一、基本信息
1. 产品编号:HY-A545
2. 产品名称:MOLM-14(人急性髓系白血病细胞)
3. 英文名称:MOLM-14 Human Acute Myeloid Leukemia Cell Line
4. 细胞别称:MOLM14、MOLM-13 姐妹细胞系
5. 种属来源:人
6. 年龄性别:20岁;男性
7. 组织来源:外周血
8. 疾病背景:急性髓系白血病(AML FAB M5a,复发期;初诊 MDS-RAEB)
9. 细胞类型:肿瘤细胞
10. 细胞形态:单个圆形细胞,悬浮生长
11. 生长特性:悬浮生长
12. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
13. 传代代数:10代以内
14. RRID:CVCL_2118(建议按引种证书核对)
15. 保藏机构:DSMZ; ACC-777
16. 生物安全等级:BSL-1
17. 分子特征:FLT3-ITD 突变、CBL deltaExon8 突变、KMT2A-MLLT3 重排(ins(11;9))
18. 质量检测:支原体 PCR 阴性;EBV/HBV/HCV/HIV-1/2/HTLV-I/II/MLV PCR 阴性;STR 鉴定正确(ANSI/ATCC ASN-0002.1-2021 标准,与 MOLM-13 一致)
二、细胞特征
1. 背景介绍:MOLM-14 于 1995 年从一位 20 岁男性急性髓系白血病(AML,FAB M5a 型)复发患者的外周血建立——该患者初诊为骨髓增生异常综合征(MDS,RAEB 型),与 MOLM-13 为同一患者的姐妹细胞系,经德国 DSMZ 保藏(ACC-777)。该细胞携带 FLT3 内部串联重复(FLT3-ITD)突变——与 AML 不良预后密切相关,是 FLT3 抑制剂体内外研究的经典模型。
2. 分子与细胞遗传学:携带 FLT3-ITD 与 CBL deltaExon8 突变;核型超二倍体,含 KMT2A-MLLT3(MLL-AF9)插入性重排——AML 复发相关变异;与 MOLM-13 分子特征高度相似。
3. 免疫表型:CD4+、CD13(+)、CD15(+)、CD33+、HLA-DR(+)、胞质 CD68+;CD3-、CD14-、CD19-、CD34-——单核系分化特征。
三、培养条件
1. 基础培养基:RPMI-1640
2. 培养基配方:85% RPMI-1640 + 15% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗(DSMZ 方案:80–90% RPMI-1640 + 10–20% 热灭活 FBS)
3. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
4. 推荐传代比例:1:2–1:3,每 2–3 天传代
5. 推荐换液频率:2–3 次/周;维持细胞密度 0.5–1.5×10⁶cells/mL,最大密度约 2×10⁶cells/mL
6. 细胞收集方式:200–300×g 离心 5–10 分钟
7. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
8. 倍增时间:约50小时
四、产品应用
1. FLT3 靶向治疗研究:FLT3-ITD 突变背景下的抑制剂(midostaurin、gilteritinib 等)敏感性及获得性耐药机制研究
2. MDS→AML 转化研究:MDS 向急性白血病转化的分子机制
3. KMT2A 重排白血病研究:MLL-AF9 相关白血病的发生机制与靶向策略
4. 药物筛选:抗 AML 候选药物的体外活性评价
5. 免疫治疗研究:白血病抗原、免疫逃逸机制研究
五、产品优势
1. 背景经典:1995 年建系,DSMZ ACC-777 保藏,FLT3-ITD 研究引用广泛
2. 姐妹体系完整:与 MOLM-13(同患者)配对,实验设计可互为参照
3. 分子特征明确:FLT3-ITD + CBL deltaExon8 + KMT2A-MLLT3 三重分子事件,研究维度丰富
4. 质量可靠:STR 鉴定正确(国际标准化),多种病毒 PCR 阴性
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管,将细胞悬液转入含完全培养基的离心管,200–300×g 离心5分钟去除冻存液,新鲜完全培养基重悬后接种至 24 孔板(起始密度约 0.5–1×10⁶cells/mL),24小时后观察换液。
2. 细胞传代:悬浮细胞无需胰酶消化,维持细胞密度 0.5–1.5×10⁶cells/mL,细胞饱和后按 1:2–1:3 每 2–3 天传代;注意细胞最大密度约 2×10⁶cells/mL,避免过度拥挤。
3. 细胞冻存:无血清冻存液重悬细胞,程序降温后液氮长期保存;建议在较低代次冻存备份。
注意事项:本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
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