一、基本信息

1. 产品编号：HY-A552

2. 产品名称：HCCLM3-Luc2（人肝癌高转移细胞）

3. 英文名称：HCCLM3-Luc2 Human Hepatocellular Carcinoma Highly Metastatic Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称：HCCLM3(Luc2)、HCCLM3-Luc、CTCC-0493-Luc2

5. 种属来源：人

6. 年龄性别：39岁；男性

7. 组织来源：肝

8. 疾病背景：肝细胞癌（高转移梯度株）

9. 细胞类型：荧光素酶报告基因稳定细胞系

10. 宿主细胞：HCCLM3（人肝癌高转移细胞系）

11. 细胞形态：上皮细胞样，贴壁生长

12. 生长特性：贴壁生长

13. 细胞规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

14. 传代代数：10代以内

15. 抗性标记：嘌呤霉素（Puromycin）抗性，维持浓度 1 µg/mL

16. 生物安全等级：BSL-1

17. 质量检测：无菌检测合格，无支原体污染，STR鉴定正确

18. RRID：—（以引种证书为准）

19. 保藏机构：—（复旦大学肝癌研究所建立，见引种证书）

二、细胞特征

1. 背景介绍：HCCLM3-Luc2 由经典人肝癌高转移细胞系 HCCLM3（源自 39 岁男性肝细胞癌患者）稳定转染 Luc2 荧光素酶报告基因构建，带嘌呤霉素抗性标记。宿主 HCCLM3 由复旦大学肝癌研究所建立，是肝癌转移研究的"金标准"模型——与 MHCC97H/MHCC97L 构成同一患者的转移梯度谱系（低/中/高转移），裸鼠肺转移率高，在肝癌转移机制与防治研究中被广泛引用。

2. 转移特性：高转移背景 + 发光标记——活体成像可实时追踪肝癌细胞在体内的播散、定植与转移灶形成，是研究转移级联（侵袭—循环—外渗—定植）与抗转移药物的理想模型。

3. 形态与生长：贴壁生长，成片/岛状融合，增殖稳定，传代性能好。

三、培养条件

1. 基础培养基：DMEM 高糖

2. 培养基配方：89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 筛选维持：可添加 1 µg/mL 嘌呤霉素维持 Luc 表达稳定（常规培养亦可不加）

4. 培养环境：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃

5. 推荐传代比例：1:2–1:4（以培养瓶底面积计）

6. 推荐换液频率：每 2–3 天一次

7. 消化液类型：0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA（消化 3–5 分钟）

8. 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（勿 -80℃ 长期保存，会降低存活率）

9. 倍增时间：约24–48小时

四、产品应用

1. 肝癌转移活体成像：肺转移/多器官转移的实时无创监测

2. 转移级联机制研究：侵袭、循环肿瘤细胞、定植与转移灶形成机制

3. 抗转移药物筛选：抗血管生成、抗侵袭及抗转移候选药物评价

4. 肝癌机制研究：高转移表型的分子机制、转移相关基因功能研究

5. 肿瘤示踪研究：体内外细胞追踪、转移模型药效评价

五、产品优势

1. 宿主权威：肝癌转移研究金标准模型，高转移梯度谱系成员

2. 转移率高：裸鼠肺转移模型成熟，表型稳定可重复

3. 发光稳定：Luc2 稳定整合表达，带嘌呤霉素抗性便于筛选维持

4. 质量可靠：生物安全 1 级，STR 鉴定正确，支原体检测阴性

六、培养方法

1. 细胞复苏：将冻存管置于 37℃ 水浴中来回晃动迅速解冻（约 2 分钟，管口置于水面之上防污染）；70% 酒精喷拭管壁后转入生物安全柜，将冻存液转入含 5 mL 完全培养基的离心管，200×g 离心 5–10 分钟去除冻存液；用预温的完全培养基重悬细胞并转入培养瓶，37℃、5% CO₂ 培养。注意：收到冻存细胞请立即解冻培养，来不及请存于液氮（-80℃ 储存会降低存活率）；运输过程中脱落的漂浮细胞仍为活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。

2. 细胞传代：吸弃培养基，PBS 清洗一次；加入 1.0 mL 0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA（12.5 cm² 培养瓶用量，可酌情增减）于 37℃ 孵育 3–5 分钟至细胞脱落分离；加入 2 mL 完全培养基终止消化并轻轻吹打分散；200×g 离心 5 分钟，去上清，适量培养基重悬后按 1:2–1:4 接种新瓶（总体积约 4 mL）；每 2–3 天换液一次。

3. 细胞冻存：胰酶消化收集细胞，无血清冻存液重悬至 1×10⁶cells/管，每管 1 mL；放入冻存盒 -80℃ 24 小时后转入液氮长期保存（勿 -80℃ 长期保存，会降低存活率）。

注意事项：本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用；体内成像实验需配套荧光素酶底物（D-荧光素）。

相关产品：MHCC97H（人肝癌高转移细胞）、MHCC97L（人肝癌低转移细胞）、HCCLM3（人肝癌高转移细胞）