一、基本信息
1. 产品编号:HY-I287
2. 产品名称:人原代视网膜色素上皮细胞
3. 英文名称:Human Retinal Pigment Epithelial Cells
4. 细胞简称:RPE
5. 种属来源:人
6. 组织来源:视网膜组织
7. 细胞类型:原代细胞
8. 细胞形态:上皮细胞样,多角形,规则单层排列
9. 生长特性:贴壁生长
10. 细胞规格:5×10⁵cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管
11. 传代特性:可传2-3代(建议低代次使用)
12. 包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)
13. 生物安全等级:BSL-2
14. 质量检测:经S-100免疫荧光鉴定,纯度≥90%;支原体检测阴性;STR 鉴定正确
二、细胞特征
1. 背景介绍:视网膜色素上皮细胞位于神经视网膜与脉络膜之间,构成血-视网膜外屏障,承担光感受器外节吞噬更新、视黄醇(视觉)循环、营养转运与生长因子分泌等关键功能,其功能障碍是黄斑变性、视网膜脱离等疾病的核心环节。
2. 分子特征:经S-100免疫荧光鉴定阳性,纯度可达90%以上。
3. 功能特性:参与视黄醇循环,吞噬光感受器细胞外节,分泌多种生长因子;细胞分为顶部、体部和基底部三部分,极性特征明显;无再生能力,死亡后由邻近细胞填补。
4. 制备方法:采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,经上皮细胞培养基培养筛选。
三、培养条件
1. 培养基:完全培养基(基础培养基+胎牛血清+生长添加剂+1%青霉素-链霉素双抗)
2. 包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)
3. 培养环境:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
4. 推荐传代比例:1:2
5. 推荐换液频率:每2-3天换液一次
6. 消化液类型:优先使用Accutase消化液,或使用0.25%胰蛋白酶(消化时间1-3分钟,不宜过长)
7. 冻存条件:无血清冻存液或90%FBS+10%DMSO,液氮储存
四、产品应用
1. 黄斑变性研究:年龄相关性黄斑变性(AMD)发病机制与药物评价。
2. 视网膜脱离研究:视网膜脱离机制、色素上皮-光感受器互作研究。
3. 视网膜代谢研究:视黄醇循环、吞噬功能与氧化应激损伤研究。
4. 细胞治疗研究:RPE移植替代治疗、干细胞衍生RPE对照研究。
五、产品优势
1. 纯度高:S-100免疫荧光鉴定,纯度≥90%。
2. 质控严格:无支原体、细菌、酵母、真菌及常见病毒污染。
3. 极性特征完整:保留吞噬与分泌功能,较永生化RPE细胞系更接近生理状态。
4. 配套完善:提供包被与培养方案指导,技术支持响应及时。
六、培养方法
1. 细胞复苏:37℃水浴快速融化,离心去除冻存液,完全培养基重悬后接种于包被好的培养器皿,24小时后换液。
2. 细胞传代:汇合度达80%-90%时,PBS润洗,优先Accutase或0.25%胰蛋白酶消化1-3分钟,完全培养基终止,按1:2比例接种。
3. 细胞冻存:选择状态良好的低代次细胞,冻存液重悬后程序降温,液氮保存。
注意事项:人源原代细胞建议在BSL-2实验室规范操作;原代细胞建议低代次完成关键实验;仅限科研用途。
七、相关产品
1. 相关产品:人原代眼眶成纤维细胞、人原代结膜下囊成纤维细胞、人视网膜微血管内皮细胞