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HA1800细胞专用培养基

货号:HY-CSC-400

HA1800细胞专用培养基(货号HY-CSC-400)是即用型hTERT永生化培养基,含bFGF/B27/ITS开瓶即用,专为星形胶质细胞培养基优化,支持GFAP/AQP4阳性正常胶质细胞增殖与阿尔茨海默病A1/A2活化、LPS神经炎症、MPP+/Aβ神经毒性及血脑屏障共培养研究,2-8℃避光保存。

一、产品详情

1. 货号:HY-CSC-400
2. 产品名称: HA1800细胞专用培养基
3. 产品形态: 液体
4. PH范围: 7.2-7.4
5. 产品规格: 500mL
6. 培养基成分: HA1800永生化人星形胶质细胞专用完全培养基(含特定生长因子及营养添加物)
7. 细菌检测: 阴性
8. 真菌检测: 阴性
9. 支原体检测: 阴性
10. 细胞生长实验: 细胞生长良好,形态正常
11. 内毒素含量: ≤10 EU/mL
12. 产品简介: HA1800细胞专用培养基已包含 HA1800细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于HA1800细胞的培养。
13. 储存条件: 2℃-8℃,避光储存
14. 运输条件: 冰袋冷藏运输
15. 有效期: 3个月
16. 免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

二、产品介绍

HA1800细胞是一种永生化人星形胶质细胞系(Human Astrocyte 1800),通过人端粒酶逆转录酶(hTERT)永生化处理正常人星形胶质细胞而获得,是神经科学研究中极具价值的正常细胞模型。该细胞系保留了原代星形胶质细胞的关键形态特征和功能特性,具有正常的细胞周期调控和有限的增殖能力,能够稳定表达星形胶质细胞特异性标志物如胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、谷氨酰胺合成酶(GS)、水通道蛋白4(AQP4)和S100β蛋白,同时维持了对神经元的营养支持功能和神经递质代谢能力。与肿瘤细胞系相比,HA1800细胞具有更接近生理状态的反应性,能够在炎症刺激下表现出典型的A1型(神经毒性)或A2型(神经保护)活化表型,是研究星形胶质细胞生理功能和病理反应的理想体外模型。其核心应用包括:作为研究星形胶质细胞在神经系统发育、突触可塑性和神经稳态维持中支持功能的经典模型;研究阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病等神经退行性疾病中星形胶质细胞活化、炎症反应和神经毒性机制;评估候选药物和化学物质的神经毒性及血脑屏障穿透能力;研究星形胶质细胞与神经元、血管内皮细胞之间的代谢偶联、谷氨酸-谷氨酰胺循环和神经递质调控;探索脑缺血、创伤性脑损伤和癫痫等急性神经损伤后星形胶质细胞的反应性增生(胶质化)和瘢痕形成机制;用于体外构建神经血管单元和血脑屏障共培养模型,研究物质跨屏障转运机制。HA1800细胞因其稳定的正常星形胶质细胞表型、明确的非肿瘤遗传背景和可靠的实验重现性,成为神经科学基础研究、药物神经安全性评价和神经系统疾病机制探索中不可或缺的重要细胞模型。

HA1800细胞专用培养基由Cell Factory专业研发团队充分考虑该细胞系作为永生化人星形胶质细胞的特定生长需求而进行科学优化。HA1800细胞是一种贴壁生长的星形胶质细胞,细胞形态呈典型的星形或多角形,具有丰富的细胞突起,能够形成均一的单层培养,但相比成纤维细胞生长速度较为缓慢,对营养条件要求较为苛刻。其体外培养需要提供支持其贴壁生长、维持星形胶质细胞分化状态并抑制自发分化为其他细胞类型的特殊环境。本产品经过精心配比,采用DMEM/F12优化基础培养基,并添加了能有效支持HA1800细胞增殖和维持其关键生物学特性的特定成分:包括角质形成细胞生长因子(KGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等星形胶质细胞特异性生长因子,以及胰岛素、转铁蛋白、硒酸钠等无血清培养添加物(B27或N2类似物),同时配合适量的优质胎牛血清(FBS)和抗生素,以维持细胞的增殖活力和表型稳定性。经过长期的时间检验与严格的批次验证,本培养基能够稳定支持HA1800细胞以典型的星形胶质细胞形态良好贴壁生长,细胞突起丰富且伸展良好,GFAP等标志物表达稳定,为后续的免疫荧光染色、Western Blot检测、神经毒性评估、炎症刺激实验(如LPS、IL-1β、TNF-α处理)、谷氨酸摄取实验或与神经元共培养提供状态可靠、性能稳定且一致的细胞来源。这保证了实验结果的稳定性和可重复性,对于需要细胞提供稳定星形胶质细胞表型和正常神经支持功能的各类神经科学研究至关重要。它为神经退行性疾病机制探索、药物神经安全性评价和星形胶质细胞生物学研究,提供了一个稳定、高效、即用且经过充分优化的专用培养解决方案。

三、产品主要成分

本产品为即用型完全培养基,其配方经过专门优化,可直接用于细胞培养,无需用户自行添加任何成分。其主要成分如下:
1. 基础培养基: DMEM/F12培养基(1:1混合),提供细胞生长所需的基本氨基酸、维生素、无机盐和能量物质,特别优化以满足星形胶质细胞的代谢需求。
2. 生长因子: 含有碱性成纤维细胞生长因子(bFGF/FGF-2)、表皮生长因子(EGF)等星形胶质细胞特异性生长因子,促进细胞增殖和维持未分化状态。
3. 营养添加物: 含有胰岛素、转铁蛋白、硒酸钠(ITS添加物)等无血清培养补充成分,以及B27或N2神经培养添加物,支持细胞长期存活和功能维持。
4. 血清: 适量优质胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),提供必要的激素、附着因子和脂类物质,经过筛选以避免诱导细胞异常分化。
5. 抗生素: 青霉素-链霉素双抗溶液(Penicillin-Streptomycin),有效预防细菌污染。
注:以上所有组分均已按精确比例在严格的无菌条件下预先混合均匀,开瓶即可使用。该配方旨在为贴壁生长的永生化人星形胶质细胞HA1800提供全面的营养支持、维持其典型星形形态和神经胶质功能,并提供有效的污染防护。用户可根据具体的实验目的(如无血清饥饿处理、添加特定神经炎症刺激物如LPS、细胞因子如IL-1β、TNF-α,或神经毒性测试物质等),在无菌条件下进行补充。

四、运输和保存方法

1. 运输条件:为确保产品在运输过程中的稳定性和有效性,所有产品均采用专业的冷链运输方式(冰袋冷藏运输)。
2. 保存条件与保质期:常规冷藏: 2℃~8℃避光保存,保质期为3个月。这是推荐的常规保存方式。
                                     冷冻保存: -20℃避光储存,保质期可延长至12个月。但需注意,反复冻融可能影响生长因子活性和抗生素的稳定性,建议根据实验用量分装后冻存,并严格避免多次冻融。
3. 使用建议:

收货处理:收到产品后,请立即检查包装是否完好,并尽快放入2-8℃冰箱避光保存,避免任何温度剧烈波动或长时间置于室温。

储存管理:建议在2-8℃下避光保存,并在有效期内使用。若需长期保存,可进行小体积分装后于-20℃冻存。

使用前准备:使用前,请将所需用量的培养基在37℃水浴中预热至适宜温度(若为冷冻保存,需先完全解冻)。预热时间不宜过长,避免生长因子降解。请轻轻颠倒混匀后再使用。请注意,由于含有血清和生长因子,冻融后可能会有少量絮状物析出,此为正常现象,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。

无菌操作:虽然本产品已含有抗生素,但所有操作仍应在生物安全柜或超净工作台内进行,并严格遵守无菌操作规程,以最大程度降低污染风险。

特殊实验需求:对于神经炎症研究,可在此培养基中添加LPS(脂多糖)或促炎细胞因子(IL-1β、TNF-α)诱导A1型星形胶质细胞活化。对于神经毒性评估,可添加待测药物或神经毒素(如MPP+、6-OHDA、Aβ寡聚体)处理细胞。对于共培养实验,可使用本培养基维持HA1800细胞,并与神经元或其他神经细胞建立共培养体系。

培养条件:HA1800细胞使用本产品时,应在含5% CO2的37℃恒温培养箱中培养。该细胞为贴壁生长,但贴壁能力较成纤维细胞弱,需使用经过明胶或多聚赖氨酸包被的培养器皿以促进细胞附着。需定期在显微镜下观察其形态(星形、多突起、铺路石样排列)和汇合度,确保细胞健康生长。

细胞传代:当细胞汇合度达到70%-80%时,即可进行传代(避免过度融合导致细胞损伤)。使用0.25%胰酶-EDTA溶液轻柔消化细胞(消化时间较其他细胞系短,需密切观察,通常1-2分钟),避免过度消化损伤细胞突起。终止消化后离心收集细胞,按1:2至1:3比例接种于新的培养器皿中(该细胞增殖相对缓慢,不宜过高密度传代)。

换液频率:根据细胞生长速度,通常每2-3天更换一次新鲜培养基。若细胞密度较低,可适当延长换液间隔,但需确保营养充足,避免细胞因营养缺乏而分化或凋亡。

形态维持:HA1800细胞在培养过程中应保持典型的星形胶质细胞形态,具有丰富的细胞突起。若发现细胞形态变为纺锤形或失去突起,可能提示细胞发生去分化或转化,应检查培养条件或更换新批次细胞。

细胞鉴定:建议定期检测GFAP、S100β、谷氨酰胺合成酶(GS)等星形胶质细胞标志物的表达,确保细胞维持正确的表型。同时建议定期进行支原体检测和细胞身份鉴定。

开封后保存:产品开封后,若需再次储存,务必在瓶口封上封口膜或拧紧瓶盖以避免污染,并建议尽快使用完毕。开封后也应严格在2-8℃避光保存,避免反复温度波动。

五、质量控制

为确保每一批次产品的质量稳定可靠,我们执行了全面的质量控制体系:
1. 污染物检测:每批次产品均经过严格的微生物污染检测,确保细菌、真菌及支原体等污染物检测结果为阴性,杜绝微生物污染风险。这对于维持HA1800这一重要星形胶质细胞研究模型的纯净性,以及确保涉及长期神经炎症和神经毒性实验的可靠性至关重要。
2. 理化指标检测:产品经过严格的理化指标检测,确保澄清度、pH值(7.2-7.4)、渗透压、内毒素含量(≤10 EU/mL)等关键参数符合高质量细胞培养的标准,避免内毒素对神经细胞的潜在毒性影响。
3. 细胞功能验证:每批次产品均使用标准的HA1800细胞进行生长验证试验。验证结果表明,细胞在本专用培养基中贴壁生长良好,形态典型(星形、多突起、GFAP阳性)、增殖适度且状态健康,细胞保持正常的星形胶质细胞标志物表达和谷氨酸摄取功能,确保了产品能够有效支持该永生化星形胶质细胞的稳定生长并维持其分化表型,保证了卓越的批次间稳定性。这对于需要细胞提供稳定神经胶质表型和正常生理功能的各类神经科学研究至关重要。

六、注意事项

1. 储存与时效:请务必在推荐的温度条件(2℃~8℃)下避光保存产品,并在标注的有效期内使用。所有产品请于保质期内使用,超出保质期,必须放弃使用。

2. 外观检查:使用前请观察培养基是否澄清。由于含有血清和生长因子,冻融后可能会有少量絮状物析出,轻柔混匀后通常不影响产品正常使用。如发现严重浑浊、大量异常沉淀、颜色异常或产生异味,请勿使用。

3. 污染防控:虽然本产品已含有抗生素,但为保持产品的最佳使用效果,不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。同时,严格的灭菌操作仍是避免污染的关键。开封后重新保存时,务必采取密封措施,避免与空气长时间接触。

4. 即用型说明:本产品为专门针对HA1800细胞优化的完全培养基,含有特定生长因子和抗生素,可以直接使用。如无特别需要,不需要额外添加血清或抗生素,以免改变细胞生长特性或诱导异常分化。

5. 细胞特性:HA1800细胞为永生化正常星形胶质细胞,增殖速度相对肿瘤细胞系较慢,且具有接触抑制特性。建议在低代次时冻存足量细胞,并定期进行支原体检测、细胞身份鉴定(如STR分型)和表型鉴定(如GFAP免疫荧光)。

6. 缓冲液说明:本产品含有碳酸氢钠缓冲体系,常规培养时需置于含5% CO2的培养箱中以维持适宜的pH环境(7.2-7.4)。

7. 生物安全:HA1800细胞虽为永生化正常细胞,但仍来源于人体组织,属于潜在生物危害材料,操作时应在生物安全柜内进行,并遵守相应的生物安全规范(通常为BSL-2级)。所有接触过细胞的器皿、培养基和废弃物应进行妥善灭菌处理,防止环境污染和交叉感染。

8. 交叉污染:需特别注意避免与其他细胞系,特别是其他神经胶质细胞系(如U87、U251胶质瘤细胞)或成纤维细胞发生交叉污染,建议严格分开操作区域,定期进行细胞身份鉴定。

9. 用途限制:HA1800细胞专用培养基仅供进一步科研使用,不可应用于临床等其他方面。严禁用于人类或动物的临床诊断、治疗、药物生产、家庭使用或任何其他医疗目的。

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