏感。其核心应用包括：作为体外模型深入研究抗EGFR单抗（如西妥昔单抗）的作用机制、细胞毒性效应（如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性，ADCC）以及耐药性的产生（如通过KRAS、NRAS、BRAF突变或EGFR胞外域突变等旁路激活途径）；研究结直肠癌细胞的增殖、凋亡、细胞周期调控及其信号通路网络（如EGFR/RAS/MAPK、PI3K/AKT/mTOR通路）；探索结直肠癌细胞与肿瘤微环境成分（如肿瘤相关成纤维细胞、免疫细胞）的相互作用；用于评估针对结直肠癌的其他靶向药物（如抗VEGF药物、BRAF抑制剂、MEK抑制剂等）或联合疗法的疗效；作为基因功能研究的平台，阐明驱动结直肠癌发生发展的关键基因功能；以及用于评估新型免疫疗法或抗体药物偶联物（ADC）在结直肠癌治疗中的潜力。DiFi细胞为深入理解结直肠癌，特别是EGFR依赖型结直肠癌的病理生理、耐药机制以及开发更有效的个体化治疗策略提供了一个特征独特且极具价值的标准化研究平台。

DiFi细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人结直肠癌细胞，特别是其高EGFR表达和药物敏感性研究的标准化培养与实验需求而进行科学优化。DiFi细胞是一种贴壁生长的人结直肠癌细胞，其体外培养需要提供能支持其稳定增殖并维持其分子特征（如高水平EGFR表达）的营养环境。本产品经过精心配比，以广泛适用于多种贴壁细胞，尤其是代谢旺盛的细胞类型的高糖DMEM-H（Dulbecco's Modified Eagle Medium - High glucose）培养基为基础，并添加了能有效支持DiFi细胞贴壁、铺展和增殖的关键优化成分：即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%）。该“90% DMEM-H + 10% FBS”的配方是针对许多实体瘤细胞系，包括结直肠癌细胞系培养的常用且可靠的标准方案。高糖DMEM-H培养基提供了丰富的葡萄糖、氨基酸和维生素，更有利于高代谢需求的肿瘤细胞生长。10%的血清浓度为DiFi细胞提供了均衡而充足的营养支持，能够满足其常规增殖需求，同时血清中含有的微量生长因子也可能与细胞自身的EGFR信号通路产生相互作用，模拟更接近体内的环境。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持DiFi细胞以典型的上皮样形态良好贴壁和生长，增殖活力旺盛，并维持其关键的分子表型（如EGFR高表达），为后续的药物敏感性测试（如对西妥昔单抗的敏感性评估）、信号通路研究、凋亡检测或评估新型疗法效果提供状态稳定且可靠的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及昂贵抗体药物、复杂耐药机制探索或长期功能实验的关键研究时至关重要。它为结直肠癌，特别是EGFR靶向治疗研究，提供了一个稳定、高效且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行配制。其主要成分如下：
1. 基础培养基： 高糖DMEM-H（Dulbecco's Modified Eagle Medium - High glucose），占比90%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。本产品未预先添加抗生素，用户可根据实验需求（如常规维持培养时）自行添加青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin）等抗生素。该配方旨在为DiFi细胞提供均衡的基础营养支持，以满足其在常规维持和实验研究中的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
                                     冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作与抗生素添加：所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程。由于本产品未预先添加抗生素，为降低污染风险，强烈建议用户在常规细胞维持培养时，在使用前按常规浓度（如1%）向培养基中添加青霉素-链霉素双抗溶液。对于转染或某些特定的药物处理实验，可根据实验方案决定是否使用不含抗生素的培养基。

培养条件：DiFi细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，需定期在显微镜下观察其形态（典型的上皮样）和融合度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基（或含血清的培养基）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的本专用培养基（建议已添加抗生素）重悬，并按适当比例（通常1:3至1:6）接种到新的培养容器中。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基。

药物处理实验：若用于抗EGFR抗体（如西妥昔单抗）或其他靶向药物的敏感性测试，建议在药物处理前将细胞用新鲜培养基换液，并使用处于对数生长期且状态良好的细胞。由于DiFi细胞对EGFR抑制剂高度敏感，实验设计时需设置精细的浓度梯度。

体内模型：若用于构建小鼠皮下结直肠癌移植瘤模型，需要将处于对数生长期的DiFi细胞消化、重悬于无血清培养基或PBS中，注射至免疫缺陷小鼠的皮下。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持DiFi这一重要的结直肠癌研究模型，特别是用于抗体药物和免疫治疗相关研究的纯净性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的DiFi细胞进行生长验证试验。验证时，会在培养基中添加常规浓度的抗生素。验证结果表明，细胞在本专用培养基（添加抗生素后）中贴壁良好，增殖活力旺盛，细胞形态典型，确保了产品能够有效支持该结直肠癌细胞的最佳生长状态，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持稳定的生长、EGFR表达水平及药物敏感性以进行可靠的药效和机制研究至关重要，是保证结直肠癌靶向治疗研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控与抗生素：本产品未预先添加抗生素。 为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。强烈建议用户在常规细胞培养时，在使用前按需添加抗生素（如1%青霉素-链霉素双抗），以有效预防细菌污染。同时，严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS），但不含抗生素。用户可根据实验需求自行添加。对于进行ADCC等免疫效应实验时，需注意血清可能影响免疫细胞的活性，必要时需使用无血清培养基或低血清培养基进行条件优化。

5. 细胞特性：DiFi细胞为贴壁生长的结直肠癌细胞系，对EGFR抑制剂高度敏感。需定期观察细胞形态和生长速度。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用，并记录细胞代次，因为长期传代可能影响其药物敏感性。

6. 药物敏感性：DiFi细胞是研究抗EGFR药物敏感性的经典模型。进行药物实验时，需设置合理的浓度梯度，并注意药物（特别是抗体）的储存、稀释和使用条件。

7. 模型应用：DiFi是研究结直肠癌EGFR靶向治疗（特别是西妥昔单抗）作用机制、疗效评估和耐药研究的首选模型之一，也适用于ADCC等免疫机制研究。

8. 生物安全：DiFi细胞来源于人肿瘤组织，属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。动物模型操作需符合动物伦理规范。

9. 用途限制：DiFi细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。