一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-271
2. 产品名称： NCI-H661细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL
6. 培养基成分： RPMI-1640 + 10% FBS
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： NCI-H661细胞专用培养基已包含 NCI-H661细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于NCI-H661细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

NCI-H661细胞系是一种人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系，来源于一位大细胞肺癌患者的淋巴结转移灶。该细胞系具有重要的临床和研究价值：它在分子特征上属于“三阴性”的亚型，即不携带常见的EGFR基因敏感突变、ALK基因融合和ROS1基因融合。同时，NCI-H661细胞表达高水平的c-MET蛋白（肝细胞生长因子受体），但不携带c-MET基因扩增或14号外显子跳跃突变。这使得它成为研究c-MET信号通路在肺癌（特别是EGFR野生型、ALK阴性肺癌）中作用的关键模型，也是探索c-MET抑制剂（如克唑替尼、卡博替尼）及其他靶向或化疗药物疗效的常用体外平台。其核心应用包括：作为研究c-MET（或称为HGFR）信号通路在肺癌细胞增殖、存活、迁移和侵袭中生物学功能的经典模型；评估c-MET抑制剂单药或与其他靶向药物（如EGFR-TKI、MEK抑制剂）联合使用的体外疗效和潜在协同作用；研究肺癌（尤其是非驱动基因突变型）的原发性和获得性耐药机制，特别是与c-MET信号激活相关的旁路激活路径；评估化疗药物（如顺铂、紫杉醇）对c-MET高表达肺癌细胞的敏感性；研究与c-MET相关的肿瘤干细胞特性及在治疗抵抗中的作用；探索肺癌的转移机制，特别是c-MET/HGF轴在上皮-间质转化（EMT）和微环境互作中的作用；用于药物敏感性筛选，为新药开发（尤其是针对c-MET通路的药物）提供体外数据支持；研究肺癌的代谢重编程，如谷氨酰胺代谢等，并与c-MET信号相关联；以及作为建立c-MET高表达肺癌异种移植瘤模型的细胞来源。NCI-H661细胞因其明确的c-MET高表达特征及其在代表一类缺乏经典驱动突变的难治性肺癌亚型方面的重要性，成为肺癌基础研究与靶向治疗开发领域的关键工具。

NCI-H661细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人大细胞肺癌细胞系的稳定增殖与研究需求而进行科学优化。NCI-H661细胞是一种贴壁生长、呈上皮样或部分成纤维细胞样的肿瘤细胞，其体外培养需要提供能支持其稳定增殖并维持其c-MET信号通路活性及相关细胞特性的适宜环境。本产品经过精心配比，以广泛适用于多种造血和实体瘤细胞的RPMI-1640为基础培养基，并添加了能有效支持NCI-H661细胞贴壁和增殖的关键优化成分：即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%）。该“RPMI-1640 + 10% FBS”的配方是针对NCI-H661等肺癌细胞系培养的经典、简洁且广泛使用的标准方案。RPMI-1640培养基提供了细胞生长所需的基本氨基酸、维生素和盐分。10%的血清浓度为细胞的稳定增殖提供了充足的支持。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持NCI-H661细胞以典型的形态良好贴壁生长，增殖活力旺盛，为后续的c-MET抑制剂药物测试、信号通路分析、化疗敏感性评估或基因功能研究提供状态可靠且一致的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及药物处理、分子机制探索或表型分析等精细实验时至关重要。它为c-MET高表达型非小细胞肺癌研究及抗肿瘤药物开发领域，提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下：
1. 基础培养基： RPMI-1640培养基（Roswell Park Memorial Institute 1640 Medium），占比约90%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。该配方旨在为贴壁生长的NCI-H661 c-MET高表达型大细胞肺癌细胞提供全面且充足的营养支持，以满足其常规培养和实验研究的需求。用户可根据实验需求（如药物处理、特定信号通路研究），在无菌条件下自行添加谷氨酰胺、丙酮酸钠、抗生素（如青霉素-链霉素双抗）或其他特定添加剂。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
                                     冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

添加剂补充：由于本产品为标准配方，未预添加谷氨酰胺、丙酮酸钠及抗生素。用户在使用前，应根据实验标准操作规程，在无菌条件下添加L-谷氨酰胺（终浓度通常为2 mM）、丙酮酸钠（终浓度通常为1 mM）以及青霉素-链霉素双抗（如1%体积比，终浓度通常为100 U/mL青霉素和100 µg/mL链霉素）等必需成分，以构成完全培养基。

使用前准备：使用前，请将培养基（已补充添加剂后）在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作：所有培养基配制和细胞操作均应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程，以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求：对于c-MET抑制剂药物处理实验，需注意药物溶解、储存条件及处理浓度和时间。血清可能影响某些小分子抑制剂的活性。对于无血清的药物处理或信号检测实验，可能需要更换为无血清培养基处理一段时间。

培养条件：NCI-H661细胞使用本产品（补充完全后）时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长，需定期在显微镜下观察其形态和融合度。

细胞传代：当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用完全培养基（或含血清的培养基）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的完全培养基重悬，并按适当比例（通常1:3至1:5）接种到新的培养容器中。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜完全培养基。

药物敏感性测试（MTT/CCK-8、克隆形成）：是评估c-MET抑制剂、化疗药物及其他靶向药物对NCI-H661细胞抗肿瘤活性的基本方法。

信号通路研究：通过Western Blot、免疫荧光等方法检测c-MET及其下游的PI3K/AKT、MAPK/ERK和STAT3通路在基础状态及药物处理下的激活水平。

细胞功能实验：通过划痕实验、Transwell侵袭实验评估细胞的迁移和侵袭能力。

耐药机制研究：通过长期低剂量药物暴露诱导耐药细胞株，用于研究靶向治疗或化疗获得性耐药的分子机制，特别是c-MET相关通路的变化。

体内模型准备：可用于准备细胞悬液，以建立c-MET高表达肺癌皮下移植瘤模型，用于体内药效评价。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持NCI-H661这一重要的c-MET高表达肺癌研究模型的纯净性，以及确保涉及长期培养和机制研究结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的NCI-H661细胞（在补充了标准添加剂的完全培养基条件下）进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在补充完全的本专用培养基中贴壁良好，增殖活力稳定，细胞形态典型，确保了产品基础成分能够有效支持该肺癌细胞的稳定生长，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持一致的c-MET表达水平、增殖速率以及对药物的反应性以进行可靠的药理学或机制研究至关重要，是保证肺癌靶向治疗研究实验结果准确性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 添加剂补充：请注意，本产品为标准基础配方，未预添加谷氨酰胺、丙酮酸钠及抗生素。 用户在使用前必须根据实验需求，在无菌条件下自行补充这些关键成分，以配制完全培养基。

4. 污染防控：由于本产品未预加抗生素，所有配制和操作过程中的无菌要求更为严格。务必在超净工作台内进行所有操作，并严格遵守无菌操作规程。为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。

5. 细胞特性：NCI-H661细胞为贴壁生长、c-MET高表达的大细胞肺癌细胞系。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用，并可通过Western Blot定期验证其c-MET蛋白表达水平。

6. 药物处理实验：进行c-MET抑制剂或其他靶向药物实验时，需注意药物溶解、储存条件及处理浓度和时间。需设置合适的溶剂对照组。

7. 生物安全：NCI-H661细胞来源于人肿瘤组织，属于潜在生物危害材料，具有致瘤性。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，所有接触过细胞的器皿和废弃物应按照生物危害废物标准进行处理，操作者需做好个人防护。

8. 交叉污染：需特别注意避免与其他细胞系（尤其是其他肺癌细胞系）发生交叉污染。

9. 用途限制：NCI-H661细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。