1. 货号:HY-CSC-257
2. 产品名称: SK-N-MC细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: 90% MEM + 10% FBS + 青霉素-链霉素双抗
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: SK-N-MC细胞专用培养基已包含 SK-N-MC细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于SK-N-MC细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。
SK-N-MC细胞系是一种人源神经外胚层肿瘤细胞系,通常被归类为起源于神经嵴的尤文肉瘤样肿瘤或原始神经外胚层肿瘤(PNET)的体外模型。该细胞系来源于一位14岁女性患者的恶性转移性肿瘤组织,具有未分化或低分化的神经外胚层特征。它在神经肿瘤学研究中占有独特地位,是研究尤文肉瘤家族肿瘤(ESFT)、PNET生物学特性、神经分化以及相关致癌信号通路的重要工具。尤文肉瘤和PNET是一组高度恶性的骨与软组织肿瘤,好发于儿童和青少年,与特定的染色体易位(如t(11;22)(q24;q12)产生的EWS-FLI1融合基因)密切相关。SK-N-MC细胞在体外保留了这类肿瘤的许多关键特征,是探索EWS-FLI1等融合基因功能、评估化疗药物敏感性、研究肿瘤干细胞特性以及诱导神经分化的宝贵模型。其核心应用包括:作为体外模型研究尤文肉瘤/PNET细胞的增殖、凋亡和迁移侵袭能力;评估传统化疗药物(如阿霉素、环磷酰胺、依托泊苷)及新型靶向药物对这类肿瘤细胞的杀伤效应;研究EWS-FLI1融合蛋白等致癌驱动因子及其下游信号通路(如IGF-1R、PI3K/AKT、Wnt/β-catenin通路)在肿瘤发生发展中的作用;探索通过体外添加分化诱导剂(如视黄酸、佛波酯)促使细胞向神经或神经元方向分化的潜能,用于研究肿瘤细胞的可塑性;用于基因功能研究,通过基因敲除或过表达来验证特定基因在肿瘤进展或分化中的作用;模拟肿瘤微环境,研究细胞间相互作用;以及作为建立尤文肉瘤/PNET异种移植瘤模型的体外细胞来源。SK-N-MC细胞因其明确的神经外胚层起源、与特定染色体易位的关联(据报道携带EWS-FLI1融合基因或类似变异)以及在儿童肿瘤研究领域的广泛应用,成为骨与软组织肿瘤、神经肿瘤学研究,特别是尤文肉瘤家族肿瘤研究中的重要标准化工具。
SK-N-MC细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为人神经外胚层肿瘤细胞的标准化培养与基础实验需求而进行科学优化。SK-N-MC细胞是一种贴壁生长、具有未分化或低分化特征的肿瘤细胞,其体外培养需要提供能支持其稳定增殖并维持其基本生物学特性的基础营养环境。本产品经过精心配比,以经典、应用广泛且成分明确的MEM(Minimum Essential Medium,最低必需培养基)为基础,并添加了能有效支持SK-N-MC细胞贴壁和增殖的关键优化成分:即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清(FBS,终浓度10%),以及常规浓度的青霉素-链霉素双抗(PS)以预防细菌污染。该“90% MEM + 10% FBS + PS”的配方是针对SK-N-MC这一特定细胞系常规培养的经典、通用且可靠的标准方案。MEM培养基含有细胞生长所需的最基本营养成分,配方简洁,适用于多种类型的细胞培养,包括神经来源的肿瘤细胞。10%的血清浓度为肿瘤细胞的生长提供了必要的营养和促生长因子支持。与一些其他产品不同,本产品已预先添加了抗生素,为用户提供了开瓶即用的便利性,特别适合常规的细胞维持培养和大多数基础实验,有效降低了因操作引入污染的风险,保证了细胞培养的纯净性,这对于进行长期传代或药物处理尤为重要。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持SK-N-MC细胞以典型的贴壁方式良好生长,细胞形态均一,为后续的药物敏感性测试、基础分子生物学研究或诱导分化实验提供状态可靠的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性,在进行涉及细胞增殖、基础药理学或初步分化诱导等实验时至关重要。它为尤文肉瘤、原始神经外胚层肿瘤及其他神经外胚层来源肿瘤的研究领域,提供了一个稳定、高效、即用且经过优化的专用培养解决方案。
本产品为即用型完全培养基,其配方经过优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下:
1. 基础培养基: MEM培养基(Minimum Essential Medium,最低必需培养基),占比90%。
2. 血清: 优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),终浓度为10%。
3. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin, PS),常规工作浓度(通常为100 U/mL青霉素和100 µg/mL链霉素)。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为SK-N-MC细胞提供基础且充足的营养支持并有效预防细菌污染,以满足其常规培养和大多数基础实验研究的需求。
1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。
冷冻保存: -20℃避光保存,保质期可延长至12个月。
3. 使用建议:
收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入推荐的保存温度(2-8℃或-20℃)下,避免长时间在常温或较高温度环境中保存。
储存管理:可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存,可根据日常实验用量进行分装,分装后也需严格避光保存。
使用前准备:使用前,请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,不影响产品正常使用。
无菌操作:虽然本产品已含有抗生素,但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,以最大程度降低污染风险。
特殊实验需求:对于某些特定的实验,如需进行转染、病毒感染或某些需要无血清/无抗生素条件的分化诱导研究,用户可根据需要自行评估并选择使用相应的专用培养基或对本产品进行适当调整。
培养条件:SK-N-MC细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长,需定期在显微镜下观察其形态(通常为多边形或梭形,可能聚集成簇)和融合度。
细胞传代:当细胞融合度达到80-90%时,即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后,用本专用培养基(或含血清的培养基)完全中和胰酶,离心收集细胞,用新鲜预热的本专用培养基重悬,并按适当比例(通常1:3至1:6)接种到新的培养容器中。
换液频率:根据细胞生长速度,通常每2-3天更换一次新鲜培养基。
药物敏感性测试(MTT/CCK-8等):是评估化疗药物对尤文肉瘤/PNET细胞抗肿瘤活性的基本方法。建议在处理前将细胞用新鲜培养基换液,并使用处于对数生长期的细胞。
诱导分化实验:可尝试在基础培养基中添加视黄酸、佛波酯(PMA)或dbcAMP等分化诱导剂,观察细胞形态和分子标志物(如NSE、SYP、NF等)的变化,研究其向神经方向分化的潜能。
信号通路研究:可用于研究EWS-FLI1融合基因下游的IGF-1R、PI3K/AKT等信号通路。
基因表达分析:可用于提取RNA或蛋白,分析特定基因(如EWS-FLI1靶基因)的表达水平。
体内模型准备:可用于准备细胞悬液,以建立小鼠皮下尤文肉瘤移植瘤模型。
开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。
为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持SK-N-MC这一重要的肿瘤研究模型的纯净,以及确保涉及长期培养或药物处理的实验结果的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的SK-N-MC细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中贴壁良好,增殖活力稳定,细胞形态典型,确保了产品能够有效支持该神经外胚层肿瘤细胞的稳定生长,并保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞保持一致的生长状态以进行可靠的药理学或生物学研究至关重要,是保证肿瘤研究实验结果准确性和可比性的基础。
1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。
2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常,请勿使用。
3. 污染防控:虽然本产品已含有抗生素,但为保持产品的最佳使用效果,仍不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施以避免污染。
4. 即用型说明:本产品含有血清(10% FBS)和抗生素(PS),可以直接使用。如无特别需要,不需要额外添加任何成分。
5. 细胞特性:SK-N-MC细胞为贴壁生长的肿瘤细胞系,来源于神经外胚层。需定期观察细胞形态,其可能表现出一定的聚集生长倾向。建议在较低代次时冻存足量细胞以备后续使用。
6. 诱导分化:如需进行诱导分化实验,需根据实验设计,在基础培养基中添加相应的分化诱导剂,并可能需要调整血清浓度。
7. 生物安全:SK-N-MC细胞来源于人肿瘤组织,属于潜在生物危害材料,具有致瘤性。操作时应遵守实验室生物安全规范,在生物安全柜内进行,所有接触过细胞的器皿和废弃物应按照生物危害废物标准进行处理,操作者需做好个人防护。
8. 交叉污染:需特别注意避免与其他细胞系发生交叉污染。
9. 用途限制:SK-N-MC细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。