一、基本信息

1. 产品编号：HY-C029

2. 细胞名称：3T3-L1（小鼠胚胎成纤维细胞）

3. 英文名称：3T3-L1 Mouse Embryonic Fibroblasts

4. 细胞别称：3T3 L1；NIH-3T3-L1；NIH3T3-L1

5. 种属来源：小鼠（Mus musculus）

6. 组织来源：小鼠胚胎组织

7. 细胞类型：成纤维细胞样

8. 生长特性：贴壁生长

9. 产品规格：T25培养瓶

10. 生物安全等级：BSL-1

11. 保藏机构：ATCC CL-173；ATCC CCL-92.1；BCRC 60159

12. 储存条件：液氮保存

13. 运输方式：常温运输

二、细胞特征

1. 背景特征：通过克隆分离得到的3T3（Swiss小白鼠）连续亚株；具有自发永生化特性；可诱导分化为脂肪细胞。

2. 生物学特性：受体表达：胰岛素受体表达阳性；分化特性：接触抑制后可发生前脂肪向脂肪样逆转。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM

2. 添加成分：10%胎牛血清（FBS）+ 1%青霉素-链霉素（P/S）

3. 培养环境：37℃，95%空气 + 5% CO₂

4. 传代比例：1:3-1:5

5. 换液频率：每周2-3次

6. 消化时间：1-2分钟

7. 冻存条件：55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO

8. 储存条件：液氮

四、主要应用

1. 脂肪细胞研究：前脂肪细胞分化机制研究、脂肪代谢调控分析、肥胖相关疾病模型建立

2. 代谢性疾病研究：胰岛素抵抗机制探索、糖尿病发病机理研究、代谢综合征研究

3. 药物筛选：降糖药物评价、减肥药物筛选、代谢调节剂测试

五、质量保证

1. 细胞鉴定：提供STR鉴定报告

2. 支原体检测：阴性

3. 细胞活性：复苏后活性＞90%

4. 无菌检测：细菌、真菌检测阴性

5. 代次保证：15代以内

六、培养操作指南

1. 细胞传代：吸出原培养液，加入2 mL PBS轻轻润洗细胞，加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃培养箱消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆、出现间隙时终止消化，加入3 mL含血清培养基终止消化，收集细胞悬液离心（1200 rpm，3分钟），重悬后按比例接种。

2. 分化诱导方案：诱导时机：细胞达到接触抑制状态

                              诱导条件：高血清含量培养液

                              分化特征：细胞内脂肪积累

七、注意事项

1. 无菌操作：所有操作在生物安全台内进行。

2. 传代时机：细胞密度达80%-90%时传代。

3. 消化控制：胰蛋白酶消化时间不宜过长。

4. 密度维持：保持适宜细胞生长密度。

5. 定期鉴定：建议定期进行STR鉴定。

6. 代次控制：建议使用低代次细胞进行实验。

7. 用途限制：仅限于科研用途。