一、基本信息
1. 产品编号:HY-A529
2. 产品名称:CaCo-2-GFP(人结直肠腺癌GFP标记细胞)
3. 英文名称:CaCo-2-GFP Human Colorectal Adenocarcinoma GFP Reporter Cell Line
4. 细胞别称:CACO2-GFP、CaCo2-GFP、CaCo-2 GFP
5. 种属来源:人
6. 年龄性别:72岁;男性
7. 组织来源:结肠(直肠原位癌)
8. 疾病背景:结直肠腺癌
9. 细胞类型:GFP 报告基因稳定细胞系
10. 宿主细胞:CaCo-2(ATCC HTB-37)
11. 细胞形态:上皮细胞样,贴壁生长
12. 生长特性:贴壁生长
13. 细胞规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
14. 传代代数:10代以内
15. RRID:CVCL_0025(宿主细胞 CaCo-2)
16. 保藏机构:ATCC; HTB-37 / ECACC; 86010202 / DSMZ; ACC-169(宿主细胞 CaCo-2)
17. 生物安全等级:BSL-1
18. 质量检测:无菌检测合格,无支原体污染,STR鉴定正确
二、细胞特征
1. 背景介绍:CaCo-2-GFP 由经典人结直肠腺癌细胞系 CaCo-2 稳定转染构建,组成型表达绿色荧光蛋白(GFP)报告基因。宿主 CaCo-2 源自 72 岁男性结直肠腺癌组织,经 ATCC(HTB-37)等国际机构保藏,是国际公认的体外药物肠道吸收模型——汇合培养约 17–21 天后细胞自发分化为肠上皮样细胞,形成紧密连接、表达刷状缘酶并产生可检测的跨膜电阻(TEER),被 FDA/EMA 广泛认可用于口服药物生物利用度预测与 BCS 分类。
2. 荧光特性:组成型表达 GFP,无需底物、蓝光激发即可发出绿色荧光,信号稳定,适合细胞示踪、共培养体系及肠屏障模型中单层完整性与细胞分布的动态监测。
3. 形态与生长:上皮细胞样,贴壁生长;细胞成片生长,汇合后可出现圆顶样空泡结构(dome formation)——此为肠上皮分化特征,属正常现象;裸鼠体内可成瘤,形成与原发灶一致的中分化腺癌。
三、培养条件
1. 基础培养基:MEM(含NEAA)
2. 培养基配方:79% MEM(含NEAA)+ 20% 优质胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素双抗
3. 培养环境:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃
4. 推荐传代比例:1:3–1:6
5. 推荐换液频率:2–3 次/周
6. 消化液类型:0.25% 胰蛋白酶-EDTA(消化 3–5 分钟)
7. 冻存条件:无血清冻存液(或 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO),液氮储存
8. 倍增时间:约60–80小时
四、产品应用
1. 药物肠道吸收研究:Caco-2 单层渗透性模型(Transwell 培养 + TEER 监测)、口服药物生物利用度预测、BCS 溶解度分类
2. 肠屏障与黏膜研究:肠上皮紧密连接功能、营养物质与外源物转运机制
3. 细胞示踪与共培养:GFP 荧光示踪、3D 培养、屏障完整性动态监测
4. 肿瘤研究:结直肠癌发生机制、侵袭转移与 3D 肿瘤模型
5. 毒理与高通量筛选:食品及化妆品成分安全性评价、化合物高通量筛选
五、产品优势
1. 宿主权威:ATCC HTB-37 同源,国际公认肠吸收模型,文献引用极广
2. 模型经典:汇合自分化肠上皮特性(紧密连接、刷状缘酶、TEER),FDA/EMA 认可评价体系
3. 荧光示踪:组成型 GFP 表达,兼容吸收模型与细胞示踪双重应用
4. 质量可靠:STR 鉴定正确,支原体检测阴性,来源可溯源
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管,1000 rpm离心5分钟去除冻存液,完全培养基重悬后接种至培养瓶。注意:CaCo-2 细胞贴壁较慢,复苏后约 2–3 天才完全贴壁展开,期间勿频繁晃动培养瓶。
2. 细胞传代:细胞汇合度达80%–90%时,弃培养上清,PBS润洗1–2次,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA于37℃消化3–5分钟,细胞变圆脱落即加入含血清培养基终止,吹打成单细胞悬液(注意充分打散细胞团),按1:3–1:6比例接种新瓶。
3. 细胞冻存:无血清冻存液(或 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO)重悬细胞,程序降温后液氮长期保存;建议在较低代次冻存备份。
注意事项:细胞成片生长,汇合后可见圆顶样空泡结构(dome formation),为肠上皮分化特征而非污染;本产品仅供科学研究使用,不得用于诊断、治疗、临床及其他非科研用途。
相关产品:CaCo-2(人结直肠腺癌细胞)、HT-29-GFP(人结肠腺癌GFP标记细胞)、LS174T-GFP(人结肠腺癌GFP标记细胞)