一、基本信息
1. 产品编号:HY-K043
2. 细胞名称:小鼠原代肾足细胞
3. 英文名称:Mouse Podocytes
4. 组织来源:小鼠肾脏组织
5. 细胞类型:肾小球足细胞(终末分化细胞)
6. 生长特性:贴壁生长
7. 形态特征:不规则,含足突细胞
8. 纯度鉴定:经广谱角蛋白(PCK)或WT-1(Wilm's Tumor Protein)免疫荧光染色鉴定为阳性,纯度高于90%
9. 产品规格:5×10⁵cells/T25培养瓶或1mL冻存管
10. 生物安全等级:BSL-1
11. 质量检测:支原体检测阴性;STR 鉴定正确
12. 细胞特性:终末分化细胞,体外培养的原代细胞不能增殖
二、细胞特征
1. 背景介绍:肾小球为血液过滤器,肾小球毛细血管壁构成过滤膜——从内到外有三层结构:内层为内皮、中层为肾小球基膜、外层为上皮细胞层,上皮细胞又称足细胞,其不规则突起称足突,其间有许多狭小间隙,血液经滤膜过滤后滤液入肾小球囊;在正常情况下,血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中,仅小分子物质如尿素、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过。
2. 足细胞特性:肾足细胞即肾小球上皮细胞,附着于肾小球基底膜的外侧,连同肾小球基底膜和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障——足细胞呈星型多突状、胞体较大,由胞体伸出许多突起呈指状交叉覆盖于肾小球基底膜外表面,并通过黏附分子和蛋白多糖分子与肾小球基底膜相连;足细胞在正常情况下可以分泌肾小球基底膜的主要组成成分IV型胶原和纤维连接蛋白,在促肾纤维化因子等刺激下还能分泌具有降解肾小球基底膜作用的基质金属蛋白酶和组织蛋白酶,从而在肾小球基底膜的代谢平衡中发挥重要作用。
3. 使用提示:正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞,体外培养的原代细胞不能增殖——建议收到细胞后尽快进行相关实验。
三、培养条件
1. 专用培养基:小鼠肾足细胞完全培养基
2. 培养环境:37℃、5% CO₂、饱和湿度
3. 换液频率:每2-3天换液一次
4. 传代比例:首次传代建议1:2(终末分化细胞,传代能力有限)
5. 消化条件:0.25%胰蛋白酶(足细胞消化宜短时温和)
四、产品应用
1. 蛋白尿机制研究:足突融合与滤过屏障损伤
2. 足细胞损伤模型:高糖/嘌呤霉素诱导的足细胞损伤
3. 肾小球疾病研究:糖尿病肾病、微小病变肾病机制
4. 基底膜代谢研究:IV型胶原/纤连蛋白分泌与MMP调控
五、产品优势
1. 纯度保障:PCK/WT-1双标志鉴定,纯度90%以上
2. 标志物规范:WT-1是足细胞鉴定的经典核标志
3. 终末分化特性如实呈现:不能增殖的提示已写入,实验设计有据
4. 配套完善:专用完全培养基
六、培养方法
1. 细胞接收:75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,培养箱静置3-4小时稳定细胞状态。
2. 细胞传代:细胞密度达80%-90%时,PBS清洗一次,0.25%胰蛋白酶消化液1mL轻微转动覆盖瓶底后吸出多余消化液,37℃温浴1-3分钟,镜下观察细胞回缩变圆后加5mL完全培养基终止;按1:2比例接种传代,补充新鲜完全培养基至5mL;每2-3天换液。
3. 损伤建模:嘌呤霉素(50-100 μg/mL)或高糖处理诱导足细胞损伤模型。
4. 细胞冻存:专用冻存液重悬,程序降温后液氮保存;建议尽快使用。
注意事项:肾足细胞为终末分化细胞,体外培养的原代细胞不能增殖,建议收到细胞后尽快进行相关实验;运输用灌液培养基不能再用来培养细胞;仅限科研用途。
七、相关产品
1. 相关产品:小鼠原代肾小球内皮细胞、小鼠原代肾小管上皮细胞、大鼠原代肾足细胞