一、产品详情

1. 货号：HY-CSC-230
2. 产品名称： hFOB1.19细胞专用培养基
3. 产品形态： 液体
4. PH范围： 7.2-7.4
5. 产品规格： 500mL (125mL x 4)
6. 培养基成分： DF12 + 10% FBS + 1% Penicillin-Streptomycin
7. 细菌检测： 阴性
8. 真菌检测： 阴性
9. 支原体检测： 阴性
10. 细胞生长实验： 细胞生长良好，形态正常
11. 内毒素含量： ≤10 EU/mL
12. 产品简介： hFOB1.19细胞专用培养基已包含 hFOB1.19细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于hFOB1.19细胞的培养。
13. 储存条件： 2℃-8℃，避光储存
14. 运输条件： 冰袋冷藏运输
15. 有效期： 3个月
16. 免责声明： 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

hFOB1.19细胞系是骨生物学、成骨细胞研究与骨骼疾病模型领域中一个独特且宝贵的人源细胞模型。该细胞系来源于自然流产的胎儿肢芽组织，是一种通过SV40大T抗原温度敏感突变体（tsA58）条件性永生化的正常人成骨细胞前体细胞（Human Fetal Osteoblastic cells）。其核心特性在于其温度敏感性：在许可温度（33.5°C）下，SV40大T抗原激活，驱动细胞快速增殖，维持其前体/未分化状态；而在非许可温度（39.5°C）下，大T抗原失活，细胞停止增殖，并能在适宜诱导条件下（通常结合地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠）分化为成熟的、具有功能的成骨细胞，表达碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）等成骨标志物，并能够矿化形成钙结节。这一特性使得hFOB1.19细胞成为研究成骨细胞分化、骨骼发育、骨形成机制以及评估药物、激素（如甲状旁腺激素PTH、雌激素）、生长因子（如BMPs）或机械应力对成骨细胞功能影响的理想体外模型。与许多肿瘤来源的骨肉瘤细胞系（如MG-63， Saos-2）相比，hFOB1.19细胞提供了更接近生理状态的、可调控的成骨细胞分化研究平台，避免了肿瘤细胞固有的基因异常干扰。其核心应用包括：研究成骨细胞分化的分子机制与信号通路调控（如Wnt/β-catenin， BMP/Smad通路）；评估药物、生物材料或物理刺激（如流体剪切力）对成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响；建立骨质疏松、骨坏死等骨骼疾病的体外模型，研究其病理机制；用于骨组织工程研究，作为评估支架材料生物相容性和成骨诱导性能的功能性细胞；以及作为筛选促骨形成药物或抗骨吸收药物的细胞模型。hFOB1.19细胞为骨代谢研究、骨科生物材料开发及骨骼疾病治疗策略探索提供了一个可控、多功能且标准化的研究平台。

hFOB1.19细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系独特的温度敏感特性及其在增殖与分化阶段的不同需求而进行科学优化。hFOB1.19细胞在增殖期（33.5°C）需要支持其快速生长的营养环境，而在分化期（39.5°C）则需要提供支持其功能成熟和基质合成的关键成分。本产品经过精心配比，以营养丰富、适用于多种哺乳动物细胞，尤其是对复杂培养条件有要求的细胞的DMEM/F12混合培养基（DF12）为基础，并添加了能有效支持hFOB1.19细胞在增殖期贴壁生长和维持活力的关键优化成分：即提供必需生长因子、激素和附着因子的优质胎牛血清（FBS，终浓度10%），以及用于提供有效抗菌保护的青霉素-链霉素双抗溶液（终浓度1%）。该“DF12 + 10% FBS + 1% 双抗”的配方是针对hFOB1.19细胞在许可温度下进行常规维持和扩增的标准培养方案。DF12结合了DMEM的高浓度营养物质与F12的广泛维生素和微量元素，为细胞提供了全面均衡的营养支持。经过长期的时间检验与严格的批次验证，本培养基能够稳定支持hFOB1.19细胞在33.5°C下以典型的成骨细胞前体形态（多角形或梭形）良好贴壁和快速增殖，为后续的大规模扩增、冻存或转入分化实验提供充足且状态可靠的细胞来源。当需要进行成骨诱导分化时，用户需在此基础培养基上，根据实验设计额外添加特定的分化诱导剂（如地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠），并将培养温度切换至39.5°C。它为骨生物学研究，特别是成骨细胞的功能研究，提供了一个稳定、高效的专用基础培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基，其配方经过优化，可直接用于细胞培养，无需用户自行配制。其主要成分如下：
1. 基础培养基： DMEM/F12混合培养基（Dulbecco's Modified Eagle Medium: Nutrient Mixture F-12）。
2. 血清： 优质胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS），终浓度为10%。
3. 抗生素： 青霉素-链霉素双抗溶液（Penicillin-Streptomycin），终浓度为1%。
注：以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀，开瓶即可用于hFOB1.19细胞的常规维持与扩增培养。请注意，本产品为增殖培养基，不含成骨诱导分化所需的特定成分（如地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠）。若需进行成骨分化实验，请根据实验方案额外添加。

四、运输和保存方法

1. 运输条件：为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性，所有产品均采用专业的冷链运输方式（冰袋冷藏运输）。
2. 保存条件与保质期：常规冷藏： 2℃～8℃避光保存，保质期为3个月。
                                     冷冻保存： -20℃避光保存，保质期可延长至12个月。
3. 使用建议：

收货处理：收到产品后，请立即检查包装是否完好，并尽快放入推荐的保存温度（2-8℃或-20℃）下，避免长时间在常温或较高温度环境中保存。

储存管理：可根据实验计划选择保存方式。建议避免反复冻融以保持血清中生长因子活性及成分稳定。若选择-20℃保存，可根据日常实验用量进行分装，分装后也需严格避光保存。

使用前准备：使用前，请将培养基在37℃水浴中预热至适宜温度（若为冷冻保存，需先完全解冻）。解冻后请轻轻颠倒混匀。请注意，冻融后可能会有少量絮状物析出，此为正常现象，不影响产品正常使用。

无菌操作：所有操作应在生物安全柜或超净工作台内进行，并严格遵守无菌操作规程。尽管本产品含有抗生素，但严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。

培养温度控制：hFOB1.19细胞的培养需要精确的温度控制。用于细胞增殖时，应使用许可温度33.5°C的培养箱（需确保CO2浓度维持在5%）。用于诱导分化时，需切换至非许可温度39.5°C的培养箱。请确保培养箱温度准确、稳定。

细胞传代：在33.5°C下，当细胞融合度达到80-90%时，即可进行传代。使用常规的胰蛋白酶/EDTA消化法进行消化。消化后，用本专用培养基（或含血清的培养基）完全中和胰酶，离心收集细胞，用新鲜预热的专用培养基重悬，并按适当比例接种到新的培养容器中，继续置于33.5°C培养箱中。

换液频率：根据细胞生长速度，通常每2-3天更换一次新鲜预热的培养基。

成骨诱导分化：当细胞在33.5°C下生长至适当密度（通常为60-70%融合度）时，可开始诱导分化。具体步骤为：吸弃原培养基，用PBS轻柔清洗细胞，然后更换为成骨诱导分化完全培养基（即在本专用培养基的基础上，添加特定浓度的地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠等诱导剂）。随后，将细胞转移至39.5°C、5% CO2的培养箱中培养。诱导期间，需每2-3天更换一次新鲜的诱导分化培养基。

实验应用：若用于细胞增殖研究、作为分化实验的起始细胞来源、基因功能研究（在增殖期进行转染等操作）或药物筛选（在增殖或分化期），请根据实验阶段（增殖33.5°C或分化39.5°C）使用相应配方的培养基并严格控制温度。

开封后保存：产品开封后，若需再次储存，务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染，并建议尽快使用完毕。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠，我们执行了全面的质量控制体系：
1. 污染物检测：每批次产品均经过严格的微生物污染检测，确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性，杜绝微生物污染风险。这对于维持hFOB1.19这一独特且珍贵的温度敏感型成骨细胞模型的纯净性至关重要，特别是其培养周期可能涉及数周的诱导分化过程。
2. 理化指标检测：产品经过严格的理化指标检测，确保澄清度、pH值（7.2-7.4）、渗透压、内毒素含量（≤10 EU/mL）等关键参数符合高质量细胞培养的标准。
3. 细胞功能验证：每批次产品均使用标准的hFOB1.19细胞在许可温度（33.5°C）下进行生长验证试验。验证结果表明，细胞在本专用培养基中贴壁良好，增殖活力正常，形态典型，确保了产品能够有效支持该细胞在增殖期的稳定扩增，并保证了卓越的批次间稳定性。这是后续成功进行成骨分化实验的基础，也是保证骨生物学研究实验结果可靠性和可重复性的关键。

六、注意事项

1. 储存与时效：请务必在推荐的温度条件（2℃～8℃）下避光保存产品，并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。

2. 外观检查：使用前请观察培养基是否澄清。培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀或颜色异常，请勿使用。

3. 污染防控：为保持产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。虽然含有抗生素，但仍不能替代严格的无菌操作。开封后重新保存时，务必采取密封措施以避免污染。

4. 即用型说明：本产品含有血清（10% FBS）和抗生素（1% 青霉素-链霉素），如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接用于细胞的常规维持与扩增。请注意，本产品为增殖培养基，不含成骨诱导成分。

5. 温度敏感性：hFOB1.19细胞的培养高度依赖精确的温度控制。请务必使用经过校准的、温度稳定的培养箱。混淆或波动培养温度将严重影响细胞的增殖或分化行为，导致实验失败。

6. 细胞特性：该细胞为温度敏感型永生化细胞。在33.5°C下可长期传代培养，但建议定期检查细胞的形态和生长特性，并在早期代次冻存足量细胞。在39.5°C下，细胞增殖基本停止，应专注于分化功能的评估。

7. 分化实验：进行成骨诱导分化时，必须使用专门的成骨诱导分化完全培养基（需额外添加诱导剂）并切换至39.5°C。分化过程通常持续2-4周，需定期换液并观察细胞形态变化及矿化结节形成。

8. 生物安全：hFOB1.19细胞来源于人胎儿组织，并通过病毒基因永生化，属于潜在生物危害材料。操作时应遵守实验室生物安全规范，在生物安全柜内进行，废弃物应按照感染性医疗废物标准进行处理。

9. 用途限制：hFOB1.19细胞专用培养基仅供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。