一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-239
2. 产品名称： THP-1细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL (125mL x 4)
6. 培养基成分： 90% RPMI-1640 + 10% FBS + Penicillin-Streptomycin + 0.05 mM 2-巯基乙醇 (2-mercaptoethanol)
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： THP-1细胞专用培养基已包含 THP-1细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于THP-1细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

THP-1细胞系是单核-巨噬细胞研究领域中最经典、应用最广泛的人源细胞模型之一。该细胞系来源于一名患有急性单核细胞白血病的1岁男性患者的外周血，是一个具有单核细胞特性的永生化细胞系。THP-1细胞是研究先天免疫、炎症反应、吞噬作用、免疫细胞分化、细胞信号转导以及评估药物免疫调节活性的“金标准”体外工具。该细胞系在未分化状态下呈悬浮或轻微贴壁的圆形单核细胞形态，保留了单核细胞的许多关键特征，如表达表面标志物（如CD14、CD11b），并具有吞噬能力。其最大的优势在于能够被佛波酯（PMA）等诱导剂高效地分化为类巨噬细胞的贴壁形态，激活后表达巨噬细胞标志物（如CD68），并分泌多种炎症因子（如TNF-α、IL-1β、IL-6），从而模拟组织驻留巨噬细胞的多种功能。THP-1细胞为研究巨噬细胞在多种生理和病理过程中的作用提供了一个高度可重复和标准化的平台。其核心应用包括：作为体外模型研究巨噬细胞在炎症（如动脉粥样硬化、关节炎）、感染（细菌、病毒）、肿瘤免疫（肿瘤相关巨噬细胞TAMs）和代谢性疾病（如肥胖、糖尿病）中的作用；用于评估药物、化合物或生物制剂对单核/巨噬细胞的活化、极化（M1/M2）、细胞因子分泌及吞噬功能的影响；作为研究模式识别受体（如TLRs、NLRs）信号通路、炎症小体激活、自噬以及细胞焦亡的常用模型；用于评估纳米颗粒、药物载体的免疫相容性和细胞摄取效率；作为研究泡沫细胞形成、脂质代谢与动脉粥样硬化发病机制的模型；以及用于高通量筛选调节巨噬细胞功能的先导化合物。THP-1细胞为深入理解免疫学、炎症性疾病、癌症免疫治疗及药物开发提供了一个特征明确、功能多样且极具价值的核心研究平台。

THP-1细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为单核/巨噬细胞前体细胞的标准化培养与诱导分化实验需求，特别是其对特定生长条件的敏感性而进行科学优化。THP-1细胞是一种悬浮生长的人单核白血病细胞，其体外培养不仅需要常规的血清和基础营养支持，还必须添加还原剂2-巯基乙醇（2-ME），以提供关键的巯基，维持培养基的还原环境，这对于THP-1细胞的存活和增殖至关重要。缺乏2-ME会导致细胞活力迅速下降。本产品经过精心配比，以广泛适用于血液和免疫细胞培养的RPMI 1640培养基为基础（占比90%），并添加了能有效支持THP-1细胞最佳生长状态的关键优化成分：即提供必需生长因子和附着力支持的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%），用于提供有效抗菌保护的青霉素-链霉素双抗溶液（常规添加），以及不可或缺的还原剂2-巯基乙醇（终浓度0.05 mM）。该“90% RPMI-1640 + 10% FBS + 双抗 + 0.05 mM 2-巯基乙醇”的配方是针对THP-1细胞培养的国际通用且经过充分验证的标准方案。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持THP-1细胞以典型的悬浮单核细胞状态良好生长，细胞增殖活力旺盛，为后续的诱导分化、炎症因子检测、药物处理、吞噬功能实验等提供状态稳定且可靠的细胞来源。这保证了实验结果的准确性和可重复性，特别是在进行涉及复杂免疫学表型分析、长期分化诱导或关键信号通路研究时至关重要。它为免疫学、炎症研究及药物免疫学评价，提供了一个稳定、高效且经过优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行配制。其主要成分如下：
1. 基础培养基： RPMI 1640培养基，占比90%。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin），常规添加。
4. 关键添加剂： 2-巯基乙醇（2-Mercaptoethanol, 2-ME），终浓度为0.05 mM。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可使用。2-巯基乙醇的添加对于维持THP-1细胞的活力至关重要，不可省略。该配方旨在为THP-1细胞提供适宜的生长环境，以满足其在常规维持和诱导分化实验中的需求。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
                                     冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定，特别是2-巯基乙醇的活性。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作：所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程。尽管本产品含有抗生素，但严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。

培养条件：THP-1细胞使用本产品时，应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞以悬浮方式生长，形成单个细胞或小团。需定期轻轻摇晃或吹打培养瓶以防止细胞过度聚集，并保持细胞均匀分布。

细胞传代与维持：当细胞密度达到较高水平（通常为0.8-1.0 x 10^6 cells/mL，培养基颜色变黄）时，即可进行传代。传代时，只需将细胞悬液轻柔吹打均匀，取适量细胞悬液加入到含有新鲜预热的专用培养基的新培养瓶中，稀释至适当的起始密度（通常为0.2-0.3 x 10^6 cells/mL）。定期更换新鲜培养基对维持细胞健康至关重要。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜培养基，或当培养基颜色明显变黄、细胞密度过高时进行换液或传代。

PMA诱导分化：若要将THP-1细胞分化为类巨噬细胞，需在普通培养基中加入佛波酯（PMA，通常浓度为100 ng/mL）处理24-48小时。处理后的细胞会贴壁，形态变为不规则、伸展的巨噬细胞样。分化后，需更换为不含PMA的新鲜培养基（可使用本专用培养基）进行后续实验。

实验应用：

a. 炎症因子检测：用LPS（脂多糖）等刺激物刺激细胞后，收集上清进行ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6等因子。

b.吞噬实验：可使用荧光微球或凋亡细胞等进行吞噬功能测定。

c. 细胞极化：使用IFN-γ+LPS诱导M1型极化，使用IL-4/IL-13诱导M2型极化。

d. 药物处理：若用于评估药物对巨噬细胞功能的影响，建议在分化并贴壁后，更换新鲜培养基再进行药物处理。

细胞收集：进行实验时，对于悬浮的未分化细胞，可通过离心（如1000 rpm，5分钟）收集；对于已分化的贴壁细胞，需用细胞刮或胰酶消化（分化后细胞贴附较牢，可能需要温和的胰酶消化）进行收集。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕，以减少2-巯基乙醇的挥发。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持THP-1这一核心免疫学研究模型的纯净性，以及确保涉及细胞分化、细胞因子分泌等功能实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的THP-1细胞进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中生长状态良好，增殖活力旺盛，细胞形态正常（圆形单核细胞），并能在添加PMA后成功分化为贴壁的巨噬细胞样形态，确保了产品能够有效支持该单核/巨噬细胞模型的最佳生长和分化状态，并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持稳定表型和功能以进行可靠的免疫学实验至关重要，是保证相关研究实验结果准确性和可比性的基础。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观与成分：使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。特别注意：本产品含有0.05 mM 2-巯基乙醇，该成分易挥发且有特殊气味，对细胞生长至关重要，使用时请确保瓶盖拧紧，减少挥发。

3. 污染防控：为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。虽然含有抗生素，但仍不能替代严格的无菌操作。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS）、抗生素和2-巯基乙醇，如无特别需要不用额外再添加这些成分，可以直接用于常规维持培养。切勿遗漏或省略2-巯基乙醇的添加，否则将导致THP-1细胞生长不良甚至死亡。

5. 细胞特性：THP-1细胞为悬浮生长的单核细胞系，生长迅速。需定期在显微镜下观察细胞形态（应为圆形、单个或小团）和密度，避免细胞过度生长导致活力下降。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。

6. 诱导分化：使用PMA诱导分化时，浓度和处理时间需优化。分化后的细胞贴壁牢固，换液时动作需轻柔，避免将细胞吹起。分化后细胞可维持巨噬细胞样功能数天。

7. 模型应用：THP-1是研究巨噬细胞生物学、炎症、免疫调节及药物免疫毒理学/药效学的经典模型。

8. 生物安全：THP-1细胞来源于人白血病组织，属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。

9. 用途限制：THP-1细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。