一、基本信息
1. 产品编号:HY-A547
2. 产品名称:HCC1954-Luc1(人乳腺导管癌荧光素酶标记细胞)
3. 英文名称:HCC1954-Luc1 Human Mammary Ductal Carcinoma Luciferase Reporter Cell Line
4. 细胞别称:HCC1954(Luc1)、HCC1954-Luc、CTCC-0411-Luc1
5. 种属来源:人
6. 年龄性别:61岁;女性
7. 组织来源:乳腺
8. 疾病背景:乳腺导管癌
9. 细胞类型:荧光素酶报告基因稳定细胞系
10. 宿主细胞:HCC1954
11. 细胞形态:上皮细胞样,贴壁生长
12. 生长特性:贴壁生长
13. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
14. 传代代数:10代以内
15. RRID:—(以引种证书为准)
16. 保藏机构:ATCC; CRL-2338(宿主细胞 HCC1954,建议核对)
17. 抗性标记:嘌呤霉素(Puromycin)抗性,维持浓度 0.5 µg/mL
18. 生物安全等级:BSL-1
19. 质量检测:无菌检测合格,无支原体污染,STR鉴定正确
二、细胞特征
1. 背景介绍:HCC1954-Luc1 由经典人乳腺癌细胞系 HCC1954(源自 61 岁女性乳腺导管癌组织)稳定转染 Luc1 荧光素酶报告基因构建,带嘌呤霉素抗性标记,可长期稳定表达发光信号。宿主 HCC1954 是 HER2 扩增阳性的乳腺导管癌经典模型——HER2 靶向治疗(曲妥珠单抗等)敏感性及获得性耐药研究的代表细胞系,在乳腺癌分子分型与靶向药物研究中引用广泛。
2. 发光特性:Luc1 报告基因组成型表达,荧光素酶底物(D-荧光素)存在下发出生物发光信号,信号强度与活细胞数量呈正相关,适合活体成像实时追踪乳腺癌体内生长、转移及药物反应。
3. 形态与生长:上皮细胞样,贴壁生长,成片/岛状融合,增殖稳定,传代性能好。
三、培养条件
1. 基础培养基:RPMI-1640
2. 培养基配方:89% RPMI-1640 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
3. 筛选维持:可添加 0.5 µg/mL 嘌呤霉素维持 Luc 表达稳定(常规培养亦可不加)
4. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
5. 推荐传代比例:1:2–1:4(以培养瓶底面积计)
6. 推荐换液频率:每 2–3 天一次
7. 消化液类型:0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA(消化 3–5 分钟)
8. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(勿 -80℃ 长期保存,会降低存活率)
9. 倍增时间:约24–48小时
四、产品应用
1. HER2 靶向治疗研究:曲妥珠单抗/拉帕替尼等 HER2 抑制剂敏感性及获得性耐药机制研究
2. 活体生物发光成像:乳腺癌原位、皮下及转移模型的实时无创监测
3. 抗乳腺癌药物筛选:靶向药物、ADC 及联合用药方案的体内外药效评价
4. 分子机制研究:PI3K/AKT 通路、乳腺癌分子分型与标志物研究
5. 肿瘤示踪研究:细胞共培养、体内外细胞追踪实验
五、产品优势
1. 宿主经典:HER2 扩增阳性乳腺导管癌经典模型,乳腺癌靶向研究引用广泛
2. 发光稳定:Luc1 稳定整合表达,带嘌呤霉素抗性便于筛选维持
3. 成像适用:发光信号与细胞数量线性相关,适合活体成像定量分析
4. 质量可靠:生物安全 1 级,STR 鉴定正确,支原体检测阴性
六、培养方法
1. 细胞复苏:将冻存管置于 37℃ 水浴中来回晃动迅速解冻(约 2 分钟,管口置于水面之上防污染);70% 酒精喷拭管壁后转入生物安全柜,将冻存液转入含 5 mL 完全培养基的离心管,200×g 离心 5–10 分钟去除冻存液;用预温的完全培养基重悬细胞并转入培养瓶,37℃、5% CO₂ 培养。注意:收到冻存细胞请立即解冻培养,来不及请存于液氮(-80℃ 储存会降低存活率);运输过程中脱落的漂浮细胞仍为活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。
2. 细胞传代:吸弃培养基,PBS 清洗一次;加入 1.0 mL 0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA(12.5 cm² 培养瓶用量,可酌情增减)于 37℃ 孵育 3–5 分钟至细胞脱落分离;加入 2 mL 完全培养基终止消化并轻轻吹打分散细胞;200×g 离心 5 分钟,去上清,适量培养基重悬后按 1:2–1:4 接种新瓶(总体积约 4 mL);每 2–3 天换液一次。
3. 细胞冻存:胰酶消化收集细胞,无血清冻存液重悬至 1×10⁶cells/管,每管 1 mL;放入冻存盒 -80℃ 24 小时后转入液氮长期保存(勿 -80℃ 长期保存,会降低存活率)。
注意事项:本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用;体内成像实验需配套荧光素酶底物(D-荧光素)。
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