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Caki-1-Luc2(人肾癌细胞)

货号:HY-A544

Caki-1-Luc2细胞(人肾癌荧光素酶标记细胞)由Caki-1稳定转染Luc2报告基因、带嘌呤霉素抗性(1µg/mL维持),宿主源自49岁男性肾癌组织、ATCC同源(HTB-46),上皮样贴壁生长,生物安全等级1级,STR鉴定正确、无支原体,DMEM+10%FBS培养,适用于肾癌活体成像示踪、成瘤模型及抗肿瘤药物体内外评价,CellFactory现货供应。

一、基本信息

1. 产品编号:HY-A544

2. 产品名称:Caki-1-Luc2(人肾癌细胞)

3. 英文名称:Caki-1-Luc2 Human Renal Cell Carcinoma Luciferase Reporter Cell Line

4. 细胞别称:Caki-1(L-Luc2)、Caki-1-Luc、CTCC-0494-Luc2

5. 种属来源:人

6. 年龄性别:49岁;男性

7. 组织来源:肾

8. 疾病背景:肾癌(肾细胞癌)

9. 细胞类型:荧光素酶报告基因稳定细胞系

10. 宿主细胞:Caki-1(ATCC HTB-46)

11. 细胞形态:上皮细胞样,贴壁生长

12. 生长特性:贴壁生长

13. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

14. 传代代数:10代以内

15. RRID:CVCL_0234(宿主细胞 Caki-1,建议按引种证书核对)

16. 保藏机构:ATCC; HTB-46(宿主细胞 Caki-1)

17. 抗性标记:嘌呤霉素(Puromycin)抗性,维持浓度 1 µg/mL

18. 生物安全等级:BSL-1

19. 质量检测:无菌检测合格,无支原体污染,STR鉴定正确

二、细胞特征

1. 背景介绍:Caki-1-Luc2 由经典人肾癌细胞系 Caki-1(源自 49 岁男性肾癌组织,ATCC HTB-46)稳定转染 Luc2 荧光素酶报告基因构建,带嘌呤霉素抗性标记,可长期稳定表达发光信号。宿主 Caki-1 是肾癌研究中被广泛引用的经典模型,常用于 VHL 野生型肾癌背景下的信号通路、药物敏感性与肿瘤生物学研究。

2. 发光特性:Luc2 报告基因组成型表达,D-荧光素底物存在下发出生物发光信号,信号强度与活细胞数量呈正相关,适合活体成像实时追踪肾癌体内生长与转移。

3. 形态与生长:上皮细胞样,贴壁生长,成片/岛状融合,增殖稳定,传代性能好。

三、培养条件

1. 基础培养基:DMEM 高糖

2. 培养基配方:89% DMEM 高糖 + 10% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗

3. 筛选维持:可添加 1 µg/mL 嘌呤霉素维持 Luc 表达稳定(常规培养亦可不加)

4. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃

5. 推荐传代比例:1:2–1:3(以培养瓶底面积计)

6. 推荐换液频率:每 2–3 天一次

7. 消化液类型:0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA(消化 3–5 分钟)

8. 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(勿 -80℃ 长期保存)

9. 倍增时间:约24–48小时

四、产品应用

1. 活体生物发光成像:肾癌皮下/原位模型生长与转移的实时无创监测

2. 抗肿瘤药物评价:靶向药物、免疫治疗及联合方案的体内外药效评价

3. 肾癌机制研究:VHL 野生型背景下的信号通路、获得性耐药机制研究

4. 肿瘤示踪研究:细胞共培养、体内外细胞追踪实验

五、产品优势

1. 宿主经典:ATCC HTB-46 同源,49 岁男性肾癌来源,文献引用广泛

2. 发光稳定:Luc2 稳定整合表达,带嘌呤霉素抗性便于筛选维持

3. 成像灵敏:发光信号与细胞数量线性相关,适合活体成像定量分析

4. 质量可靠:生物安全 1 级,STR 鉴定正确,支原体检测阴性

六、培养方法

1. 细胞复苏:将冻存管置于 37℃ 水浴中来回晃动迅速解冻(约 2 分钟,管口勿浸入水面);70% 酒精喷拭管壁后转入生物安全柜,将冻存液转入含 5 mL 完全培养基的离心管,200×g 离心 5–10 分钟去除冻存液;用预温的完全培养基重悬细胞并转入培养瓶,37℃、5% CO₂ 培养。

2. 细胞传代:吸弃培养基,加入 1.0 mL 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 于 37℃ 消化 3–5 分钟至细胞脱落;加入 2 mL 完全培养基终止并轻轻吹打分散细胞;200×g 离心 5 分钟,弃上清,适量培养基重悬后按 1:2–1:3 接种新瓶,补足完全培养基;每 2–3 天换液一次。

3. 细胞冻存:胰酶消化收集细胞,无血清冻存液重悬至 1×10⁶cells/管,每管 1 mL;放入冻存盒 -80℃ 24 小时后转入液氮长期保存(勿存于 -80℃ 长期保存,会降低存活率)。

注意事项:本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用;运输过程中贴壁细胞可能有少量脱落漂浮,这些仍是活细胞,请勿丢弃,可离心富集后传代使用。

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